黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划(1151G006) 作品数:6 被引量:81 H指数:5 相关作者: 姜毓君 相丽 闫冰 霍贵成 孙大庆 更多>> 相关机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划 黑龙江省科技攻关计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 更多>>
应用于转基因食品检测的PCR技术及其进展 被引量:9 2007年 近几年全球转基因作物种植面积连年大幅度增加,随之产生的转基因食品更是琳琅满目,然而在转基因食品安全性尚无定论情况下,转基因食品的检测技术便显得尤为重要。在转基因食品检测中,PCR技术由于具有快速、灵敏、准确等一系列优点,从而得到了迅猛发展。本文介绍了转基因食品检测中使用的各种PCR技术,并根据它们各自的原理对其优缺点进行了比较和探讨,同时阐述了检测过程中应该注意的一些问题。此外,一些新技术与PCR的结合,对PCR技术的完善和发展提供了有力的支持,并在转基因食品检测中取得了良好的效果。 孙大庆 闫冰 赵宁 姜毓君关键词:转基因食品 PCR 靶序列 实时RT-PCR检测存活于乳中的单核细胞增多性李斯特菌 被引量:18 2008年 单增李斯特菌是一种可在低温下生长、能引起人畜共患病的食源性致病菌。为克服传统PCR检测的假阳性问题,有效的检测单增李斯特活菌,本研究提取单增李斯特菌的总RNA并进行反转录,以单增李斯特菌的必要毒力基因hlyA为靶基因,设计特异性引物和TaqMan探针进行实时PCR检测,研究了检测的特异性和灵敏度,考查了对人工污染牛乳进行检测的应用性。结果表明,所用引物和探针能较好的扩增目的基因,而对其他食源性致病菌无交叉反应。单增李斯特菌经1h增菌,可检出3×102CFU/ml。而经3h增菌,活菌检测限可达30CFU/ml。人工污染牛乳样品经6h增菌,检测限为17CFU/ml。此方法可应用于乳中单增李斯特菌的快速检测和污染状况调查。 闫冰 姜毓君 曲妍妍 毕宇涵 相丽 赵凤关键词:实时RT-PCR 单增李斯特菌 活菌 原料乳中蜡样芽孢杆菌的快速检测 被引量:14 2009年 目前原料乳中蜡样芽孢杆菌的检测方法繁琐费时耗力,针对此缺点建立一种操作简便快速检测方法,采用过滤富集菌体后PCR技术来检测原料乳中蜡样芽孢杆菌。整个过程只需6 h左右即可完成,检测灵敏度高达101 mL-1。这种方法是对传统检测方法的有效改进,并且达到了原料乳检测快速、准确、灵敏的要求。 赵宁 吕琦 姚丽燕 霍贵成 姜毓君关键词:PCR 原料乳 蜡样芽孢杆菌 乳酸菌风味代谢物质的基因调控 被引量:23 2007年 乳酸菌的主要风味代谢物质包括丁二酮,乙醛以及各种氨基酸。利用基因工程和代谢工程的相关技术提高乙醛和丁二酮产量,是当前乳酸菌研究的热点之一。乙醛的代谢调控主要是针对丝氨酸羟甲基转移酶的表达进行调控,或是针对丙酮酸脱羧酶和NADH氧化酶的表达采用联合调控策略;而丁二酮的代谢调控则主要集中于乳酸脱氢酶、NADH氧化酶、α-乙酰乳酸合成酶和α-乙酰乳酸脱羧酶中任意两种关键酶基因间的联合调控,并且存在进行乳酸脱氢酶,α-乙酰乳酸合成酶和α-乙酰乳酸脱羧酶3种关键酶基因联合调控的可行性。 韩希妍 孙大庆 相丽 霍贵成 姜毓君关键词:乳酸菌 基因调控 乙醛 丁二酮 Taqman探针实时PCR检测金黄色葡萄球菌的研究 被引量:1 2008年 建立了Taqman探针实时PCR方法,针对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。研究所设计的引物具有良好的特异性,而且Taqman探针实时PCR方法检测sea基因的灵敏度高,最低检出限为69 fg,并且该方法可在8 h内完成人工污染乳中金黄色葡萄球菌的检测,最低检出限为83 cfu/mL。研究所建立的方法具有特异性强、灵敏性高及操作简便等优点,适宜于牛乳中金黄色葡萄球菌污染的调查及监测。 李一松 韩希妍 赵凤 曲妍妍 周艳秋 李彬 姜毓君关键词:TAQMAN 实时PCR 牛乳 金黄色葡萄球菌 SYBR Green I荧光定量PCR检测乳中携带sea基因金黄色葡萄球菌的研究 被引量:17 2008年 金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的一种常见的致病菌,而其产生的肠毒素A是乳及乳制品食物中毒事件的主要原因。本研究建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。该方法能快速、稳定地在8h内完成对乳中金黄色葡萄球菌的检测,对人工污染乳中金黄色葡萄球菌检测的最低检出限为83CFU/ml。 李一松 王明娜 吕琦 张光辉 闫冰 相丽 姜毓君关键词:金黄色葡萄球菌 荧光定量PCR SEA基因 SYBR