农业部全国畜牧总站动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题(2010ZD108)
- 作品数：11 被引量：40H指数：4
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- 分子生物学诊断技术的应用(四)
- 2010年
- 7核酸序列分析技术
核酸是生命的遗传物质．遗传信息存在于4种单核苷酸（A，G．C，T）按不同顺序连接而成的核酸分子中．迅速准确地解读决定生命性状的密码．测定基因组的核酸序列．对于识别病原．揭示疫病变化规律是其他任何方法都无法比拟的．但它也是最烦琐和最复杂的检测技术．目前在动物检疫中尚较少采用．但有时是必须且正日益变得常用。
- 杨峻
- 关键词：分子生物学诊断技术核酸序列分析单核苷酸遗传信息动物检疫
- 鹌鹑H9亚型禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2010年
- 2009年从湖北省某鹌鹑(Coturnix coturnix Linnaeus)饲养场送检的成年产蛋病死鹌鹑的肺、脑等实质器官中,分离到一株低致病力的禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV),经AIV-PCR检测、血清中和试验、AIVHA-HI试验、ND-HI试验,证明分离的AIV为H9亚型。人工感染30日龄鹌鹑做毒力测定,结果为低致病力毒株,该毒株自然感染能引起1%～3%的成年鹌鹑死亡。
- 杨峻张蓉蓉罗青平罗玲温国元王红琳艾地云廖永洪杨前平邵华斌
- 关键词：鹌鹑禽流感病毒
- 禽多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的初步建立被引量：3
- 2015年
- 禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,PM)是引起禽霍乱的一种病原菌,能快速引起家禽的败血症等一系列病症,给我国的家禽业造成了巨大的经济损失。试验通过在Gene Bank中查询禽多杀性巴氏杆菌的全基因组序列,从而找到PM的保守序列,运用Primer5设计引物,常规PCR后得到目的核酸扩增产物。经过敏感性、特异性、干扰性等试验确定了该方法的特异性和稳定性。结果证明该方法特异性强,敏感性高,干扰性极低,并且与生化鉴定得出的结果有较高的符合率。该方法简单易操作,适合广泛应用于临床以检测禽多杀性巴氏杆菌病。
- 闫瑞雪罗青平汪辉董俊孔令严刘国平
- 关键词：PCR检测敏感性
- 湖北省部分肉鸡场致病性大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：8
- 2011年
- 对湖北省部分肉鸡场的大肠埃希菌病流行病学进行调查,从采集的50份发病及死亡鸡肝脏、心脏和气囊中共分离出21株大肠埃希菌,对其培养特性、形态特征、生化特性、致病性进行了研究,初步鉴定为大肠埃希菌。同时对分离的21株大肠埃希菌的O群抗原进行了血清型鉴定,其结果为10株O78、6株O18,2株O1,还有3株有待于进一步的血清型鉴定。动物试验表明,已鉴定出血清型的18株大肠埃希菌均有不同程度的致病性。选择临床上常用的15种药物进行药敏试验,结果显示鸡大肠埃希菌的耐药性已经到了非常严重的程度。
- 罗玲杨峻艾地云王红琳罗青平温国元张蓉蓉廖永红张琳邵华斌
- 关键词：致病性大肠埃希菌血清型耐药性肉鸡
- 中国鸽病的流行及防控现状被引量：16
- 2015年
- 对危害养鸽业的主要疫病的流行及防控现状进行了综述,重点对鸽新城疫、鸽流感、鸽痘、鸽沙门氏杆菌病、鸽大肠杆菌病、鸽毛滴虫病、鸽念珠菌病的流行特点、防控措施进行了阐述,为深入研究鸽病的防控提供思路和参考。
- 罗青平温国元王红琳张蓉蓉汪辉邵华斌
- Ⅰ型鸭病毒性肝炎与沙门杆菌病混合感染的诊治
- 2015年
- 为了诊断湖北省某养鸭场发病鸭群的病原,有效控制疫情,试验进行了病毒分离培养、RTPCR检测、细菌分离鉴定、动物感染试验、药敏试验等实验室检测。结果表明:分离得到Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)和沙门杆菌2种病原,确诊为Ⅰ型鸭病毒性肝炎与沙门杆菌病的混合感染。说明临床上病毒、细菌的混合感染发病越来越普遍,而且细菌的耐药现象日趋严重,应引起足够重视,并采取综合防控措施进行防治。
- 王红琳张蓉蓉张腾飞罗青平罗玲汪宏才艾地云杨峻邵华斌
- 关键词：沙门杆菌RT-PCR检测药敏试验诊治
- 分子生物学诊断技术的应用(一)
- 2010年
- 随着分子生物学技术的飞速发展,尤其是分子遗传学的进步,大大提高了动物病原的诊断水平。动物病原的实验室诊断技术已从常规的病原分离鉴定以及抗原和抗体的免疫学检测,进入到可对病原基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平,同时也促进了疫病快速诊断技术发展。近几年随着国家对市县级动物疫病防控设备投资逐年加大,疫病防控诊断平台建设不断加强,兽医技术人员希望普及动物分子生物学诊断技术。本刊特邀湖北省农业科学院畜牧兽医研究所杨峻研究员对分子生物学诊断技术在兽医学科领域的应用进行概述,为大家在实际应用时提供参考。主要内容包括核酸探针技术、单克隆抗体技术、核酸扩增、核酸电泳、免疫印迹技术、图谱分析、核酸序列分析、DNA芯片技术等。
- 杨峻
- 关键词：分子生物学诊断技术病原分离鉴定分子生物学技术分子遗传学免疫学检测
- 鸡源沙门菌的血清型鉴定与耐药性分析被引量：5
- 2014年
- 为了解湖北省鸡源沙门茵的血清型分布及耐药性规律，对分离的56株鸡源沙门菌进行了血清型鉴定。结果显示：鸡白痢沙门菌所占比例最高（62．5％），为优势血清型；肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门茵所占比例也较高，分别为16．1％、10．7％。采用纸片扩散（K-B）法检测分离菌株对15种药物的敏感性，56株鸡源沙门菌对呋喃妥因均敏感，对磺胺异恶唑和阿莫西林表现为较高的耐药性（大于80％），对其他12种抗菌药物表现出不同程度的耐药性（14-3％～75％）；同时多重耐药现象严重，三重以上耐药菌株占分离菌株的96．4％，其中5耐最为严重．占28．5％。
- 王红琳张腾飞罗青平罗玲艾地云张蓉蓉温国元杨峻邵华斌
- 关键词：沙门菌血清型耐药性
- 鹌鹑致病性大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离鉴定与药敏试验被引量：6
- 2010年
- 目的:分离鉴定发病鹌鹑的病原菌,并进行药敏试验。方法:从发病鹌鹑的肝脏和心脏等组织,分离细菌,进行纯化培养、生化试验、小鼠致病性试验和药敏试验。结果:经过实验室诊断确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染;用13种常用抗菌药物对分离菌株进行了药敏试验。结果表明,大肠杆菌对庆大霉素、复达欣、新霉素等药物高度敏感;沙门氏菌对复达欣、新霉素、氟哌酸等药物高度敏感。结论:药敏试验结果为规模化鹌鹑养殖场临床合理用药提供了科学依据。
- 王红琳杨峻邵华斌罗玲艾地云罗青平温国元张蓉蓉张琳
- 关键词：致病性大肠杆菌沙门氏菌药敏试验鹌鹑
- 分子生物学诊断技术的应用(二)
- 2010年
- 3核酸扩增技术-聚合酶链反应（PCR）核酸扩增包括聚合酶链反应、连接酶链反应和Qβ复制酶技术等,根据实际应用情况,主要介绍聚合酶链反应。
- 杨峻
- 关键词：分子生物学诊断技术聚合酶链反应核酸扩增技术酶技术连接酶
