国家自然科学基金(31260221)
- 作品数：8 被引量：29H指数：4
- 相关作者：杨庆利申继清蒋智华杨益超陈颖丹更多>>
- 相关机构：广西壮族自治区疾病预防控制中心广西医科大学中国疾病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 寄生虫病原相关分子模式的研究进展被引量：5
- 2013年
- 随着对传统病原微生物的病原相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)认识的深入,发现寄生虫PAMPs存在的线索。寄生虫PAMPs在分子结构、与受体的结合方式、胞内信号转导途径和诱导效应等方面与传统PAMPs均有所差异。本文从上述方面综述了寄生虫PAMPs的研究进展。
- 杨庆利申继清
- 关键词：寄生虫病原相关分子模式模式识别受体天然免疫
- 基于核糖体DNA ITS区和COX1基因鉴别华支睾吸虫囊蚴被引量：14
- 2014年
- 目的基于核糖体DNA ITS区和COX1基因,PCR鉴别鱼体内华支睾吸虫囊蚴。方法于2013年5月底采集广西横县某水库的麦穗鱼,用消化法从鱼肉组织中分离单个华支睾吸虫囊蚴及其他吸虫囊蚴;PCR检测华支睾吸虫核糖体DNA ITS区和COX1基因,并分析检测的灵敏性和特异性。结果分离到不同发育阶段的华支睾吸虫囊蚴并经PCR检测证实。用针对核糖体DNA ITS区和COX1基因的PCR均能检测到单个华支睾吸虫囊蚴DNA,其特异性扩增条带大小分别为437/549、156/249和195/166 bp。用核糖体DNA ITS1和ITS2区的通用引物和特异性引物扩增华支睾吸虫囊蚴DNA的阳性数之比分别为0.905和0.952。针对COX1基因的特异性扩增均检测到目标DNA,并且扩增条带较亮。用该方法对其他吸虫囊蚴检测的对比试验显示特异性引物均未出现任何非特异性扩增反应;用ITS区通用引物检测其他吸虫囊蚴则显示出严重的非特异性扩增反应。结论通过形态观察结合PCR法识别出了不同发育阶段的华支睾吸虫囊蚴。用华支睾吸虫核糖体DNA ITS区的特异性引物进行PCR检测的灵敏性和特异性均优于相应通用引物。针对COX1基因的特异性PCR检测的灵敏性和特异性与核糖体DNA ITS区的检测结果相当。
- 杨庆利申继清蒋智华杨益超李红梅陈颖丹周晓农
- 关键词：华支睾吸虫囊蚴ITS区PCR
- 华支睾吸虫感染误诊1例
- 2017年
- 患者,男,39岁,广西壮族自治区百色市平果县人,经商。因“身目黄染1周”,于2016年10月22日入住右江民族医学院附属医院。患者1周前无明显诱因下出现皮肤、巩膜黄染,伴腹痛、呕吐、乏力、眼花、尿黄、发热,腹痛以右上腹及剑突下为主,呕吐胃内容物,非喷射状,体温高达39℃。曾在平果县人民医院住院治疗,行腹部B超、CT等检查,诊断为“胆结石并胆囊炎”,予对症处理,病情无好转,为进一步诊治而入院。
- 韦小琼蒋智华
- 关键词：华支睾吸虫感染误诊巩膜黄染胃内容物
- 基于线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1基因鉴别华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的双重PCR法的建立被引量：5
- 2018年
- 分别提取华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的基因组DNA,针对两种吸虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1(COX1)基因设计引物,进行单重和双重PCR扩增。用针对华支睾吸虫的3对引物进行单重PCR扩增,FC1/RC1和FC3/RC3引物分别扩增出328 bp和356 bp的特异性目的条带,而FC2/RC2引物未扩增出任何条带;用针对扇棘单睾吸虫的FH1/RH1和FH2/RH2引物进行单重PCR扩增,分别扩增出200 bp和190 bp的特异性目的条带。用华支睾吸虫FC1/RC1引物,结合扇棘单睾吸虫的FH1/RH1和FH2/RH2引物,分别进行双重PCR扩增,均能扩增出特异性条带,彼此间无干扰。
- 蒋智华杨庆利杨益超
- 关键词：华支睾吸虫双重PCR
- 华支睾吸虫排泄-分泌产物对小鼠巨噬细胞一氧化氮产生和核转录因子κB活化的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)排泄-分泌产物(ESPs)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7一氧化氮(NO)产生与核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法用20μg/ml华支睾吸虫ESPs水溶性浓缩物及其有机溶剂提取物(ESPs-ex)和0.1μg/ml明尼苏达沙门氏杆菌脂多糖(LPS-SM)分别刺激RAW264.7细胞,未刺激对照组加入等量Hank’s平衡盐缓冲液(HBSS)。实验同时用0.3 mmol/L诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)抑制剂SMT作为干预。细胞培养18 h后,用Griess法检测各组细胞培养上清液NO2-浓度。将p Ni Fty2-SEAP质粒转染至4组刺激后RAW264.7细胞,培养18 h后,检测培养上清液中可溶性胚胎碱性磷酸酶(SEAP)的吸光度(A620值),倒置显微镜观察细胞内SEAP催化显色情况。结果经ESPs-ex和LPS-SM刺激后,细胞培养上清液中NO2-浓度分别为(14.30±1.62)和(14.10±2.17)μmol/L,均较未刺激对照组[(7.70±0.95)μmol/L]显著增加(P<0.05);加入SMT后,两组NO2-浓度显著下降,分别为(8.97±0.81)和(4.96±1.36)μmol/L(均P<0.05)。经ESPs刺激后,上清液中NO2-浓度为(4.06±0.62)μmol/L,较未刺激对照组显著降低(P<0.05);加入SMT后,NO2-浓度为(3.99±0.87)μmol/L,无明显变化(P>0.05)。ESPs刺激后,上清液SEAP的A620值为0.836±0.005,显著高于未刺激对照组(0.097±0.009)(P<0.05);镜下可见细胞内出现广泛、强烈的蓝色显色反应。ESPs-ex和LPS刺激后,上清液SEAP的A620值分别为0.112±0.004和0.116±0.009,略高于未刺激对照组(P>0.05);镜下见部分细胞内出现蓝色显色反应。结论华支睾吸虫ESPs能够促进RAW264.7细胞活化NF-κB,其水溶性浓缩物可抑制NO产生,ESPs-ex和LPS-SM可促进NO产生。
- 杨庆利蒋智华申继清陈颖丹周晓农
- 关键词：华支睾吸虫病原相关分子模式一氧化氮
- 华支睾吸虫来源极性差异化合物的高效薄层色谱免疫分析被引量：3
- 2014年
- 目的探索华支睾吸虫ESPs、虫卵和虫体水溶性组分中生物大分子极性和抗原性的差异并寻找可行的分离方法。方法用HPTLC法分离华支睾吸虫ESPs、虫卵和虫体的水溶性组分,同时结合免疫染色法研究极性差异组分的抗原性。结果用有机溶剂组合可将ESPs、虫卵和虫体水溶性组分中极性强弱差异的化合物分离开。氯仿︰甲醇︰水(11︰9︰2)溶剂组合对弱极性化合物各组分有较好的分离效果。与虫卵相比较,ESPs和虫体的弱极性组分较复杂。不能被有机溶剂展开的强极性组分的抗原性较强,未检测出弱极性组分的抗原性反应。通过有机溶剂提取的弱极性组分可完全在水中复溶并被有机溶剂重新展开。结论华支睾吸虫来源的水溶性组分中的弱极性化合物成分能通过有机溶剂组合进行有效分离。这为分离华支睾吸虫来源的脂类等弱极性生物大分子以及研究其病原相关分子模式的性质奠定了基础。
- 杨庆利申继清蒋智华陈颖丹周晓农
- 关键词：华支睾吸虫抗原性HPTLC病原相关分子模式
- TLR2变异型C57BL/6J小鼠对华支睾吸虫的易感性研究被引量：4
- 2017年
- 目的研究TLR2信号对华支睾吸虫易感性和成虫发育的影响。方法 TLR2野生型和变异型C57BL/6J小鼠灌胃感染60个华支睾吸虫囊蚴,同时设立未感染对照组。小鼠感染后第10d开始连续收集粪便;于感染后30、60、90和120d解剖小鼠,观察肝胆管病变,同时收集血清并制作肝脏组织标本。用ELISA法检测血清华支睾吸虫IgG相对水平;用Kato-Katz法检查小鼠粪便中的华支睾吸虫虫卵;肝脏组织经固定、切片后进行HE染色,显微镜下观察病理变化。结果 TLR2野生型和变异型C57BL/6J小鼠感染华支睾吸虫后血清特异IgG水平升高,且感染30d时的A450值后者高于前者(t=3.543,P<0.05);感染小鼠粪便内均未检出虫卵;感染小鼠的胆总管扩张,以TLR2变异型小鼠尤其明显;TLR2变异型小鼠感染60d时肝内胆管见有华支睾吸虫幼虫,TLR2野生型小鼠肝内胆管未检出华支睾吸虫;TLR2变异型小鼠感染120d时镜检肝细胞片状坏死,胆管组织恶性增生,TLR2野生型小鼠未发生上述病变。结论TLR2变异型C57BL/6J小鼠对华支睾吸虫的易感性增高。TLR2信号是C57BL/6J小鼠抵抗华支睾吸虫感染的重要因素,并对虫体发育和肝胆管组织恶性转化发挥抑制作用。
- 申继清申继清杨庆利蒋智华石云良万孝玲
- 关键词：华支睾吸虫C57BL/6J小鼠易感性
