国家自然科学基金(无)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 相关机构:河南科技大学中国科学院更多>>
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- 相关领域:生物学更多>>
- 钼还原菌中TrxR的原核表达及多克隆抗体制备
- 2016年
- [目的]构建枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)原核载体,表达、纯化TrxR重组蛋白,制备并鉴定多克隆抗体。[方法]通过分子克隆获得TrxR蛋白的表达菌株;利用镍离子亲和层析获得纯化的TrxR重组蛋白,免疫兔子制备TrxR蛋白多克隆抗体;采用ELISA法测定抗体效价;Western Blot检测抗血清的特异性。[结果]TrxR重组载体双酶切结果与DNA测序鉴定结果一致,蛋白表达纯化条带大小与预测一致。ELISA法测定抗血清效价为7×104,Western Blot证实抗血清有较高的特异性。[结论]成功克隆、表达与纯化TrxR重组蛋白,制备并鉴定兔子多克隆抗体,为TrxR的生物学功能研究奠定基础。
- 张红梅尤晓颜龚明贵李婷婷王媛媛
- 关键词:多克隆抗体重组蛋白WESTERNBLOT
- 嗜酸硫杆菌属物种的比较基因组学分析
- 2014年
- [目的]对喜温嗜酸硫杆菌和氧化亚铁嗜酸硫杆菌菌株的基因组数据进行比较分析和数据挖掘。[方法]采用Blast程序、MUMmer软件以及Artemis比对软件对4株嗜酸硫杆菌的基因组序列和蛋白质组序列进行同源比对分析以及可视化呈现,并通过RT-PCR对缺失基因进行验证。[结果]与喜温嗜酸硫杆菌相比,氧化亚铁嗜酸硫杆菌不含有鞭毛编码基因,并且含有较少的转座元件(26和41个);喜温嗜酸硫杆菌主要采用SOX系统(clusterⅠ和clusterⅡ)进行无机硫化合物的氧化;除硝酸盐还原外,氧化亚铁嗜酸硫杆菌还可以通过固氮酶(AFE1522-1515和Lferr_1240-1233)固定氮气获得氮源。此外,插入序列造成硫氧化还原酶基因的缺失以及7个功能基因失活等现象表明冶金微生物基因组存在不稳定性。[结论]比较基因组学为更好地挖掘嗜酸硫杆菌属物种的基因组数据信息、揭示其基因组结构特征以及冶金性状等差异提供了重要支持。
- 李净净纠敏姜成英汪伦记王渡创尤晓颜
- 关键词:比较基因组学生物冶金
- 喜温嗜酸硫杆菌SM-1重金属抗性分子机制研究被引量:3
- 2013年
- 目的:从基因组水平揭示冶金微生物喜温嗜酸硫杆菌SM-1的重金属抗性分子机制。方法:采用454 GSFLX测序平台对SM-1进行基因组测序,利用NCBI非冗余蛋白数据库、Uniport蛋白数据库以及基因组百科全书数据库(KEGG)对全基因组序列进行功能注释,通过比较基因组分析参与重金属抗性的基因及可能的分子机制。结果:基因组中34个基因编码重金属抗性相关蛋白,其中29个基因参与砷酸盐、汞、镉、锌、钴等重金属抗性机制;38个基因参与维持细胞内适宜的蛋白质折叠环境,这将有助于SM-1适应高浓度重金属离子的生物冶金环境。结论:基因组学手段为全面揭示喜温嗜酸硫杆菌的重金属抗性分子机制提供了帮助,也为进一步通过遗传改造提升其重金属抗性、进而提高冶金效率提供理论指导。
- 尤晓颜马丽苹姜成英
- 关键词:重金属抗性生物冶金基因组