江苏省自然科学基金(BK2002071)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：金坚陶永辉张莲芬周楠迪田亚平更多>>
- 相关机构：江南大学苏州大学苏州大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组人血管抑素的表达、复性优化及活性研究被引量：1
- 2006年
- 目的探索一种实效、经济的血管抑素制备工艺。方法对基因工程菌(E.coli,M15/pQE/AS)的IPTG诱导条件及包涵体复性纯化条件进行优化,产物以SDS-PAGE鉴定纯度,在人微血管内皮细胞模型及鸡胚尿囊膜模型上鉴定其生物学活性。结果经优化后重组人血管抑素的表达量约达菌体蛋白的30%,纯化的重组人血管抑素可显著抑制人微血管内皮细胞的增殖,最高抑制可达47%,并可显著抑制鸡胚尿囊膜模型上血管的生成。结论该表达、复性工艺简单,高效可行。
- 陶永辉赵砚婷张莲芬蔡刚明金坚
- 关键词：血管抑素包涵体鸡胚尿囊膜
- 重组人血管抑素生产菌培养基优化的研究被引量：2
- 2004年
- 用正交试验对血管抑素生产菌株E .colipQE32 AGN的发酵培养基成分进行了优化 ,优化后的合成培养基组成为 :无水葡萄糖 1% ,(NH4) 2 SO40 .4 % ,NaCl0 .2 % ,KH2 PO40 .3% ,K2 HPO42 % ,MgSO40 .0 1% ,盐酸硫胺素 0 .4mg/L ,核黄素 0 .1mg/L ,盐酸吡哆醇 0 .6mg/L ,D 泛酸 0 .3ml/L ,硫酸亚铁 30mg/L ,硫酸锂 30mg/L ,硫酸锰 2 5mg/L ,醋酸锌 2 0 mg/L ,硫酸铝 9mg/L ,优化后的生物量达到 9.0g/L以上 ,比采用LB培养基培养的生物量提高了一倍多。同时 ,优化培养基对工程菌目的蛋白的表达、溶解及复性未产生不利影响。
- 邵玲莉周楠迪金坚许正宏田亚平
- 关键词：血管抑素高密度发酵正交试验复性
- 竞争酶联免疫吸附试验检测人血管抑素的方法建立及其应用研究被引量：3
- 2004年
- 目的 研究建立竞争酶联免疫吸附试验 (竞争ELISA)检测血管抑素的方法 ,并探讨其临床应用价值。方法 以重组人血管抑素作为抗原免疫家兔 ,制备抗人血管抑素多克隆抗体 ,建立竞争ELISA法 ,并检测 6 1例肿瘤患者和 2 0名正常献血员血浆中血管抑素含量。结果 竞争ELISA法的灵敏度为 5mg/L ,批内和批间变异分别为 2 7%～ 3 2 %和 4 9%～ 5 1% ,平均回收率为10 0 4 %。血浆血管抑素含量在 2 0名献血员中为 2 7 2 2± 7 4 4mg/L ,2 8例胃癌患者为 5 7 15±2 9 90mg/L ,6例乳腺癌为 6 7 5 1± 2 0 88mg/L ,6例肝癌为 92 0 3± 18 72mg/L ,11例急性淋巴细胞性白血病为 4 1 72± 9 99mg/L ,10例其他肿瘤 (2例胆囊癌 ,3例结肠癌 ,2例前列腺癌 ,3例卵巢癌 )为 78 78± 2 0 4 4mg/L ,均显著高于正常人 (P <0 0 5或 0 0 1)。结论 建立的竞争ELISA为临床提供了一种简单、灵敏和特异地检测人血管抑素的方法 ,并可作为肿瘤诊断的一种新检测指标。
- 何杨沈文红陶永辉阮长耿
- 关键词：人血管抑素酶联免疫吸附试验献血员血浆ELISA
- Angiostatin作用靶点的初步研究被引量：6
- 2006年
- 目的研究血管抑素对血管内皮细胞作用的靶点。方法以99Tcm-重组人血管抑素、FITC-重组人血管抑素和FITC-重组人血管抑素抗体为示踪分子,进行小鼠S180肿瘤模型显像、Matrigel血管模型放射自显影和HMEC-1细胞的流式细胞术。采用亲和甑别技术对重组人血管抑素结合分子实施了分离,MS测序,并与蛋白质数据库进行了比较。结果99Tcm-重组人血管抑素可聚集在S180肿瘤部份,其特异地识别部位为新生血管。流式细胞术提示HMEC-1细胞表面存在重组人血管抑素的结合位点,亲和甑别发现3种结合蛋白,其中预测分子tubulin是重要的肿瘤药物靶点。结论血管抑素的作用靶点是特异靶向新生血管内皮细胞的,且其作用可能是多因素的。
- 陶永辉张莲芬金坚
- 关键词：血管抑素结合蛋白
- 重组大肠杆菌生产人血管抑素的发酵条件被引量：2
- 2004年
- 对重组人血管抑素表达菌株pQE32 AGN的生长及产物表达规律进行了探索,确定了最佳发酵条件.培养温度为37℃,初始pH7.0,OD600为0.8～1.0时开始诱导,诱导持续时间为6h,诱导剂浓度为0.1mmol/L,最终目的产物达到菌体总蛋白的35%,rhAGN的表达量达到560mg/L.
- 邵玲莉周楠迪吴奇凡金坚田亚平
- 关键词：人血管抑素重组大肠杆菌发酵条件
- 血管抑素作用特异性及其结合蛋白的初步研究
- 采用99Tcm-rhAS,在S180肿瘤和Matrigel模型上分别进行了显像及放射自显影的研究,以求明确AS的作用特异性。结果发现S180肿瘤及Matrigel模型对99Tcm-rhAS特异性摄取,表明AS可与新生血管...
- 陶永辉张莲芬金坚
- 关键词：血管抑素MATRIGEL结合蛋白
- 文献传递
- ^(99)Tc^m-angiostatin的体内分布及其与新生血管作用的实验研究被引量：1
- 2006年
- 本文研究血管抑素(Angiostatin,AS)对血管内皮细胞作用的特异性。采用SnCl2还原法制备99Tcm-rhAS,通过鼠尾静脉注射99Tcm-rhAS,观察其体内分布并在小鼠S180肿瘤和Matrigel模型上进行显像及放射自显影,研究AS对新生血管的作用特异性。结果显示,99Tcm-rhAS在体内通过肝、肾进行代谢;S180肿瘤和Matrigel均可特异性摄取99Tcm-rhAS。S180肿瘤及Matrigel模型对99Tcm-rhAS特异性摄取表明AS可与新生血管特异性结合,其抑制肿瘤的作用是基于靶向血管内皮细胞的。
- 陶永辉张莲芬尤徐阳万卫星金坚
- 关键词：血管抑素显像S180肿瘤^99TC^M
