长江学者和创新团队发展计划(IRT0866)
- 作品数：12 被引量：99H指数：6
- 相关作者：吴清民郭鑫盖新娜陈艳红杨汉春更多>>
- 相关机构：中国农业大学生物技术有限公司国家食品安全风险评估中心更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 牛奶及奶粉中三聚氰胺残留酶联免疫检测方法的研究被引量：3
- 2012年
- 通过4,6-二氨基-2-氯-1,3,5-三嗪与对氨基苯丁酸反应获得三聚氰胺半抗原,再以活性酯法与载体蛋白偶联制备三聚氰胺免疫原或包被原。免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备出针对三聚氰胺的特异性单克隆抗体。采用间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)建立检测三聚氰胺的标准曲线,线性范围是17.4～345.5ng/mL,50%抑制浓度(IC50)61.3ng/mL。牛奶和奶粉加标回收率在68.1%～91.0%,变异系数在2.4%～14.5%。结果表明,该方法可以满足牛奶和奶粉中三聚氰胺残留分析要求。
- 张建勋王战辉王亚辉吴小平李建成王照鹏江海洋沈建忠
- 关键词：牛奶奶粉三聚氰胺CIELISA
- 布鲁氏菌wecA基因缺失株构建及其毒力、免疫效力评价
- 为了研究开发新型布鲁氏菌安全、具有诊断标记的基因缺失疫苗,本文利用非标记的基因同源重组技术对羊布鲁氏菌wecA基因进行删除,获得羊布鲁氏菌缺失菌株BDwecA。通过吖啶黄凝集试验和结晶紫染色试验鉴定该基因缺失菌株BDwe...
- 牛建蕊任婕吴清民
- 关键词：粗糙型同源重组
- 文献传递
- 脑心肌炎病毒VP1蛋白100位氨基酸的突变导致其对小鼠致病性的改变被引量：5
- 2011年
- 作为脑心肌炎病毒(EMCV)的天然宿主,感染小鼠能引发多种疾病,其中包括脑炎、心肌炎及糖尿病.本研究利用之前构建完成的EMCV分离毒株BJC3的野生型感染性克隆,采用定点突变方法构建了4个VP1第100位氨基酸突变的突变株感染性克隆(VP1第100位氨基酸分别突变为丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和脯氨酸)并获得了拯救病毒.虽然各突变病毒及野生型亲本拯救病毒在BHK-21细胞上形成的噬斑大小有所不同,但各病毒在BHK-21细胞上的复制水平未见差异.通过对突变病毒致病性进行系统分析,探究了VP1第100位氨基酸在病毒致病性及感染后疾病表型中所起的重要作用.结果表明,异亮氨酸和脯氨酸突变病毒对小鼠的致死率降低,脑中病毒载量减少且脑组织损伤轻微,而丝氨酸和丙氨酸突变病毒表现了与野生型亲本病毒相似的高致病性.结果证实,EMCVVP1第100位苏氨酸在病毒的体内复制中起重要作用,其突变会导致病毒对小鼠致病性的改变.
- 朱书盖新娜宫晓文郭鑫陈艳红杨汉春
- 关键词：VP1突变
- 布鲁氏菌病流行及防控技术研究对策
- 布鲁氏菌病(简称"布病")是人和动物、羊、猪等动物共患的传染病,也是国家法定检疫—扑杀被感染家畜的三大疫病(口蹄疫、布病和结核病)之一。人群发病主要是由于接触污染的环境、患病动物及其产品引起,主要表现为持续性感染状态,病...
- 吴清民
- 文献传递
- 动物布鲁氏菌病新型防控技术及研究进展被引量：8
- 2011年
- 布痛是种由来已久的动物疲病，早在1905年我国就有了布病的报道，对布病的防控也经历了百年风雨，也曾经很好的控制了该病的流行，但是仍然不能彻底净化。近几年布病又有抬头之势，各地有频频发病的报道。传统的检疲一扑杀一无害化处理的方式是否能被改进或取代，传统疫苗的技术瓶颈是否能被突破，布病的发病情况和诊断技术又有哪些特点，请关注本期的特别策划内容。
- 吴清民
- 关键词：防控技术布鲁氏菌病动物发病情况布病
- 奶牛的几种重要繁殖障碍类传染病防控措施被引量：2
- 2010年
- 母牛繁殖障碍给养牛业造成了巨大的经济损失，严重影响着奶牛业的发展，其中包括死胎、流产、不孕等繁殖力下降或不能繁殖的异常生理状态。引发的因素很多，如先天性、营养性、管理性和病理性等因素，其中病理性因素包括传染性因素和非传染性因素，而传染性因素是引发母牛繁殖障碍的重要因素之一。临床上母牛繁殖障碍表现为妊娠母牛流产、死胎、木乃伊胎，产出无活力弱仔、畸形胎儿和不育。
- 张春燕吴清民
- 关键词：繁殖障碍奶牛业防控措施传染病非传染性因素妊娠母牛
- 羊布鲁氏菌16M基因组分泌蛋白的生物信息学分析被引量：13
- 2009年
- 对羊布鲁氏菌全基因组16M中全部3 197个氨基酸序列进行生物信息学分析。利用SignalP和TatP软件分析N-端信号肽,结果显示具有N-端信号肽的序列有288个;继而用TMHMM和Phobius软件对这288个序列进行跨膜区预测,得到不含跨膜区的蛋白208个;最后利用LipoP对这208个蛋白进行分类,得到具有信号肽的蛋白191个。使用SecretomeP软件对被预测为无信号肽的蛋白质进行分析,结果显示有391个可能通过非经典途径分泌。由于分泌蛋白在细菌的致病过程中起着重要作用,而布鲁氏菌基因组编码的大多数蛋白的功能尚未确定,因此分析和预测布鲁氏菌的分泌蛋白可为更完整地、系统地研究布鲁氏菌的分子致病机理提供非常重要的信息。
- 杨羽吴清民
- 关键词：布鲁氏菌信号肽分泌蛋白
- 喹乙醇对HepG2细胞抗氧化系统的影响被引量：9
- 2010年
- 目的:观察喹乙醇对人肝癌细胞(HepG2)抗氧化系统的影响,探讨喹乙醇诱导HepG2细胞氧化性损伤的机制。方法:分别将0、200、400、800μg/ml的喹乙醇作用于HepG2细胞24h后,检测各组细胞内抗氧化酶/物的变化;另设800μg/ml的喹乙醇作用于HepG2细胞3h后,再用超氧化物歧化酶(SOD)(100μg/ml)、过氧化氢酶(CAT)(100μg/ml)及SOD(100μg/ml)+CAT(100μg/ml)分别作用细胞3h的各实验组,采用分子探针2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFDA)检测各组处理后细胞内活性氧含量的变化。结果:不同浓度的喹乙醇作用HepG2细胞24h后,细胞总ATPase、Na+K+-ATPase及Ca2+Mg2+-ATPase和细胞内SOD、谷胱甘肽(GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性随喹乙醇浓度的升高而下降(P<0.05或P<0.01),且具有一定的剂量-效应关系,细胞内CAT活性较对照组下降(P<0.01),但无剂量-效应关系,而细胞内丙二醛(MDA)水平随喹乙醇浓度的升高而增加(P<0.05或P<0.01),且呈一定的剂量-效应关系。经喹乙醇(800μg/ml)处理细胞后,再分别用CAT、SOD及SOD+CAT处理的各组,其ROS含量与单纯喹乙醇(800μg/ml)组相比分别减少80%(P<0.01)、40%及95%(P<0.01)。结论:喹乙醇可使体外培养HepG2细胞的抗氧化系统受到一定的破坏,且产生的ROS形式以H2O2为主。
- 张婷陈倩汤树生靳溪邹家杰刘凤英张燊肖希龙
- 关键词：喹乙醇过氧化氢酶谷胱甘肽三磷酸腺苷酶
- 柔嫩艾美耳球虫感染鸡的盲肠上皮间淋巴细胞表达白介素17的动态变化被引量：3
- 2012年
- 以1×104个柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊感染10日龄AA肉鸡,于感染后第24、48及72小时分离鸡盲肠上皮间淋巴细胞(IELs)。提取鸡盲肠IELs总RNA,用实时荧光定量PCR方法检测IL-17的表达动态;然后用FITC标记的抗鸡CD4单抗和PE标记的抗小鼠IL-17单抗作为抗体对盲肠IELs进行荧光抗体染色,再进行流式细胞术分析,检测了表达IL-17的CD4+盲肠IELs在柔嫩艾美耳球虫感染后的动态变化。实时荧光定量PCR结果表明,鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后能够显著上调IL-17mR-NA的表达水平,流式细胞分析结果表明,在球虫感染后表达IL-17的CD4+细胞数量显著上升。这些结果表明,IL-17参与了宿主抵抗球虫感染的反应。
- 张蕾马立平刘任强汪明
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫白介素17
- 牛的几种重要繁殖障碍类传染病防控措施
- 母牛繁殖障碍给养牛业造成了巨大的经济损失,严重影响着肉牛业和奶牛业的发展。其中包括死胎、流产、不孕等繁殖力下降或不能繁殖的异常生理状态,引发的因素很多,如先天性、营养性、管理性和病理性等因素,其中病理性因素包括传染性因素...
- 张春燕吴清民
- 关键词：养牛业病原菌寄生虫
- 文献传递
