国家自然科学基金(81201282)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 相关作者：陈娟宋春丽任吉华李宛蔚陈可更多>>
- 相关机构：重庆医科大学泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SIRT2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT2的表达,并通过Real-time PCR和Western blot验证SIRT2基因的沉默效果。细胞迁移及侵袭实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blot检测上皮细胞间充质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)指标蛋白(E-cadherin、α-catenin、α-SMA、N-cadherin)的表达。结果 SIRT2在多个肝癌细胞系中蛋白表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT2的表达水平(P<0.05)。SIRT2基因沉默能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),并使上皮属性蛋白E-cadherin、α-catenin表达水平升高,使间质属性蛋白α-SMA、N-cadherin表达水平降低。结论 SIRT2基因沉默可以通过抑制肝癌细胞上皮细胞间充质转化从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 宋春丽任吉华冉龙宽李宛蔚陈娟
- 关键词：肝癌迁移
- SIRT2基因沉默后对肝癌细胞增殖的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨沉默信息调节因子2相关酶2(silent information regulator 2 related enzyme 2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制。方法利用慢病毒介导的shRNA干扰技术,靶向沉默SIRT2基因的表达;Western blot检测SIRT2基因沉默效果及SIRT2沉默后β-catenin蛋白的表达变化;流式细胞计数检测SIRT2基因沉默后肝癌细胞周期的变化,CCK-8法检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响,台盼蓝计数检测SIRT2基因沉默及过表达β-catenin后,SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响;BrdU实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞DNA合成的影响;平板集落实验检测SIRT2沉默对肝癌细胞克隆形成能力的影响。结果 SIRT2 shRNA靶向沉默显著抑制肝癌细胞SIRT2的表达水平,shRNA沉默组肝癌细胞PLC-5的增殖能力较对照组分别下降48.3%(shSIRT2-1)、55.6%(shSIRT2-2)(P<0.01);SIRT2基因沉默后,肝癌细胞出现G1期阻滞,β-catenin蛋白表达水平下降;过表达β-catenin后SIRT2基因沉默组较对照组肝癌细胞增殖分别升高了89%(shSIRT2-1)、75%(shSIRT2-2)(P<0.01)。结论 SIRT2沉默可能通过调节β-catenin信号通路来影响肝癌细胞增殖。
- 冉龙宽宋春丽李宛蔚任吉华陈祥陶娜娜陈娟
- 关键词：肝癌增殖
- SIRT1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨慢病毒介导沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)基因的shRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计、合成2对针对SIRT1基因shRNA的寡核苷酸序列,与pLentilox3.7-GFP载体连接产生重组慢病毒质粒pshSIRT1-1、pshSIRT1-2,同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照pshCont。将表达shRNA的载体plentilox3.7与pLP1、pLP2和pLP/VSVG 3种质粒共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并测定病毒滴度。将慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7,行real time-PCR和Western blot验证SIRT1基因的沉默效果,台盼蓝排斥实验和流式细胞仪分别检测其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。结果:成功构建靶向SIRT1基因shRNA慢病毒载体并获得了相应的慢病毒。2个靶向SIRT1的shRNA均能有效抑制SIRT1基因的表达(P=0.000 2),并使MCF-7细胞增殖明显减慢,凋亡明显增加(P=0.006 0)。结论:靶向SIRT1基因RNA干扰能显著抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡。
- 陶颖陈可宋春丽任吉华陈娟
- 关键词：慢病毒乳腺癌细胞RNA干扰
- 重型肝炎合并自发性细菌性腹膜炎的临床特点和诊疗效果观察被引量：5
- 2013年
- 目的 研究重型肝炎合并自发性细菌性腹膜炎（SBP）的临床特点和诊疗结果.方法 选择2010年3月～2012年3月泸州医学院附属医院诊疗的132例重型肝炎患者作为研究对象,72例患者经确诊合并SBP者为观察组,60例无SBP者为对照组,回顾性分析上述两组患者的临床资料,对SBP的临床特点和诊疗效果进行研究.结果 观察组患者的临床表现包括发热、腹痛、腹胀及腹部压痛;腹水常规检查显示观察组白细胞数为（9.86±2.84）×109/L,与对照组[（8.96±2.32）×109/L]比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组中性粒细胞比值为（0.77±0.18）,明显高于对照组（0.56±0.13）,差异有统计学意义（P＜0.05）;腹水细菌培养检查结果显示12例细菌阳性,其中大肠埃希菌5例,肺炎克雷伯杆菌3例,肺炎链球菌2例,葡萄糖球菌1例,1例为混合真菌感染.结论 重型肝炎合并SBP的临床表现缺乏特异性,致病菌类多样,腹水检查效果不佳,中性粒细胞的检测可为该并发症的早期诊断和治疗提供了依据.
- 吴刚陈娟
- 关键词：重型肝炎自发性细菌性腹膜炎病理诊断
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乙型肝炎病毒复制的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究SIRT1抑制剂sirtinol、曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响,并探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)在HBV复制过程中的作用。方法:运用MTS分析HepG2.2.15细胞对sirtinol、TSA的耐受程度;real-time PCR和Southern blot验证sirtinol和TSA对HepG2.2.15细胞中HBV复制中间体表达的影响;Western blot和ELISA分析sirtinol对HBV核心蛋白(HBc)和HBsAg、HBeAg表达的影响。结果:sirtinol能抑制HBV复制中间体、HBc的表达和HBsAg、HBeAg的分泌,TSA可以促进HBV的复制。结论:SIRT1抑制剂sirtinol具有抗病毒作用。
- 陈可任吉华宋春丽冉龙宽李宛蔚陈娟
- 关键词：SIRT1乙肝病毒复制曲古抑菌素A
