中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013ZL035)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所四川农业大学更多>>
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- 口蹄疫病毒2B蛋白基因的原核表达及其表达产物的细胞毒性分析
- 2014年
- 为了实现口蹄疫病毒非结构蛋白基因2B在原核表达系统中的可溶性表达并分析其生物学活性,采用SUMO融合技术构建带有2B基因的pSMK-2B重组质粒,然后分别把此重组质粒转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)和C43(DE3)中进行诱导表达。通过对比2B蛋白在普通大肠杆菌BL21(DE3)中和抗毒性蛋白的大肠杆菌C43(DE3)中的表达情况,分析了表达蛋白的细胞毒性作用。结果显示,口蹄疫病毒非结构蛋白基因2B只在大肠杆菌菌株C43(DE3)中实现了可溶性表达,表达产物能抑制表达菌的增殖;进一步证实了2B蛋白对大肠杆菌菌株BL21(DE3)和C43(DE3)存在不同水平的毒性作用。本研究获得的可溶性2B蛋白将为其生物学功能的研究提供前提条件。
- 敖大孙世琪董虎徐进孙德惠魏衍全王海明郭慧琛曹随忠
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白可溶性表达细胞毒性
- 猪瘟病毒P7基因的原核表达及表达产物的寡聚化研究
- 2014年
- 采用RT-PCR方法从接种了猪瘟疫苗的家兔脾组织中扩增出了P7基因,将其克隆到表达载体pSMK中,测序验证后转化入表达菌BL21中进行诱导表达。结果显示,重组菌可以表达出分子质量约为19ku的重组融合蛋白,经终浓度为1mmol/L的IPTG诱导2h的表达效果较好。表达产物经Ni柱纯化,可得到纯度较好的目的蛋白。纯化的蛋白置于4℃2d后进行Western-blot检测,发现有多聚体形成;戊二醛交联结果表明,P7蛋白可形成同源寡聚体。此研究结果为进一步研究猪瘟病毒P7基因表达蛋白的性质和功能奠定了基础。
- 孙德惠闫丹董虎魏衍全敖大王海明孙世琪
- 关键词：猪瘟病毒原核表达
