湖北省自然科学基金(2009CDA060)
- 作品数：11 被引量：37H指数：5
- 相关作者：黄利鸣王艳林尤程程谭寒星彭平平更多>>
- 相关机构：三峡大学湖北医药学院三峡大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 天花粉蛋白对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:研究天花粉蛋白(TCS)对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因表达的影响,以探讨TCS诱导Hela细胞凋亡的机制。方法:MTT法检测TCS对Hela细胞增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态;RT-PCR和Western blot分析TCS对Hela细胞Survivin基因表达的影响;流式细胞仪分析TCS对Hela细胞周期的影响。结果:①TCS显著性抑制Hela细胞增殖;②TCS处理后Hela细胞Survivin mRNA水平无明显改变,但蛋白表达水平显著降低;③TCS降低Hela细胞周期中G2/M期细胞比率,但增加S期细胞的数量。结论:通过下调凋亡抑制因子Survivin的表达而诱发Hela细胞凋亡,可能是TCS抑制Hela细胞增殖的分子机制。
- 谭寒星黄利鸣王艳林韩钰刘朝奇尤程程黄玉蓉
- 关键词：天花粉蛋白SURVIVIN基因子宫颈癌
- 天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化
- 2011年
- 目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。
- 曹卫红黄利鸣王艳林刘朝奇彭平平宋华梅尤程程黄益玲谭寒星吴燕珍
- 关键词：天花粉蛋白基因突变原核表达
- p27蛋白及其相关因子在恶性肿瘤中的功能的研究被引量：3
- 2010年
- p27蛋白是周期蛋白依赖性激酶抑制剂家族的一员,通过抑制周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶(cyclin-CDK)复合物活性对细胞周期进行负性调节,使细胞周期停滞在G1期。p27基因表达异常与多种恶性肿瘤的发生发展及预后有关。在p27基因发挥作用过程中,有众多的因素参与调控。本文简要介绍p27基因的结构与功能、表达调控以及与恶性肿瘤关系的研究进展。
- 尤程程王艳林黄利鸣
- 关键词：P27肿瘤
- 天花粉蛋白对宫颈癌Caski细胞DNMT1基因的表达和酶活性的影响被引量：6
- 2010年
- 目的研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对宫颈癌Caski细胞DNMT1基因的表达和酶活性的影响,并探讨天花粉蛋白抗宫颈癌及去甲基化机制,寻找新型去甲基化药物。方法应用RT-PCR、实时荧光定量PCR和Western免疫印迹分析检测天花粉蛋白对宫颈癌Caski细胞DNMTI基因表达的影响;应用DNMT1酶活性试剂盒检测天花粉蛋白对DNMT1酶活性的影响。结果经天花粉蛋白处理后,Caski细胞中DNM1基因mRNA及蛋白表达水平降低,体外酶活性分析发现,TCS对DNMT1酶活性有直接抑制作用。结论天花粉蛋白去甲基化的作用可能是通过抑制DNMTs的活性而实现的;天花粉蛋白有可能是新型的DNMTs抑制剂,具有潜在的临床应用价值。
- 宋华梅黄利鸣王艳林韩钰尤程程彭平平曹卫红
- 关键词：天花粉蛋白宫颈癌DNMT1基因甲基化去甲基化
- 重组天花粉蛋白体外诱导宫颈癌HeLa细胞p27基因去甲基化的研究被引量：5
- 2010年
- 目的研究重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)对宫颈癌HeLa细胞中p27基因甲基化状态和基因表达的影响。方法应用不同质量浓度的rTCS(20、40、80μg/mL)处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞后,MSP法检测用药前后细胞中p27基因的甲基化状态,Real-Ti me PCR法检测用药前后细胞中p27和DNA甲基转移酶-1(DNMT1)mRNA水平的变化,Western-blotting法检测用药前后细胞中p27蛋白表达的变化。结果HeLa细胞中p27基因为低表达,基因启动子区CpG岛呈部分甲基化状态。40μg/mLrTCS处理导致p27基因启动子区CpG岛去甲基化;在20、40、80μg/mL的rTCS作用48 h后,p27基因mRNA相对表达水平分别升高2.22、4.00、6.03倍,p27蛋白水平表达也逐渐增加;宫颈癌HeLa细胞中DNMT1 mRNA高表达,40μg/mLrTCS处理48 h可至DNMT1 mRNA表达水平降低78%。结论rTCS通过抑制DNMT1,逆转p27基因启动子区CpG岛的甲基化状态,使宫颈癌HeLa细胞中p27基因表达活化。rTCS能逆转宫颈癌HeLa细胞p27基因甲基化状态,调控p27基因和DNMT1的表达。
- 尤程程黄利鸣韩钰王艳林黄益玲
- 关键词：P27基因宫颈癌DNA甲基化
- p73基因及其在妇科肿瘤中的研究进展被引量：1
- 2011年
- p73作为p53家族成员之一,因具有与p53极为类似的结构和功能受到广泛关注。其中p73基因全长模式TAp73能够引起细胞周期停滞和诱导细胞凋亡,并能作用于p53的靶基因,推测TAp73很可能是另一个新型的抑癌基因。该基因的深入研究将为癌症的诊断和治疗提供新视野。本文将对p73的结构、生物学功能及其与妇科肿瘤发生、发展、预后之间的关系简要阐述。
- 彭平平黄利鸣王艳林
- 关键词：P73肿瘤抑制基因女性生殖器肿瘤乳腺肿瘤
- Smac基因过表达联合天花粉蛋白对Caski细胞凋亡的影响及其相关机制的研究
- 2013年
- 目的探讨Smac基因过表达联合天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞凋亡影响及其相关机制。方法构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/Smac,稳定转染入宫颈癌Caski细胞后,筛选Smac高表达的细胞株Caski/Smac;RT-PCT和Western blot法分别用于测定Smac基因在mRNA和蛋白水平上的表达水平;MTT法观察Smac高表达对Caski细胞生长及对TCS敏感性的影响;流式细胞仪分析TCS对Caski细胞凋亡的影响。结果①TCS能诱导Caski细胞内Smac基因表达,且呈时间与浓度依耐性;②成功获得Smac基因高表达的细胞株Caski/Smac;③Smac高表达使Caski细胞生长速度明显减慢(P<0.01),且对TCS的敏感性显著性增加(P<0.01);④TCS作用于Caski细胞可诱发其凋亡,但Smac高表达的细胞凋亡更为明显,差异具有显著性(P<0.01)。结论 Smac基因过表达能增加Caski细胞对TCS的敏感性,在同等药物浓度下能更明显抑制细胞增殖和促进其凋亡。此外,TCS也能够诱导细胞中Smac基因表达,这可能是其促细胞凋亡的机制之一。
- 刘瑞雪黄利鸣王艳林黄益玲尤程程崔磊黄玉蓉吴丽婷
- 关键词：SMACDIABLO宫颈癌细胞天花粉蛋白基因
- 细胞凋亡通路中的survivin分子在肿瘤中的研究进展被引量：3
- 2011年
- 细胞程序性凋亡（apoptosis）是一种细胞生理性、程序性死亡的过程,在胚胎发育、组织器官塑型以及衰老和病态细胞清除中起重要作用。各种环境因素和遗传因素导致细胞失去发生凋亡的能力,是肿瘤发生与发展的关键因素之一,因而激发和恢复肿瘤细胞发生凋亡的能力,是肿瘤防治的有效途径。
- 谭寒星黄利鸣王艳林
- 关键词：细胞凋亡肿瘤SURVIVIN
- 奈达铂联合紫杉醇注射液对卵巢癌手术患者ROMA指数和HE4水平的影响被引量：7
- 2016年
- 目的:探讨奈达铂联合紫杉醇注射液对卵巢癌术后患者ROMA指数、HE4水平的影响及临床疗效。方法:选取我院收治的卵巢癌术后患者70例,随机分为实验组和对照组,每组35例。对照组采用紫杉醇注射液治疗;实验组在对照组基础上联合奈达铂注射液治疗。观察并比较治疗前后两组患者ROMA指数、血清CA125和HE4水平、生存期、临床疗效及不良反应情况。结果:与治疗前相比,治疗后两组患者ROMA指数、血清CA125及HE4水平均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验组患者治疗后ROMA指数、血清HE4及CA125水平较低,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验组患者生存期明显延长,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:奈达铂联合紫杉醇注射液治疗卵巢癌具有显著的临床疗效,能够降低ROMA指数和血清CA125、HE4水平,而且毒副作用较小,可在临床进一步推广应用。
- 李波肖凤仪伍立群方恋周婷
- 关键词：紫杉醇注射液卵巢癌HE4
- 重组天花粉蛋白的真核表达及其对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:观察重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/6His-TCS,稳定转染Caski细胞后,RT-PCR,Western-blot筛选rTCS高表达细胞株。以转染空载质粒pcDNA3.1(-)细胞株作为对照组,MTT法检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功获得高表达rTCS的Caski细胞株,rTCS高表达能够显著抑制Caski细胞增殖(P<0.01),并能将细胞抑制在G1和G2期(P<0.05)。结论:rTCS在细胞内高表达具有抗人宫颈癌细胞生长的作用,该研究为宫颈癌治疗提供了新的思路。
- 彭平平黄利鸣王艳林尤程程曹卫红宋华梅谭寒星吴燕珍
- 关键词：宫颈癌细胞增殖
