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江苏省自然科学基金(BK2011128)
作品数:
3
被引量:8
H指数:2
相关作者:
李岷
刘维达
陈青
胡素泉
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相关机构:
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Dectin-1介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12的研究
被引量:2
2012年
目的探讨香菇多糖能否依赖Dectin-1介导而诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。方法香菇多糖作用THP-1细胞后,实时荧光定量RT-PCR检测Dectin-1、IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达水平;ELISA法检测THP-1细胞分泌IL-12的含量;以Dectin-1抑制剂昆布多糖预处理THP-1细胞,比较香菇多糖诱导产生IL-12的变化。结果香菇多糖可上调THP-1细胞表达Dectin-1的mRNA水平;能上调THP-1细胞IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达和IL-12分泌;昆布多糖可明显抑制香菇多糖诱导THP-1细胞分泌IL-12。结论 Dectin-1能介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。
陈青
陈晓
孙俊
曾容
胡素泉
李岷
刘维达
关键词:
香菇多糖
巨噬细胞
IL-12
白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38MAPK 的影响
被引量:5
2015年
目的:探讨白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞系)分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞内信号分子 p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活的影响。方法实时荧光定量 PCR 分析105、106 CFU/ml 灭活白念珠菌及阳性刺激物脂多糖刺激 THP-1细胞1、3、6 h 后 TNF-α mRNA 表达水平变化。40μg/L 地塞米松预先与 THP-1细胞共培养30 min 后,再用106 CFU/ml 白念珠菌、脂多糖刺激6 h 后检测TNF-α mRNA 表达水平。酶联免疫吸附法检测白念珠菌刺激 THP-1细胞24 h 后 TNF-α分泌量。免疫印迹法分析白念珠菌体外作用 THP-1细胞30 min、1 h 后 p38MAPK 和磷酸化 p38MAPK 的水平。结果105 CFU/ml 白念珠菌、106 CFU/ml 白念珠菌、脂多糖刺激 THP-1细胞组以及空白对照组 TNF-α mRNA 表达水平差异有统计学意义(F =110.98,P 〈0.001);白念珠菌刺激1、3、6 h 之间差异也有统计学意义(F =701.680,P 〈0.001),随培养时间延长,THP-1细胞 TNF-α mRNA 水平增高,呈时间依赖效应。106 CFU/ml 白念珠菌刺激 THP-1细胞后24 h,TNF-α蛋白水平(6385.70±533.99 ng/L)较空白对照组(147.10±0.53 ng/L)明显升高,差异有统计学意义(P 〈0.01)。106 CFU/ml 白念珠菌作用于 THP-1细胞30、60 min 后磷酸化 p38MAPK 蛋白水平也明显升高。40μg/L地塞米松预先与 THP-1细胞共培养30 min 后,再以106 CFU/ml 白念珠菌刺激6 h 后 TNF-α mRNA 表达水平(3.77±0.62)较未用地塞米松组(208.50±10.50)明显降低,地塞米松可阻断白念珠菌上调 TNF-α mRNA 水平。结论人 THP-1细胞体外与白念珠菌作用后激活信号分子 p38MAPK 并分泌 TNF-α,参与抗念珠菌感染固有免疫反应。
段志敏
杜蕾蕾
曾荣
沈永年
胡素泉
刘维达
陈青
李岷
关键词:
白色念珠菌
P38
C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究
被引量:1
2013年
目的探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体(dectin-1)识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤自念珠菌的活性。方法100mg/Lβ葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24h后,实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2mRNA表达水平。100mg/Lβ葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15min、2h、6h,或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100mg/L和50mg/L预处理30min后,再予100mg/Lβ葡聚糖刺激2h,微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后,检测菌落形成单位(CFU)。结果β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24h后,dectin-1mRNA水平分别为2.8195±0.1669、5.4859±0.7244、3.6041±0.5372,均明显高于空白对照组(均P〈0.01)。β葡聚糖刺激中性粒细胞15min后H2O2水平为(64.55±15.67)μmol/L,2h时为(290.34±30.56)μmol/L,6h时为(208.54±26.88)μmol/L,与空白对照组(22.05±3.99)μmol/L比较,差异均有统计学意义(均P〈0.01);100mg/L和50mg/L昆布多糖预处理组分别为(80.45±22.41)μmol/L和(130.42±44.55)μmol/L,与β葡聚糖刺激组相比,分别降低了73%和45%,差异均有统计学意义(P〈0.01)。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性(均P〈0.01)。结论Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性,为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。
陈青
曾荣
沈永年
胡素泉
李岷
刘维达
关键词:
念珠菌
中性白细胞
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