国家自然科学基金(30801497)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
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- 三维超声观察5-Fu治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流和体积改变被引量：6
- 2010年
- 目的应用三维超声探讨5-Fu局部治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流、体积变化。方法16只新西兰大白兔,每侧乳腺均种植一个VX2移植瘤共建立32个乳腺VX2移植瘤模型,分别于肿瘤移植后第2、3、4周经皮注射5-Fu至右侧移植瘤的瘤内及瘤周。应用三维超声监测肿瘤生长情况,于第1次治疗前及治疗后瞬间、第4周治疗结束后分析左右侧肿瘤血供的分级,利用VOCALⅡ功能量化分析肿瘤内部及周边的血供,并测量容积指数(VI);同时测量肿瘤的体积,并进行自身左右侧对照。4周后处死瘤兔,用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达,了解肿瘤凋亡情况,评价三维超声相关检测指标的价值。结果治疗前兔两侧乳腺VX2移植瘤的血供及VI值基本一致,治疗后瞬间及第4周治疗结束后右侧(治疗侧)血供及VI值明显减小(P<0.05);治疗前左右侧乳腺VX2移植瘤的体积差异无统计学意义,治疗后右侧肿瘤体积增长减慢(P<0.05);免疫组化显示:治疗侧乳腺肿瘤组织凋亡明显(P<0.05)。结论三维超声能够更客观地反映5-Fu治疗前后兔乳腺移植瘤的血流和体积变化,5-Fu局部治疗兔乳腺VX2移植瘤有效。
- 王颖夏炳兰吴志峰曹丽孔桂美
- 关键词：VX2肿瘤氟尿嘧啶
- 人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体研制与生物学活性测定被引量：3
- 2011年
- 根据GenBank中发表的血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体Ⅱ(KDR)基因序列,设计1对引物经RT-PCR从人脐静脉内皮细胞中克隆出KDR胞外Ⅲ区(KDRD3)编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-6P1。重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG于37℃条件下诱导,经SDS-PAGE和Western blotting分析,表达出的融合蛋白大小为33.4 ku。利用纯化的重组融合蛋白免疫BALB/c小鼠,经淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株KDR特异性单克隆抗体C4和F6。2株单抗均能特异性识别HUVEC细胞表达的天然KDR分子,HUVEC迁移抑制试验和HUVEC体外血管形成抑制试验结果显示,2株单抗均能特异性阻断血管内皮细胞生长因子与KDR分子的相互作用。结果表明:所获得的2株单抗对KDR具有良好的特异性和中和活性。
- 孔桂美张小荣黄瑶高巍廖月霞卜平
- 关键词：单克隆抗体生物学活性
- VEGF受体Ⅱ在胃癌组织中表达及临床意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨胃癌组织中血管内皮生长因子受体Ⅱ(VEGFR2,KDR)的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测34例胃癌组织和10例正常胃组织中的KDR表达。结果胃癌组织中KDR的表达量升高。KDR表达量与淋巴结转移、病理分期、肿瘤分化程度密切相关(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。结论 KDR在胃癌的发生、发展中起重要作用,这为胃癌的靶向治疗提供了有力依据。
- 孔桂美吴克艳廖月霞卜平
- 关键词：胃癌
- 体外重组表达血管生长因子VEGF165单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的:研制人VEGF165单克隆抗体(mAb),为研究VEGF165的生物学活性提供基础。方法:应用RT-PCR从脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF165基因,克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-VEGF165,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达获得重组人VEGF165蛋白,将重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,制备人VEGF165高效价的mAb。通过鸡胚血管形成抑制实验、HUVEC迁移抑制实验以及HUVEC血管形成抑制实验,对获得的人VEGF165特异性mAb进行进一步鉴定。结果:成功地从脐静脉血管内皮细胞中克隆出人VEGF165基因,并在大肠杆菌表达系统中获得高效表达,以纯化重组蛋白作为免疫原免疫小鼠,筛选获得5株分泌人VEGF165特异性mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为5A6、3F5、6H3、7D10、7A10,其中5A6、3F5、6H3、7D10分泌的mAb亚类为IgG2a,7A10分泌的mAb亚类为IgG2b,抗体轻链均为κ链。5株mAb均能抑制鸡胚血管形成、抑制HUVEC迁移和及血管形成。结论:所获得的mAb具有效价高,活性强的优点,为抗肿瘤血管研究中进一步研究VEGF165的生物学作用提供了重要的基础。
- 孔桂美张小荣刁亚利吴克艳刘秋云卜平
- 关键词：单克隆抗体HUVEC血管形成细胞迁移
