长江学者和创新团队发展计划(2012) 作品数:5 被引量:324 H指数:3 相关作者: 余正文 蒲余路 周亚虹 陈诗一 方芳 更多>> 相关机构: 北京协和医学院 贵州师范大学 复旦大学 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 经济管理 化学工程 更多>>
三七PnUGT1基因的全长cDNA克隆和生物信息学分析 被引量:16 2012年 本研究通过对三七的转录组高通量测序结果进行分析,采用5'-RACE和RT-PCR方法,对其中一条可能参与三萜皂苷合成的UDP-糖基转移酶基因转录本(Pn02086)进行全长克隆,预测了该基因编码蛋白的理化性质、保守结构域等,并对其进行了进化分析。通过全长克隆,得到一条开放阅读框为1 488 bp的cDNA序列,命名为PnUGT1,GenBank登录号JX018210。该基因编码495个氨基酸,蛋白分子量为55.453 kD,属于不稳定蛋白。二级结构中α-螺旋占36.16%、β-折叠占11.31%、无规卷曲占52.53%。InterProScan预测该蛋白具有7个保守结构域,包括在植物次生代谢产物中相关糖基转移酶特有的PSPG保守基序。该蛋白不具有信号肽和跨膜区,最有可能定位在细胞质中。序列比对和进化关系分析表明,该蛋白和蒺藜苜蓿三萜合成相关的UDP-糖基转移酶AAW56092的亲缘关系较近,PSPG保守区域的相似性为66%。该基因在三七叶中表达量较在花、茎和根中的表达量高。推测PnUGT1基因可能参与了三七皂苷的合成。 向丽 郭溆 牛云云 陈士林 罗红梅关键词:三萜皂苷 次生代谢 三七甲羟戊酸激酶PnMVK1基因的克隆和生物信息学分析 被引量:22 2012年 药用植物三七通过甲羟戊酸途径(mevalonic acid pathway)合成三萜皂苷生物合成的前体。甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MVK)则是甲羟戊酸合成途径中ATP依赖的限速酶之一。本研究根据课题组已获得的三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]转录组数据中的MVK1转录本序列,利用RT-PCR方法获得三七MVK1(PnMVK1)基因的全长cDNA序列;对PnMVK1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测了该蛋白的结构与功能;利用实时荧光定量PCR方法检测了PnMVK1基因在三七的根、茎、叶、花中的表达情况。序列分析表明,克隆获得的三七PnMVK1基因长为1 164 bp,编码387个氨基酸,GenBank登录号JQ957844。生物信息学预测PnMVK1蛋白不含跨膜区,不含信号肽,具有GHMP激酶等保守结构域。PnMVK1基因在三七的根中表达丰度最高。本研究成功克隆并分析了三七MVK1的全长序列,为进一步阐明三七三萜代谢途径奠定基础。 郭溆 罗红梅 陈士林金雀花异黄酮提取工艺研究 被引量:2 2015年 通过单因素试验和正交试验对金雀花(Parochetus communis Buch.)异黄酮提取工艺中提取溶剂类型、提取剂体积分数、提取时间、提取温度、料液比等影响异黄酮提取率的因素进行了探讨,应用紫外分光光度法测定不同提取条件下金雀花异黄酮的含量。确定金雀花异黄酮最佳提取工艺参数为甲醇体积分数65%,提取温度90℃,料液比为1∶40(m/V,g∶m L),提取2次,每次2.0 h,在此提取工艺条件下,金雀花总异黄酮得率为2.38%。 张妮 王家胜 孔琪 余正文 乙引关键词:异黄酮 正交试验设计 细叶鼠曲草总黄酮提取工艺研究 被引量:1 2017年 提取细叶鼠曲草(Gnaphalium japonicum Thunb)总黄酮,比较传统水溶性提取与超声提取总黄酮的工艺差异,并通过单因素和正交试验优化细叶鼠曲草总黄酮提取工艺。结果表明,超声醇提效果较好,条件为超声时间30 min、乙醇体积分数80%、提取温度60℃、料液比1∶30(g/m L),提取总黄酮含量为2 mg/g。 杨雪鸥 杨露茜 袁涛 余正文 张林关键词:JAPONICUM 总黄酮 超声提取 政府扶持与新型产业发展--以新能源为例 被引量:284 2015年 政府对产业的干预在我国经济发展的各个阶段都能见其踪影。当前转型经济时期,政府仍将引导部分产业的发展。新型产业作为经济新常态下最重要的创新驱动来源,还关系到社会对绿色环保需求,受到政府的大力扶持。本文的关注点在于,政府采用传统的补贴供给端的扶持政策,能否起到引导新能源等新型产业自主创新和健康发展的作用。从已有文献来看,关于政府扶持的讨论以传统行业为主,而对需求市场尚不成熟、科技含量要求较高的新型产业政策的机制缺乏相应的研究。本文试图在这方面进行探讨,理论部分通过构建基于新型产业特征的企业行为反应模型,将促进生产和补贴需求的两类政策纳入评价范畴,分别讨论了这两方面政府政策的作用;实证部分采用上市公司样本来检验理论结果。本文主要发现:(1)产业起步阶段,政府补助能带来新型产业盈利优势;(2)产业扩张后,政府扶持难以有效鼓励企业进行更多的研发投入,后果是同质化产能过剩。因此,激励原始创新和转向需求培育可能是未来新型产业政策调整的方向。 周亚虹 蒲余路 陈诗一 方芳关键词:新能源