上海市科学技术委员会资助项目(984119007)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：陆志檬孔晓飞任进余蔡倩邱纪慧更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中国地区HCV株包膜区cDNA序列变异性分析被引量：2
- 1999年
- 目的 研究国内不同地区ＨＣＶ包膜基因区变异。方法 对国内不同地区慢性丙型肝炎患者的１３株 ＨＣＶ采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增ＨＣＶ包膜基因区（Ｅ１、 Ｅ２／ＮＳ１）片段，对其中的１００５ｂｐ的ｃＤＮＡ进行测序，并与 国内外株进行变异性分析。结果 国内ＨＣＶ株比较，同型（Ⅱ）间该区核苷酸和氨基酸的同源性分别介于７６．４２％～ ９７．１１％和７５．２２％～９３．１５％，不同型（Ⅲ）间分别为６２．２９％～６３．３８％和５１，２９％～６０．００％；国内与国际同型株比较，同型 （Ⅱ）间分别为７３．７３％～８７．７６％和７５．８２％～８８．０９５％，不同型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）间分别为６１．４９％～８１．４９％和４９．３５％～７８．２１％；国 内外１８株ＨＣＶ的ＨＶＲ１区同源性仅为３６．１１％～７５、３１％和２０．８０％～６２．９６％，发现两个新的较高变异区（第２５０～２５７ 位和第４４３～４６５位氨基酸）。结论 ＨＣＶ包膜区序列分析同型间同源性较高，异型间同源性较低；南北地区有差 异，国内外差异更大；最大的变异在ＨＶＲ１，并发现两个新的较高变异区。
- 蔡倩邱纪慧张欣欣陆志檬
- 关键词：丙型肝炎病毒CDNA
- 丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠模型的建立被引量：3
- 2005年
- 目的建立丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型,探讨丙型肝炎发病机制,研究HCV结构蛋白编码基因的功能与致病作用。方法采用长片段聚合酶链反应技术扩增HCV结构基因,构建稳定表达与诱导表达两种真核细胞表达重组体,经体外细胞转染后,将具有表达功能的线性化表达元件采用显微注射法,直接导入1736枚小鼠受精卵,先后移入69只假孕母鼠输卵管。结果妊娠受体25只,产仔105只,成活57只。注射卵成仔率仅3.2 8%。经聚合酶链反应扩增、测序、酶切及Southern杂交鉴定,获阳性首建鼠26只,注射卵首建鼠成功率仅1.50%。其中稳定表达型10只,诱导表达型16只。经与正常鼠交配,获F1阳性杂合鼠分别38只、20只。一个纯合子品系。结论研究建立了稳定表达与诱导表达两类HCV 结构基因转基因小鼠,为进一步研究HCV致病机制,HCV基因功能奠定了基础。
- 任进余成国祥孔晓飞陈建泉周汝江陆志檬
- 关键词：丙型肝炎转基因小鼠模型聚合酶链反应HCV基因
- 丙型肝炎病毒包膜区基因DNA免疫的研究
- 2006年
- 目的:构建丙型肝炎病毒包膜区基因(E1、E2)真核表达载体,命名为PCI-neo-E1和E2。方法:将真核重组体转染NIH-3T3细胞中,利用RT-PCR方法鉴定相应的基因片段,显示获得了相应的稳定转染的细胞克隆。提取转染细胞蛋白,进行WesternBlot分析。结果:HCVE1、E2基因在真核细胞中获得有效表达。将所构建的PCI-neo-E1、E2免疫Balb/C小鼠,获得特异的抗体反应。结论:通过HCV包膜区DNA免疫的研究表明能激发特异的免疫反应,为进一步进行HCV疫苗研究奠定基础。
- 袁明陆志檬王颍周光炎葛海良张惠珍王树军
- 关键词：丙型肝炎病毒核心基因DNA疫苗
