辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2008813)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：刘晓湘方秀斌张宝辉马腾崔万鹏更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Akt对哮喘小鼠肺组织TNF-α的调节作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨在哮喘发病机制中,蛋白激酶B(Akt/PKB)对哮喘小鼠肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的调节作用。方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Akt/PKB阻断组,利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光、Western blot方法检测各组小鼠肺组织TNF-α的表达。结果哮喘小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组小鼠(P<0.01);免疫荧光结果显示:哮喘组肺组织TNF-α阳性产物的平均光密度值(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而Akt/PKB阻断组与哮喘组相比,肺组织TNF-α阳性反应产物的MOD值明显降低(P<0.01)。Western blot结果显示:与正常对照组比较,哮喘组、Akt/PKB阻断组小鼠肺组织TNF-α的IDV与内参照IDV的比值均明显升高(P<0.01),而PKB/Akt阻断组肺组织TNF-α目标带的IDV与内参照IDV的比值则明显低于哮喘组(P<0.01)。结论在神经生长因子介导的哮喘发病机制中,Akt/PKB能上调哮喘小鼠肺组织TNF-α的表达。
- 张宝辉马腾刘晓湘方秀斌
- 关键词：蛋白激酶B哮喘免疫荧光免疫印迹法小鼠
- 慢病毒载体介导的RNA干扰抑制PC12细胞MyD88基因的表达
- 2010年
- 目的研究慢病毒介导的RNA干扰对PC12细胞的转染效率和对MyD88基因的抑制效率。方法构建针对大鼠MyD88基因3个靶点的ShRNA慢病毒载体,PC12细胞按照不同的转染条件分为正常组(DMEM完全培养液)、DMEM加入polybrene组、EN.iS(Enhance infection solution)组、EN.iS加入polybrene组。荧光显微镜下观察不同组的转染效率,采用Real-timePCR和Western blot检测不同的靶点对MyD88的不同沉默效率。结果病8毒滴度为1×10TU/ml,MOI为100时,PC12细胞在EN.iS组的转染效率最高,转染试剂polybrene对转染效率无明显影响,沉默效率最高的靶点是5'-CATAC GCAACCAGCAGAAA-3'。结论慢病毒介导的RNA干扰是一种高效的基因沉默手段,可以对PC12细胞中MyD88的功能进行长期的研究。
- 崔万鹏刘晓湘方秀斌
- 关键词：PC12细胞慢病毒RNA干扰
