国家教育部博士点基金(200803430002)
- 作品数：6 被引量：22H指数：4
- 相关作者：黄引平黄艳君刘小利周洁叶笃筠更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂氧素A4对巨噬细胞集落刺激因子激活重度子痫前期孕妇单核细胞功能的影响
- 2010年
- 子痫前期是妊娠期特有疾病，其病因复杂。该病与炎症关系密切已是不争的事实，子痫前期孕妇体内哪些因子具有激发炎症的作用？一直为人们所关注。文献报道，子痫前期孕妇外周血和胎盘组织中巨噬细胞集落刺激因子（M—CSF）水平明显升高，提示M—CSF可能参与了子痫前期的发生^[1]。那么，M—CSF与子痫前期的炎症有无关联？我们的前期研究证实，
- 王建芳黄引平刘小利黄艳君周洁王静
- 关键词：巨噬细胞集落刺激因子重度子痫前期孕妇外周血单核细胞功能脂氧素A4CSF
- 脂氧素通过Nrf2信号通路对LPS诱导脐静脉内皮细胞氧化应激的抑制作用被引量：4
- 2011年
- 目的研究脂氧素对脂多糖(LPS)刺激的脐静脉内皮细胞引起的氧化应激的抑制作用及其机制。方法以LPS10μg/ml诱导脐静脉内皮细胞氧化应激,以不同浓度脂氧素(lipoxin A4,LXA4)进行干预,以2,7-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;细胞免疫荧光检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)转位变化;RT-PCR检测Nrf2及其下游抗氧化酶mRNA的表达;化学显色法测定脐静脉内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX,GPX)活性。结果细胞内ROS测定显示,脂氧素能够有效地降低脐静脉内皮细胞内由LPS刺激引起的ROS升高;细胞免疫荧光结果显示,LPS组Nrf2主要在胞质中表达。而加入脂氧素干预后胞核可见较强的Nrf2的表达;其中加入200nmol/L脂氧素作用后胞核中的Nrf2的表达明显增强。RT-PCR结果显示,LPS组Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、SOD、GPX mRNA表达水平明显降低,加入脂氧素干预后Nrf2、HO-1、SOD、GPX mRNA表达水平均增加。化学显示法结果显示,LPS组脐静脉内皮细胞的SOD、GSH-PX的活性明显降低,使用100nmol/L和200nmol/L脂氧素干预后均能明显减少细胞的氧化损伤。结论脂氧素通过活化转录因子Nrf2来促进多种抗氧化酶的表达,进而减轻细胞内的氧化应激损伤。
- 龚建明黄引平
- 关键词：脐静脉内皮细胞脂氧素NRF2氧化应激
- 脂氧素A4对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用被引量：11
- 2009年
- 目的探讨脂氧素A4（LXA4）对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制。方法体外培养HUVEC，培养后的细胞分别以单纯M199培养基培养（对照组）、氯化钻（CoCl2）诱导细胞缺氧（缺氧组）、不同浓度LXA4（1、10、100nmol/L）加入缺氧组细胞培养液中（药物干预组）；倒置相差显微镜下观察各组HUVEC的形态学变化；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度LXA4培养24h和100nmol/L的LXA4作用不同时间（4、8、12、24h）后缺氧HUVEC存活率；免疫细胞化学法检测细胞胞质内第Ⅷ因子相关抗原抗体（vWF）水平变化（以灰度值表示），细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性；激光共聚焦显微镜观察细胞质内游离Ca^2＋荧光强度变化。结果（1）细胞形态：缺氧组HUVEC明显失去原有正常细胞形态，细胞变圆，核固缩；药物干预组正常细胞数量增多，加入100nmol/L浓度的LXA4后，大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似。（2）细胞存活率：缺氧组细胞存活率为（40．1±3．9）％，药物干预组细胞培养液中加入1、10、100nmoVL浓度的LXA4后，细胞存活率分别为（52．9±1．4）％、（64．1±3．3）％、（76．6±1．6）％，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。药物干预组细胞培养液中LXA。浓度为100nmo／／L时，作用4、8、12、24h，细胞存活率分别为（68．2±2．3）％、（82．5±1．4）％、（82．9±1．4）％和（72．2±8．5）％，且在12h时达峰值；药物干预组各时间点细胞存活率分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）vWF水平：随着药物干预组细胞培养液中LXA。浓度的增加，其胞质内vwF水平逐步降低，LXA4浓度为1、10、100nmol／L时，vWF水平分别为203．9±0．7、204．6±0．9、191．8±0．5，分别与缺氧组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4�
- 刘松君李咏生周晓燕蔡蕾刘小利黄艳君叶笃筠黄引平
- 关键词：妊娠性脐静脉内皮细胞缺氧脂氧素类
- 脂氧素A4对重度子癎前期患者外周血单核细胞体外分泌白细胞介素-1β的影响及其与胞浆内游离钙浓度的关系被引量：7
- 2010年
- 目的探讨脂氧素A4（1ipoxin A4，LXA4）对重度子癎前期（severe preeclampsia，SPE）患者外周血单核细胞体外分泌白细胞介素－1β（interleukin，IL-1β）的影响及与胞浆游离钙浓度（[Ca^2＋]i）的关系。方法收集温州医学院附属第一医院产科2008年10月至2009年5月收治的15例SPE患者（SPE组）和20例正常孕妇（正常妊娠组）的外周静脉血，分离外周血单核细胞进行体外培养。将不同浓度LXA4（0、10、100nmol／L）加入SPE组单核细胞体外培养后，采用酶联免疫吸附实验测定培养上清液中1I，1口的浓度。钙离子荧光探针Fluo-3／AM负载单核细胞后，用激光共聚焦扫描显微镜动态检测单核细胞内[Ca^2＋]i的变化。结果（1）体外在0、10、100nmol／L浓度LXA4的作用下，SPE组外周血单核细胞培养上清液中IL-1β水平分别为（63．16±8．20）pg／L、（53．71±8．08）pg／L、（3．16±6．89）pg／L。LXA4呈剂量依赖性抑制了SPE单核细胞分泌IL-1β（P〈0．05），而其对正常妊娠组IL-1β的分泌无影响[分别为（19．22±7．43）pg／L、（16．99±6．32）pg／L、（15．18±5．24）pg／L]（P〉0．05）。（2）SPE组外周血单核细胞[Ca^2＋]i为1028．09±160．52，较正常妊娠组（323．61±87．86）明显升高（P〈0．05）。而在100nmol／L LXA4作用下SPE组单核细胞[Ca^2＋]i为409．67±116．73，较0nmol／L LXA4作用下SPE组单核细胞[Ca^2＋]i明显下降（P％0．05）。结论LXA。体外能明显抑制SPE患者单核细胞分泌IL—1β，其机制可能与降低细胞内[Ca^2＋]i有关。
- 王建芳黄引平黄艳君刘小利周洁王静
- 关键词：脂氧素类单核细胞
- 脂氧素对重度子痫前期患者外周血中性粒细胞凋亡的影响被引量：9
- 2009年
- 脂氧素（lipoxinA4，LXA4）是花生四烯酸的代谢产物，具有促炎症消退和抗炎作用，在自身免疫相关疾病中有控制病情的作用。子痢前期是临床常见的严重影响母婴安全的疾病之一，其发病机理至今尚未完全阐明，但内皮细胞损伤作为子痴前期的一个病理生理特征已是不争的事实，血管内皮损伤是子痢前期患者血管内过度炎症反应的一部分，而激活的中性粒细胞在血管内皮损伤中有着重要的作用。细胞凋亡是将中性粒细胞从炎症区域消除，
- 吴敏倪镌刘小利黄艳君周洁黄引平
- 关键词：中性粒细胞凋亡脂氧素外周血免疫相关疾病病理生理特征内皮细胞损伤
- 脂氧素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激反应的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞氧化应激反应的影响.方法 切取正常妊娠剖宫产手术4 h内的新生儿脐带,从中分离出脐静脉内皮细胞并进行传代培养,将培养的脐静脉内皮细胞分成4组：空白对照组,脂多糖处理组（10 μg/ml脂多糖）,脂多糖＋脂氧素处理组（10μg/ml脂多糖＋100 nmol/L脂氧素）,脂氧素处理组（100 nmol/L脂氧素）.分别作用12 h和24 h后进行检测.采用免疫细胞荧光法检测核因子E2相关因子2（Nrf2）的表达及核转位情况、内皮细胞特异性Ⅷ因子的表达;采用逆转录（RT）PCR检测Nrf2、血红素加氧酶（HO）1和还原型辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶（NQO1）mRNA的表达.结果 （1）荧光显微镜下观察到脐静脉内皮细胞胞质内有黄绿色荧光反应,证实有内皮细胞特异性Ⅷ因子抗原存在.（2）免疫细胞荧光染色显示,空白对照组内皮细胞中Nrf2大部分表达在胞质,胞核内基本不表达.12 h后,脂多糖处理组Nrf2胞核内的表达增加,出现了由胞质向胞核的转位;但24 h后,Nrf2在胞质和胞核内的表达都明显下降.脂多糖＋脂氧素处理组在12 h和24 h,Nrf2在胞质和胞核中的表达均明显高于脂多糖处理组;脂氧素处理组Nrf2大部分表达在胞质中.（3）脂多糖处理组和脂多糖＋脂氧素处理组在12 h后,Nrf2和HO-1 mRNA表达水平分别为0.581±0.019、0.081±0.009及0.692±0.048、0.136±0.018,均明显高于空白对照组,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖处理组在12 h后,NQO1 mRNA表达为0.381±0.009,虽高于空白对照组的0.355±0.044,但差异无统计学意义（P＞0.05）,而脂多糖＋脂氧素处理组NQO1 mRNA表达为0.574±0.034,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖处理组24 h后,Nrf2和NQO1 mRNA的表达水平分别为0.180±0.017、0.472±0.064,与空白对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖＋脂氧素处理组Nrf
- 刘忠杰黄引平易攀庞花艳龚建明黄艳君周洁吴萍叶笃筠郝华
- 关键词：脐静脉氧化性应激脂氧素类
