广东省清远市科技计划项目(2012B011204127)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：颜秋霞陈彩蓉陈润强蔡志明唐爱发更多>>
- 相关机构：清远市人民医院深圳市第二人民医院北京大学深圳医院更多>>
- 发文基金：广东省清远市科技计划项目国家自然科学基金深圳市基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ACRV1在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异被引量：5
- 2015年
- 目的研究精子顶体小泡蛋白-1（ACRVl）在正常人和弱精子症患者精液精子中的表达差异，探讨ACRVl在弱精子症发生机制中的作用。方法采用计算机辅助精液分析（CASA）技术对精液进行常规分析，经非连续密度梯度离心分离纯化正常男性和弱精子症患者精液精子，以排除生精细胞和白细胞的污染。采用实时荧光定量PCR（Real-timePCR）和免疫印迹（Western Blot）方法，从mRNA和蛋白水平检测ACRVl的表达及其差异。结果Real．time PCR结果表明，ACRVl mRNA在弱精子症患者精子中的表达量明显低于其在正常对照组精子中的表达量，下降了5．9倍。Westem Blot发现ACRVl蛋白在弱精子症组较正常组下降，该结果与Real-time PCR结果相一致。结论ACRVl基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调可能与精子活力下降有密切关系，提示ACRVl基因及蛋白可能是导致弱精子症发生的原因之一。
- 颜秋霞漆正宇赵晓英郭晓燕陈彩蓉蔡志明唐爱发
- 关键词：聚合酶链反应印迹法蛋白质弱精子症
- 精子顶体相关基因DKKL1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异被引量：3
- 2014年
- 目的:研究精子顶体相关基因DKKL1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。方法:采用RT-PCR和Western Blot方法检测DKKL1基因在人多组织中的表达特征,并比较其在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。采用免疫组化方法分析DKKL1蛋白在正常和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。结果:人多组织RT-PCR和Western Blot结果显示DKKL1基因为睾丸组织特异性表达,与正常人睾丸组织比较,DKKL1基因在男性不育患者睾丸组织中表达减弱或消失。免疫组化结果显示DKKL1蛋白主要定位在正常男性睾丸的精母细胞和圆形精子细胞,而在唯支持细胞综合征(SCOS)和隐睾患者睾丸组织中不表达,在各种生精细胞阻滞患者的睾丸中观察到不同的表达特征。结论:DKKL1基因在男性不育患者睾丸组织中对精子发生可能具有重要作用,其表达降低或消失可能是男性不育症发生的重要原因之一。
- 颜秋霞唐爱发来永庆蔡志明桂耀庭
- 关键词：不育男(雄)性睾丸无精子症
- 清远地区男性不育症患者精液质量与年龄的关系被引量：7
- 2014年
- 目的：探讨清远地区男性不育症患者精液质量与年龄的关系。方法选取该院生殖中心男科门诊就诊的727例男性不育症患者为研究对象，依据年龄分为5组：≤25岁、＞25～30岁、＞30～35岁、＞35～40岁、＞40岁。采用计算机辅助精液分析（CASA）技术以及 Diff-Quick 快速染色法进行精液质量分析。结果＞30～40岁年龄段男性精液浓度较高，各年龄组间精液浓度变化没有统计学差异（P ＞0．05）。随着年龄的增长，前向运动（PR）精子比例、精子总活力以及精子存活率呈相对下降趋势，但各组间无明显统计学差异（P ＞0．05）。＞25～30岁组各项精液参数指标均达到 WHO 标准的比例最高，占该组人数的38．19％，＞40岁组比例最低，占该组人数的27．42％。结论随着年龄的增长，男性的精液质量呈下降趋势，但是不育症可发生在生育期男性的任何阶段。
- 颜秋霞颜秋霞周秀琴冼英杰邱佩嫦周秀琴李艳红陈润强陈彩蓉
- 关键词：男性不育症精液质量年龄
- 人睾丸特异性新基因hT279单克隆抗体制备及其应用
- 2014年
- 目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫Balb/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白表达;获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定后,免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗hT279 mAb,并通过间接ELISA、Western blot和免疫组织化学法对mAb进行特性鉴定。结果实现了hT279的原核表达,获得了1株稳定分泌抗hT279 mAb的杂交瘤细胞株4B2,抗体亚型为IgG2b(κ),效价达到1×104。Western blot鉴定表明,该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量约为22 000处检测到特异条带。免疫组织化学显示hT279蛋白主要在正常人睾丸的精母细胞及圆形精子细胞中表达,而在男性不育患者睾丸组织中表达消失。结论成功制备出1株抗hT279的mAb 4B2,为进一步研究hT279在人类精子发生中的功能和男性不育症的诊断提供了特异的检测工具。
- 颜秋霞李介华陈彩蓉冼英杰周秀琴陈润强蔡志明唐爱发
- 关键词：原核表达单克隆抗体男性不育症
- 精浆NAG和血清FSH联合检测在梗阻性无精子症诊治中的应用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨精浆中性α糖苷酶(NAG)和血清促卵泡生成素(FSH)联合检测在梗阻性无精子症诊断中的意义。方法分析24例男性无精子症患者(14例为梗阻性无精子症,10例为非梗阻性无精子症)精浆NAG和FSH水平,与16例健康已生育男性(正常对照组)的检测结果进行相关性分析,同时结合睾丸体积和详细的病史资料判断无精子症病因及分型。结果无精子症患者(包括梗阻性和非梗阻性无精子症组)与正常对照组年龄差异无统计学意义(P>0.05),非梗阻性无精子症组睾丸体积明显比梗阻性无精子症组和正常对照组小(P<0.01)。无精子症患者NAG含量均明显低于正常对照组(P<0.01),FSH水平均明显高于正常对照组(P<0.01);梗阻性无精子症组NAG和血清FSH水平明显低于非梗阻性无精子症组(P<0.01)。结论精浆NAG和血清FSH联合检测具有经济、快速、安全、无创等优点,对无精子症的诊断和临床指导治疗具有重要意义。
- 颜秋霞周秀琴陈润强冼英杰王秋香邱佩嫦李艳红陈彩蓉
- 关键词：促卵泡生成素梗阻性无精子症
