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重组免疫优势肽段为抗原的ELISA法在检测2型单纯疱疹病毒感染中的应用: 2012年; 目的表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白G免疫优势片段gG321-580，探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性，为进一步开发诊断试剂盒奠定基础。方法整合有sG32l-5踟基因的重组杆状病毒接种s19昆虫细胞，NTA-Ni^2＋纯化表达His-gG32M80融合蛋白。应用HSV-2感染Vero细胞，制备HSV-2病毒抗原。将gG321-580蛋白和HSV-2病毒抗原分别作为包被抗原，建立间接ELISA法（gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELISA）。分别用gG32M80-ELISA和病毒抗原-ELISA检测105份临床样本，两者的检测结果以HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒作为金标准，在特异性、灵敏性和符合率等方面进行比较。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示，表达的gG321-580蛋白相对分子质量约为60000，具有良好的免疫学活性。与HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒相比，gG321-580-ELISA的灵敏度、特异度、符合率分别为83．3％、81．8％、82．9％，病毒抗原-ELISA的灵敏度、特异性和符合率分别为20．8％、93．9％、43-8％。gG321-580-ELISA敏感度和符合率高于病毒抗原-ELISA。结论表达的HSV-2重组gG32M80蛋白作为包被抗原的ELISA法是一种敏感、特异的方法，具有较大的应用价值。; 刘涛斯国静俞骅胡俊李钧; 关键词：疱疹病毒2型酶联免疫吸附测定

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杭州市卫生科技计划项目(20102010)