以优质高抗青枯病烤烟品种K326为材料，在苗期利用注射法接种烟草青枯菌，分不同时期取叶片，利用CTAB法提取接种和非接种的混合RNA，采用SMART（switching mechanism at 5’end of RNA transcript）技术合成双链cDNA，经Sfi Ⅰ酶切后胶回收纯化双链cDNA，连接到质粒载体pDNR—LIB上，电击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，成功构建了青枯菌诱导的烟草叶片全长cDNA文库。经鉴定，初级文库库容为1．902×10^6cfu／mL，重组率达到98％以上，插入片段集中在0．75～2．0kb之间，平均长度约为1300bp，经扩增后的文库滴度为2．97×10^9cfu／mL。随机挑取部分克隆测序，利用生物信息学软件进行初步分析获得部分EST数据。结果显示得到了高质量的全长cDNA文库，这为筛选和克隆青枯菌诱导的胁迫相关基因提供了资源基础。
