广东省科技计划工业攻关项目(2012B031800125)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- miRNA-208b在SD大鼠腹主动脉缩窄心肌肥厚中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的建立腹主动脉缩窄(AAC)大鼠心肌肥厚动物模型并分析大鼠心肌肥厚过程中microRNA-208b(miRNA-208b)动态差异性表达。方法大鼠40只,平均分为AAC组和假手术组(Sham组),AAC组通过AAC的方法建立大鼠心肌肥厚模型,采用miRNA芯片法筛查和实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别检测AAC组与Sham组大鼠心肌中miRNA-208b表达的动态变化。结果 (1)心肌肥厚模型的建立:1心脏指数变化:AAC组大鼠在5、10、15、20 d心脏指数均值稳步上升,与Sham组相比,除5 d时心脏指数差异无统计学意义(P>0.05),10、15、20 d心脏指数差异有统计学意义(P<0.05)。2组织学染色示:AAC组5 d时大鼠心肌细胞排列正常,无明显肥大现象;10 d时大鼠部分心肌细胞排列紊乱,体积增大;15、20 d时大鼠心肌组织排列紊乱,心肌细胞明显肥大,胞浆丰富,细胞间隙不明显,细胞核增大。此均可证明大鼠心肌肥厚模型建立成功。(2)miRNA-208b基因芯片筛查及qRT-PCR检测:1基因芯片筛查实验结果显示,AAC组大鼠心肌中miRNA-208b在5、10、15、20 d分别是Sham组的0.828 2、1.951 4、1.291 9、1.329 6倍,高峰在10 d出现。2qRT-PCR结果显示,AAC组大鼠心肌中miRNA-208b在5、10、15、20 d分别为Sham组(设Sham组中的miRNA-208b表达量为1)的相对表达倍率是(2.65±0.49)、(1.27±0.31)、(1.34±0.69)、(3.45±0.27)倍。与Sham组相比,AAC组miRNA-208b表达在5 d和20 d时差异均有统计学意义(P<0.05);但在10 d和15 d时差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在AAC大鼠中,miRNA-208b表达呈动态差异性变化,且在早期表达较高,先于心肌细胞发生形态学变化,可能成为心肌肥厚早期诊断和干预治疗的新途径。
- 吴菊清欧阳伟冯会娟孙云钢李师思陈盼冼嘉朗黄柳华
- 关键词：微小RNA心肌肥厚基因芯片
- ^(99)Tc^m标记反义miR208b寡核苷酸及其转染离体肥大心肌细胞的实验研究
- 2015年
- 目的探索用放射性核素99Tcm标记反义mi R208b寡核苷酸,并转染离体早期肥大心肌细胞的实验过程及方法。方法合成针对mi R208b的反义mi R寡核苷酸(AMO),LNA(带锁核酸)修饰AMO,将双功能螯合剂NHS-MAG3(N-羟基琥珀酰亚胺-巯基乙酰基三甘氨酸)与LNA-AMO偶联后,用99Tcm标记,然后用Sep-Pak C18反相层析法对NHS-MAG3-LNA-AMO及其标记物进行洗脱纯化,前者同时经Gene Quant DNA/RNA calculator测定在260 nm波长处的吸光度;不同检测方法测定纯化后标记物的标记率、放化纯度、稳定性以及与靶基因杂交的活性;建立由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的离体心肌肥大细胞模型,检验早期肥大心肌细胞内mi RNA208b的相对表达量以及经脂质体包裹的99Tcm-NHS-MAG3-LNA-AMO在早期肥大心肌细胞内的滞留率。结果纯化后的标记物标记率>84%,放化纯度>86%,标记物分别在新鲜人血清、生理盐水中孵育12 h后,放化纯度均大于80%,并具有与靶向基因杂合的能力。离体心肌肥大模型成功建立,测得早期心肌肥大细胞内mi RNA208b表达升高,且最终标记物转染细胞后6 h滞留率大于20%。结论在双功能螯合剂NHS-MAG3以及LNA的介导下,成功将放射性核素99Tcm标记于NHSMAG3-LNA-AMO,最后将反义探针顺利转染早期离体肥大心肌细胞,这为后续的在体心肌肥大核素显像提供重要实验基础。
- 王静冯会娟欧阳伟孙云钢吴菊清陈盼
- 关键词：MI心肌肥大
- 心脏微小RNA与心肌肥厚显像被引量：1
- 2013年
- 心肌肥厚的最后转归是心力衰竭或猝死[1].目前对心肌肥厚的常规检查方法是心脏超声,但超声只在心肌发生形态学改变时才能诊断,而此时临床上对于心肌肥厚的治疗已经无法回到最初的状态.近十几年来人们对心肌肥厚的分子病理学特性进行了大量的研究,发现微小RNA（miR）与心肌肥厚关系密切,miR可通过调节特定的信号通路和靶基因促进或抑制心肌肥厚,但目前研究主要集中于利用定量PCR、microarray等技术检测非活体的心肌miR表达量,尚未有利用活体外直观显像法监测miR的表达,实现早期诊断和治疗心肌肥厚.现就miR与心肌肥厚的关系, 以及miR核素显像在早期诊断心肌肥厚的可能性进行综述.
- 吴菊清欧阳伟
- 关键词：心肌肥厚核素显像微小RNAMICROARRAY常规检查方法形态学改变
