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中山大学医科青年教师科研启动基金(2007018)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：曾春史德海刘斌戎利民张非更多>>
相关机构：中山大学附属第三医院更多>>
发文基金：中山大学医科青年教师科研启动基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇诱导分化
  • 1篇软骨
  • 1篇软骨细胞
  • 1篇腺相关病毒
  • 1篇骨细胞
  • 1篇分化
  • 1篇RAAV2
  • 1篇HTGF-Β...
  • 1篇MSCS

机构

  • 1篇中山大学附属...

作者

  • 1篇董健文
  • 1篇蔡道章
  • 1篇张非
  • 1篇戎利民
  • 1篇刘斌
  • 1篇史德海
  • 1篇曾春

传媒

  • 1篇中华显微外科...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
rAAV2-hTGF-β1转染犬MSCs诱导分化为软骨细胞的研究
2009年
目的探讨rAAV2-hTGF-β1体外转染犬MSCs定向分化为软骨细胞的可行性。方法应用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离培养犬MSCs。倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态．流式细胞技术鉴定其表面标记物。取第三代MSCs，分别以感染复数（MOI）为1×10^5病毒基因数／细胞（v.g／cell）、5×10^5v．g．／cell的rAAV2-hTGF-β1进行转染。培养后定期取各组细胞进行相关检测。Western blot检测hTGF—β1的表达，ELISA法测定hTGF—β1的含量。RT-PCR检测Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA的表达，免疫细胞化学法检测Ⅱ型胶原的表达。结果原代及传代培养的MSCs呈梭形外观，具有较强的增殖能力。细胞表面抗原CD29、CD44、CD105表达阳性，CD34、CD45表达阴性。rAAV2-hTGF-β1转染MSCs后，Western blot法检测到目的蛋白hTGF—β1稳定表达；ELISA法检测转染组MSCs培养上清液中的hTGF-β1表达，且随时间的延长，各组hTGF—β1浓度逐渐增加，MOI5×10^5组表达量明显高于MOI1×10^5组（P〈0．01）；RT—PCR检测到各转染组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达，免疫细胞化学法检测转染组细胞Ⅱ型胶原呈阳性表达，且高MOI值组表达强度明显高于低MOI值组。结论rAAV2-hTGF—β1转染犬MSCs后可定向分化为软骨细胞，作为软骨组织工程的种子细胞是可行的。
刘斌蔡道章戎利民董健文曾春史德海张非
关键词：腺相关病毒软骨细胞
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