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国家自然科学基金(30471313)

作品数：8 被引量：66H指数：6
相关作者：夏庆友赵萍官建刘鸿丽邹勇更多>>
相关机构：西南大学西南农业大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市科学技术委员会院士基金更多>>
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文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 6篇生物学
  • 4篇农业科学

主题

  • 8篇家蚕
  • 3篇蛋白
  • 3篇电泳
  • 3篇双向电泳
  • 3篇克隆
  • 2篇蛋白质
  • 2篇蛋白质组
  • 2篇蛋白质组学
  • 2篇白质
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白酶D
  • 1篇蛋白酶基因
  • 1篇蛋白质组学研...
  • 1篇电子克隆
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇多态性分布
  • 1篇血液
  • 1篇研究方法
  • 1篇英文

机构

  • 6篇西南大学
  • 2篇西南农业大学

作者

  • 7篇夏庆友
  • 5篇赵萍
  • 3篇向仲怀
  • 3篇侯勇
  • 3篇邹勇
  • 3篇刘鸿丽
  • 3篇官建
  • 2篇李娟
  • 2篇赵萍
  • 1篇程廷才
  • 1篇李娟
  • 1篇王根洪
  • 1篇代方银
  • 1篇杨远萍
  • 1篇刘春
  • 1篇刘春
  • 1篇林英
  • 1篇查幸福
  • 1篇王子龙
  • 1篇孙全

传媒

  • 2篇昆虫学报
  • 2篇生物工程学报
  • 1篇Curren...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇蚕业科学
  • 1篇蚕学通讯

年份

  • 1篇2008
  • 3篇2007
  • 2篇2006
  • 2篇2005
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
家蚕体液低分子蛋白Apolipophorin Ⅲ的质谱鉴定及表达分析被引量：4
2008年
利用SDS-PAGE电泳对家蚕不同时期的血淋巴蛋白进行了研究。发现在家蚕羽化前,血淋巴液中有一个分子量约20kD的蛋白表达量明显上调。为了探究该蛋白的功能,本研究通过双向电泳分离和肽质量指纹图谱分析对该蛋白进行了鉴定。结果表明,此羽化前后高表达的蛋白为Apolipophorin Ⅲ蛋白,该类蛋白被普遍认为与昆虫的飞行能力有关。利用RT-PCR对该蛋白编码的基因进行了组织表达分析,结果表明该基因除了在马氏管几乎不表达外,其它组织均有表达,这也暗示了该蛋白除了与昆虫的飞行活动有关以外,还参与了幼虫及蛹期的其他重要的生命活动。
官建赵萍侯勇刘鸿丽邹勇夏庆友
关键词：SDS-PAGE质谱双向电泳家蚕
家蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂的多态性分布被引量：8
2006年
家蚕Bombyxmori的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsininhibitor,CI)在家蚕发育过程中发挥着重要作用,具有丰富的多态性。为了进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂在群体水平上的多态性分布,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,调查了425个家蚕品系的血液胰凝乳蛋白酶抑制剂的分布情况。结果表明,基因IctA、IctD和IctE在所有家蚕品系中存在,暗示它们是家蚕正常生长发育必需的基因;相反,至少在9个家蚕品系中发现基因IctB和IctH都没有表达,而这些品系没有明显的生理缺陷。在中国品系和日本品系家蚕之间,胰凝乳蛋白酶抑制剂分布规律基本一致。对52个纯品系家蚕的胰凝乳蛋白酶抑制剂分布进行的聚类分析结果表明,胰凝乳蛋白酶抑制剂分布与其系统、眠性和化性都没有明显的相关性。所以家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂广泛存在于不同家蚕品系中,同时多态性的分布特征也表明其生理功能在进化过程中发生了明显的分化。
李娟赵萍代方银孙全夏庆友向仲怀
关键词：家蚕品系血液多态性分布
家蚕一种新的胰蛋白酶基因电子克隆和序列分析被引量：10
2005年
以按蚊胰蛋白酶基因的氨基酸序列为信息探针,对家蚕EST数据库进行同源检索筛选,克隆了家蚕一种新的胰蛋白酶基因。该基因编码2 71个氨基酸,与按蚊胰蛋白酶的一致性为32 % ,含有典型的胰蛋白酶功能结构域Tryp -SPc ,但在催化三联体中His不保守。
李娟赵萍
关键词：蛋白酶基因电子克隆家蚕EST数据库功能结构域三联体
家蚕脂肪体蛋白质组学研究被引量：23
2007年
通过高精度的双向电泳技术对家蚕末龄幼虫的脂肪体组织进行了研究,采用基质辅助质量飞行时间质谱对其中一些表达量较高的蛋白点进行了鉴定,并利用GPMAW软件结合家蚕基因组预测的蛋白质数据库构建了本地的肽质量指纹图谱数据库,对所得到的肽质量指纹图谱进行了分析。研究发现,经过双向凝胶电泳及其图象分析技术,银染可以分离出722个清晰蛋白点,这些蛋白质主要集中在分子量15～90kD区域,等电点pH4～8之间。MALDI-TOF-MS鉴定的41个蛋白点中都有较强的肽质量指纹信号峰,其中34个蛋白点得到了成功鉴定,其中包括了大量参与代谢的酶类、不同分子量的热激蛋白、重要的血液蛋白30K,Actin3等,这一结果对人们进一步认识家蚕脂肪体提供了有利的帮助。
侯勇赵萍刘鸿丽邹勇官建夏庆友
关键词：家蚕脂肪体双向电泳MALDI-TOFMS
一个新的家蚕kunitz类型CI基因的克隆和序列分析被引量：1
2007年
家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)的多个编码基因位于多个染色体位点上,是家蚕CI具有丰富多态性的原因之一。根据Gene Bank中登录的家蚕CI基因Sci-sb的mRNA,设计引物克隆了一个家蚕kunitz类型的CI基因,命名为CI-fb。CI-fb基因有3个外显子,开放阅读框长度为255 bp,编码85个氨基酸残基,具有一个典型的kunitz结构域。CI-fb基因与其他已知的kunitz类型的CI基因相比,在基因序列和结构、蛋白序列和结构上高度相似,但在已知的CI基因家族中序列最短。RT-PCR分析表明,CI-fb基因在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢、马氏管、气管和中肠6个组织中表达,而在丝腺、血细胞和体壁中没有表达,是一个组织特异性表达的基因。研究结果为进一步研究家蚕CI的多态性和功能提供了新的线索。
赵萍李娟林英夏庆友向仲怀
关键词：家蚕基因克隆
家蚕丝腺蛋白质组学研究方法的建立被引量：8
2007年
通过高精度的双向电泳技术对家蚕中部丝腺组织的蛋白质进行分离，采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption／ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）对其中一些表达量较高的蛋白点进行鉴定，并利用GPMAW（General Protein／Mass Analysis for Windows）软件结合家蚕基因组预测的蛋白质数据库构建本地的肽质量指纹图谱数据库，对所得到的肽质量指纹图谱进行分析。研究发现，经过双向凝胶电泳及其图象分析技术，硝酸银染色和考马斯亮蓝染色分别能分离出500个以上和100个以上的蛋白点。这些蛋白质点主要集中在分子量15～90kD区域，等电点pH3．5～7之间。MALDI-TOF-MS鉴定的25个考染蛋白点中有60％以上的PMF（Peptide Mass Fingerprint）的信号峰较强。在数据库检索过程中，利用家蚕肽质量指纹数据库所得检索结果与在Mascot的检索结果相比，前者不仅能够准确鉴定出一些已有研究报道的蛋白．从而验证检索方法的可行性，而且还能够对一些已经被家蚕基因组数据库所预测但未曾报道的新蛋白质进行鉴定，从而建立了一整套适合于家蚕蛋白质组研究的方法，并为其它绢丝昆虫蛋白质组研究提供了重要参考。
刘鸿丽夏庆友侯勇赵萍邹勇官建
关键词：双向电泳MALDI-TOF-MS
家蚕Fhx/P25基因的一种新的转录模式分析研究(英文)被引量：13
2005年
家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx/P25基因在丝腺和卵巢组织中有不同的转录起始位点,在卵巢组织中的转录起始位点比在丝腺中的至少要提前115bp左右.用RT-PCR和FQ-PCR进一步验证,以上分析结果均正确.分析还发现Fhx/P25mRNA存在选择性拼接.以上结果表明Fhx/P25基因并不是组织特异转录基因,它的转录表达存在复杂的调控机制,可能还有其他功能.
刘春赵萍程廷才查幸福夏庆友向仲怀
关键词：家蚕转录起始位点
家蚕组织蛋白酶D基因的克隆、序列分析及其表达谱研究被引量：7
2006年
组织蛋白酶D(cathepsinD,CtD)是溶酶体内天冬氨酸内切蛋白酶,参与机体多种生理病理过程,尤其在昆虫的发育变态过程中起着重要作用。利用NCBI上登录的组织蛋白酶D基因核酸序列和家蚕Bombyxmori表达序列标签(expressedsequencetags,EST)数据库,进行电子克隆获得家蚕组织蛋白酶D(BmCtD)基因的全长cDNA(DQ010007)。该cDNA大小为1543bp,其中ORF长1152bp,同源性分析表明BmCtD与其他物种的CtD具有较高的相似性。BmCtD的mRNA存在选择性拼接,另外一种mRNA形式命名为BmCtDⅠ。RT-PCR实验表明该基因在本实验所调查的家蚕不同发育时期和组织中都有表达。
杨远萍刘春王子龙王根洪夏庆友
关键词：家蚕组织蛋白酶D克隆表达谱
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