广东省重大科技攻关项目(2003A20403)
- 作品数:2 被引量:13H指数:2
- 相关作者:黄毓茂贺东生罗满林亓文宝刘镇明更多>>
- 相关机构:华南农业大学广州市儿童医院更多>>
- 发文基金:广东省重大科技攻关项目广东省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛结核病荧光定量PCR快速检测方法的建立及初步应用被引量:6
- 2007年
- 目的建立牛结核病荧光定量PCR快速检测方法。方法根据分枝杆菌的插入序列IS1081设计引物和探针,优化反应条件,建立标准曲线,进行特异性、敏感性、重复性实验,并用所建立的方法对临床样品进行检测。结果该方法的敏感性达到了10个拷贝,且特异性高,重复性好。对30份PPD试验和巢式PCR检测都为阳性的临床样本进行荧光定量PCR检测的结果全部为阳性;而对PPD检测阳性,巢式PCR检测为阴性的15份临床样本进行检测时,2份为阳性;在对2份PPD检测阴性而巢式PCR检测阳性的临床样本的检测结果也为阳性。结论成功建立了牛结核病荧光定量PCR快速检测方法,对临床样品的快速检测和牛结核病的早期诊断具有重要意义。
- 亓文宝罗满林周荣白培胜贺东生刘镇明黄毓茂
- 关键词:牛结核病荧光定量PCR巢式PCRPPD
- 牛结核病巢式PCR快速检测方法的建立被引量:8
- 2006年
- 根据分枝杆菌(mycobacteria)保守的插入序列IS1081设计4条特异性引物,建立了快速检测牛结核病的巢式PCR方法。该方法一次扩增的敏感性是1.35 pg,二次扩增的敏感性是1.35 fg。在对95份PPD阳性牛临床病料组织和23份血液样本的PCR检测中,用引物TB-Q1和TB-Q2做一次扩增,阳性检出率分别为36/95(37.5%)和5/23(21.7%);用引物TB-B1和TB-B2做二次扩增,阳性检出率分别为81/95(85.3%)和14/23(60.9%)。该方法作为辅助PPD试验的快速检测方法用于牛结核病的流行病学调查,具有重要的实用价值和应用前景。
- 亓文宝陈世灿罗满林方正刚贺东生刘镇明黄毓茂
- 关键词:牛结核病巢式PCRPPD