国家自然科学基金(30671330)
- 作品数:3 被引量:14H指数:2
- 相关作者:曾千春吴才文姚丽王雪松徐艳更多>>
- 相关机构:云南农业大学云南省甘蔗遗传改良重点实验室云南省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
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- 农杆菌介导转化甘蔗系统优化
- 高光效C4作物甘蔗是重要的糖料和能源植物,其复杂的遗传背景导致传统方法改良甘蔗品种十分困难。农杆菌介导转化甘蔗可以较快地改良甘蔗的单一性状,但转化效率低获得可稳定遗传转化体相对较少。我们对该技术的一些改进提高了总体转化效...
- 罗琼姚丽吴才文朱祯曾千春
- 关键词:甘蔗农杆菌
- 文献传递
- 农杆菌介导遗传转化云蔗05-51
- 2021年
- 【目的】建立云蔗05-51组培再生体系明确其对抗生素G418的耐受性,为云蔗05-51基因工程遗传改良提供参考。【方法】以云蔗05-51心叶为外植体,MS基本培养基添加2,4-D、6-BA和KT,设置质量浓度梯度及不同激素配比,诱导愈伤组织及其分化植株。在云蔗05-51胚性愈伤组织增殖与不定芽分化阶段,培养基中添加不同含量的G418,确定合适的G418筛选质量浓度。以nptⅡ为标记基因,农杆菌介导遗传转化云蔗05-51胚性愈伤组织,筛选获得抗性植株,PCR和NPTⅡImmunoStrip检测确定nptⅡ基因的整合与表达。【结果】云蔗05-51愈伤组织诱导与增殖阶段,适宜的培养基配方为MS基本培养基添加3.0 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化不定芽阶段宜采用MS基本培养基添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT。云蔗05-51对G418耐受性筛选结果显示:愈伤组织增殖阶段和分化不定芽阶段G418的适宜筛选质量浓度分别为40和20 mg/L。G418抗性植株PCR检验表明:标记基因nptⅡ已成功整合到云蔗05-51转基因植株基因组中;NPTⅡImmunoStrip检测表明:nptⅡ的蛋白水平得以表达。【结论】建立了云蔗05-51心叶组培再生体系,明确了40和20 mg/L G418是筛选抗性愈伤和抗性植株的适宜质量浓度。建立了农杆菌介导遗传转化云蔗05-51胚性愈伤组织系统,为有益基因导入甘蔗品种提供了参考。
- 段智睿吴转娣姚丽覃伟吴才文曾千春
- 关键词:甘蔗G418PCR
- 甘蔗遗传转化中不同阶段潮霉素抗性筛选被引量:10
- 2010年
- 以新台糖22的胚性愈伤组织为材料,在诱导培养基、分化培养基及生根培养基中,分别添加不同浓度的潮霉素(Hyg)为选择性试剂,以确定甘蔗遗传转化时的最佳筛选浓度。结果表明:潮霉素对不同阶段培养基的敏感性存在一定差异,在甘蔗遗传转化时3种培养基的抗性筛选浓度分别以50、30、30mg/L为佳;在分化培养基内的毒性作用比在诱导培养基内更快、效果更好,故遗传转化时可直接将Hyg用于分化培养基进行抗性芽筛选试验。
- 姚丽吴才文曾千春
- 关键词:甘蔗组织培养潮霉素抗性试验
- 甘蔗抗虫转基因研究进展被引量:5
- 2007年
- 甘蔗是重要的糖料和能源作物,甘蔗生产中鳞翅目害虫(大螟、二点螟等)和同翅目害虫(甘蔗绵蚜等)的危害已成为其持续、稳定和健康发展的严重障碍。甘蔗组织培养和离体再生等技术体系比较成熟,十分有利于基因工程改良,利用基因枪转化和农杆菌介导法等已经建立了多种甘蔗受体系统与转化系统,成功获得甘蔗转基因植株。综述了甘蔗转基因技术、抗虫基因以及甘蔗抗虫转基因研究进展。
- 徐艳王雪松曾千春
- 关键词:甘蔗抗虫基因转基因