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国家高技术研究发展计划(2006AA10A204)

作品数:92 被引量:329H指数:10
相关作者:常惠芸金宁一鲁会军独军政高闪电更多>>
相关机构:中国农业科学院兰州兽医研究所军事医学科学院华南农业大学更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>

文献类型

  • 92篇期刊文章
  • 23篇会议论文

领域

  • 92篇农业科学
  • 26篇生物学
  • 15篇医药卫生
  • 1篇化学工程
  • 1篇环境科学与工...
  • 1篇理学

主题

  • 86篇病毒
  • 38篇疫病
  • 38篇口蹄疫
  • 38篇口蹄疫病毒
  • 28篇免疫
  • 25篇疫苗
  • 16篇狂犬
  • 14篇猪瘟
  • 13篇腺病
  • 13篇腺病毒
  • 13篇基因
  • 12篇蛋白
  • 11篇重组腺病毒
  • 11篇猪瘟病
  • 11篇猪瘟病毒
  • 11篇瘟病毒
  • 11篇细胞
  • 10篇犬病
  • 10篇免疫原性
  • 9篇流感

机构

  • 37篇中国农业科学...
  • 22篇华南农业大学
  • 21篇军事医学科学...
  • 20篇中国农业科学...
  • 13篇甘肃农业大学
  • 8篇西北农林科技...
  • 7篇吉林大学
  • 7篇延边大学
  • 6篇云南农业大学
  • 5篇中国农业科学...
  • 4篇东北农业大学
  • 4篇华中农业大学
  • 4篇黑龙江八一农...
  • 4篇辽宁医学院
  • 4篇吉林农业大学
  • 4篇中国兽医药品...
  • 4篇中国动物疫病...
  • 2篇深圳出入境检...
  • 1篇广东省农业科...
  • 1篇清华大学

作者

  • 15篇金宁一
  • 13篇常惠芸
  • 13篇鲁会军
  • 11篇高闪电
  • 11篇独军政
  • 9篇殷相平
  • 9篇张桂红
  • 9篇柳纪省
  • 9篇马鸣潇
  • 8篇邵军军
  • 7篇林彤
  • 7篇胡博
  • 6篇薛飞
  • 6篇仇华吉
  • 6篇朱远茂
  • 6篇尚佑军
  • 6篇孙元
  • 6篇亓文宝
  • 6篇张彦明
  • 6篇丛国正

传媒

  • 11篇中国预防兽医...
  • 7篇生物工程学报
  • 6篇中国生物制品...
  • 5篇动物医学进展
  • 5篇畜牧兽医学报
  • 4篇微生物学报
  • 4篇中国人兽共患...
  • 4篇Virolo...
  • 3篇中国兽医学报
  • 3篇华北农学报
  • 3篇微生物学通报
  • 3篇病毒学报
  • 3篇中国畜牧兽医
  • 2篇生物技术通报
  • 2篇西北农林科技...
  • 2篇华南农业大学...
  • 2篇中国农学通报
  • 2篇中国生物工程...
  • 2篇Agricu...
  • 2篇中国畜牧兽医...

年份

  • 2篇2012
  • 9篇2011
  • 31篇2010
  • 40篇2009
  • 28篇2008
  • 5篇2007
92 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体基因和绿色荧光蛋白基因在BHK-21细胞中的表达被引量:11
2009年
为建立逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体蛋白哺乳动物细胞表达体系,将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳前体基因(P1)和绿色荧光蛋白基因(EGFP)依次插入逆转录病毒载体pBABEpuro构建重组逆转录病毒载体pBABEpuro-P1-2A-EGFP。将重组逆转录病毒载体和pVSV-G质粒载体共转染GP2-293包装细胞,用产生的重组逆转录病毒感染幼仓鼠肾细胞(BHK-21)。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,用嘌呤霉素筛选抗性细胞,间接免疫荧光方法检测细胞中FMDV衣壳前体蛋白的表达。结果表明,重组逆转录病毒载体pBABEpuro-P1-2A-EGFP构建正确,绿色荧光蛋白和FMDV衣壳前体蛋白在细胞中能稳定表达。FMDV衣壳前体蛋白基因细胞表达体系的成功建立为进一步开展口蹄疫亚单位疫苗的研制奠定了基础。
李炯刘艳红安芳兰刘俊林刘湘涛尚佑军殷宏
关键词:逆转录病毒载体口蹄疫病毒绿色荧光蛋白基因BHK-21细胞
Application of GP5 Protein to Develop Monoclonal Antibody against Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus被引量:2
2011年
In this study, a panel of monoclonal antibodies (mAbs) against Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), named as 8C9 and4B4, were produced by fusing SP2/0 myeloma cells and spleen cells of BALB/c mice immunized with the PRRSV (TCID50=5.5), screened by the indirect ELISA and subjected to several limiting dilutions, mAbs were then identified by biological characterization. Among the two fusion cell strains, 8C9 belonged to the IgG1 subclass and 4B4 belonged to the IgG2a subclass. The titers in cell culture supematant and abdomen liquor reached to 1:104and 1:105, respectively. The specificity test indicated that the two cells had specific reactions for the PRRSV and GP5 protein respectively, and no reaction with Classical swine fever virus (CSFV) or Swine vesicular disease virus (SVDV). The molecular weights of the heavy chain and light chain were about 45.0 kDa and 25.0 kDa, respectively. In neutralization activity tests, the results showed that the prepared mAb 4B4 can protect 50% of cells with no CPE in dilution up to 1:512, but mAB 8C9 has no neutralization activities to PRRSV.
Hong Tian Yan Cheng Jin-yang Wu Jian-hui He You-jun Shang Xiang-tao Liu
O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救被引量:1
2008年
以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定,结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒。同时用空斑试验法观察了拯救病毒及其母本毒株的生长特性,结果表明二者没有明显差异,这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础。
马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世
关键词:口蹄疫病毒CDNARNA
广东省猪圆环病毒2型全基因组序列的比较和分析
2011年
参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)全基因组序列,设计引物,通过PCR技术,从广东地区疑似"高热病"病猪的组织中,扩增17株PCV2流行株的全基因,并进行了序列测定分析.结果表明,17个PCV2分离株基因组全长为1 767或1 768 bp.相似性比较发现,17个分离株之间的核苷酸相似性为96.7%-99.8%,与GenBank上已发表的国外分离株比较,相似性为95.6%-99.8%;17个分离株ORF2、ORF3的核苷酸相似性分别为89.5%-100%和97.5%-100%;系统发育树显示,17个毒株有2株属于a亚群,10株属于b亚群,5株属于d亚群.
于俊勇徐廷川张得玉罗玉钧何逸民张桂红
关键词:猪圆环病毒2型基因克隆
表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究
将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacⅠ酶切后转染HEK-2...
殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省
关键词:狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫
文献传递
共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
为了获得新型双价'自杀性'DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(...
孙建富赵和平李娜孙元夏照和周艳君王煜祁巧芬鲁承仇华吉
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒共表达
文献传递
猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救被引量:5
2009年
采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18-T载体并测序。经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5′和3′末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T1-7。利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T1-7体外转录成基因组RNA,再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK-15细胞。通过传代、RT-PCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定,表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子。猪瘟病毒低温诱变疫苗"Thiverval"株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救,为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具。
范运峰赵启祖赵耘邹兴启徐璐张仲秋王琴宁宜宝
关键词:猪瘟病毒感染性克隆病毒拯救
Asia 1型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因真核表达质粒的构建及鉴定被引量:1
2008年
目的构建Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A-3C基因真核表达质粒。方法采集疫区牛的水疱液及水疱皮,经RT-PCR法扩增出Asia 1型FMDV的前体蛋白基因P1-2A片段和蛋白酶基因3C片段,分别克隆至pMD18-T载体上,通过酶切、连接,获得质粒pMD18-T-P1-2A-3C。经酶切获得P1-2A-3C片段,插入真核表达载体pVAXⅠpCMV启动子下游,构建pVAXⅠ-P1-2A-3C真核表达载体,用脂质体法转染HeLa细胞,进行IFA检测。结果Asia 1型FMDV真核表达载体pVAX1PⅠ-2A-3C,经酶切鉴定证明构建正确,转染HeLa细胞后,可见明显的黄绿色荧光,表明P1-2A-3C基因得到了表达。结论pVAXⅠ-P1-2A-3C可作为Asia1型FMD核酸疫苗的候选疫苗。
霍晓伟金宁一鲁会军马鸣潇牟伟峰
关键词:口蹄疫病毒真核表达核酸疫苗
Heterogeneity and Secondary Structure Analysis of 3' Untranslated Region in Classical Swine Fever Viruses被引量:1
2011年
The attenuated vaccine strains of CSFV have a 12-nucleotides (nt) insertion in the 3'-UTR of genome as compared to that of CSFV virulent strains. In this study, we found a distinct heterogeneity in the 3'-UTR of attenuated Thiverval and HCLV strains. The longest 3'-UTR of Thiverval strain was 259 base pairs (bp) with a 32-nt insertion, the shortest 3'-UTR had only 233 bp with a 6-nt insertion. The longest 3'-UTR of HCLV strain was 244 bp with a 17-nt insertion and the shortest 3' UTR was 235 bp with a 8-nt insertion. Compared with the published sequences of 3'-UTR of vaccine and virulent strains, the 3'-UTR of CSFV vaccine strains have two variable regions where insertion among the different vaccine strains were frequently found. The first is located between the second conservative TALk codon and the start of T-rich region where we found the variable length insertion in the same vaccine strain Thiveral or HCLV and the second is located between the end of T-rich region and the front of GAA eodon, however, a 4-nt deletion was found in this region in the virulent Shimen strain. These two regions may represent the "hot spot" for mutation. Modeling the secondary structures of the 3'-UTR suggests that the T-rich insertion could result in the change of structure and free energy, thus affecting the stability of the 3'-UTR structure. These findings will help to understand the mechanism of attenuated vaccines and improve vaccine safety, stability, and efficacy.
FAN Yun-fengZHAO Qi-zuZHAO YunZOU Xing-qiZHANG Zhong-qiuWANG QinNING Yi-bao
关键词:HETEROGENEITY
ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较被引量:16
2009年
比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体。将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21d攻击狂犬病毒BD06株。结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%。
孙招金薛素强刘晓慧郭霄峰郭慧霞
关键词:ELISA
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