重庆市科技攻关计划(CSTC2009AC5017)
- 作品数:4 被引量:4H指数:2
- 相关作者:龚建平邹利全钮柏琳慎华平杜慧敏更多>>
- 相关机构:重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学附属第一医院解放军324医院更多>>
- 发文基金:重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 树状串联hTERT表位肽负载mDC疫苗体外激发抗瘤免疫应答的效应研究被引量:2
- 2011年
- 目的通过树状串联hTERT表位肽的髓样树突状细胞(mDC)递呈,刺激同源淋巴细胞,探索一种更优的肿瘤免疫治疗方法。方法人工固相合成4分支的树状串联hTERT表位肽(MAP)及其各分支单肽,免疫荧光检测hTERT的表达情况,免疫磁珠分选mDC,尼龙毛柱纯化T细胞,ELISA检测mDC的IL-12p70和淋巴细胞的(LC)TNF-α、IFN-γ分泌量,流式细胞技术检测mDC、LC的相关表面分子以及效应性T细胞对HLA-A2型肿瘤A549、MDA-MB-231和SW480的杀伤率,并作统计学分析。结果所有肿瘤细胞都表达hTERT,且胞核大于胞浆;MAP和混合单肽对3种肿瘤细胞都有杀伤效应,且MAP的杀伤效应大于混合单肽,有统计学差异。结论人工合成hTERT的MAP肽通过mDC能足够强的激活同源淋巴细胞,在肿瘤疫苗的研发中有重要意义。
- 钮柏琳慎华平龚建平杜慧敏杨仕明邹利全
- 关键词:表位肽髓样树突状细胞磁珠分选
- hTERT多表位肽致敏mDC诱导CTL对HLA-A24^+肿瘤细胞的特异性杀伤作用被引量:2
- 2011年
- 目的:研究人工合成人端粒酶逆转录酶(hTERT)多表位混合肽经髓样树突状细胞(mDC)提呈后,诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对HLA-A24+肿瘤细胞的免疫杀伤效应。方法:人工合成四分支的树状串联hTERT表位肽(MAPs)及其各单表位多肽。取HLA-A24+健康志愿者的外周血,用免疫磁珠分选并培养mDC。用尼龙毛柱纯化T淋巴细胞并培养。以各表位肽致敏mDC后,诱导特异性CTL增殖,并以表达hTERT且以HLA-A24+肿瘤细胞株SMMC-7721及HLA-A24-肿瘤细胞株SKOV3为靶细胞行杀伤实验。用ELISA法检测不同时间点培养基上清液中IL-12、TNF-α的分泌量;用流式细胞术检测CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果:以源于hTERT的T淋巴细胞表位I540(ILAKFLHWL)、V461(VYGFVRACL)及L766(LTDLQPYMRQFVAHL)合成4分支MAPs多肽及各单表位混合多肽。以人工合成的hTERT多表位混合肽致敏mDC后,能刺激CTL增殖,并可诱导对HLA-A24+肿瘤细胞株SMMC-7721的特异性杀伤作用,且MAPs多肽较单表位混合多肽的致敏效果更具显著性(P<0.05)。结论:以人工合成的hTERT多表位混合肽致敏mDC能激活同源淋巴细胞(CTL),可特异性杀伤HLA-A24+的肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗中具有重要的意义。
- 慎华平钮柏琳杜慧敏邹利全龚建平
- 关键词:人端粒酶逆转录酶髓样树突状细胞
- 人端粒酶逆转录酶抗原表位在肿瘤免疫治疗中的作用
- 2010年
- 人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)特异性高表达于肿瘤组织,是肿瘤免疫治疗研究中的热门靶点。目前已有多个hTERT抗原表位肽被鉴定提取,并受限于不同的HLA表型,针对hTERT抗原表位的多肽疫苗可诱导hTERT特异性T淋巴细胞免疫反应,能特异地杀死hTERT阳性的肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗中有广阔的应用前景。
- 慎华平钮柏琳邹利全龚建平
- 关键词:人端粒酶逆转录酶肿瘤相关抗原多肽疫苗免疫原性
- 人工合成树状串联hTERT表位肽对mDC表型和功能的影响
- 2011年
- 目的 通过对树状串联hTERT表位肽(MAP)与无肽刺激组髓样树突状细胞(mDC)的相关检测,研究MAP肽对mDC的表型和功能的影响.方法 人工固相合成四分支的MAP肽,免疫磁珠分选mDC,流式细胞技术检测相关表面分子.ElISA分别检测两组mDC培养基的IL-12p70含量,并作统计学分析.结果 人工合成MAP肽纯度高(95.26 %),免疫磁珠分选mDC纯度为72.59 %,相比于无肽刺激组mDC,MAP肽刺激组成熟(培养第9天)时MHCⅡ类分子为83.90 %、MHCⅠ类分子为91.08 %,CD86:77.03 %,CD83:92.16 %;IL-12p70的含量也大于无肽刺激组,且有统计学差异.结论 人工合成hTERT的MAP肽能足够强的激活mDC,刺激其成熟和功能的表达,可作为mDC抗肿瘤疫苗的刺激肽结构.
- 钮柏琳慎华平杜慧敏杨仕明邹利全龚建平
- 关键词:人端粒酶逆转录酶表位肽髓样树突状细胞磁珠分选