安徽省高校省级自然科学研究项目(2006Kj322B)
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
- 相关作者：黄升海云云刘伟更多>>
- 相关机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肺上皮细胞感染呼吸道合胞病毒后核内活性因子κB与诱导型一氧化氮合酶的表达被引量：7
- 2008年
- 目的:呼吸道合胞病毒感染呼吸道上皮细胞后,诱导细胞过度表达活性递质。实验拟观察呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞A549后核内活性核因子κB,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白、一氧化氮和丙二醛表达的变化。方法:实验于2006-12/2007-05在安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验中心完成。①实验过程:将冻存的病毒株复苏后经Hep-2细胞增殖。用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,分别于感染4,8,16,24h后收集细胞和细胞培养上清。以未感染病毒的细胞为正常对照组。②实验评估:反转录聚合酶链反应检测诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的变化;免疫印迹法(Western-Blot)分别检测核内活性核因子κB、诱导型一氧化氮合酶蛋白的变化;用硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法分别检测细胞培养上清一氧化氮和丙二醛的表达。结果:①A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染后,核内活性核因子κB表达升高,且随着感染时间的延长而增加。②呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白的表达均升高且有时间依赖性,24h的诱导型一氧化氮合酶mRNA表达量是基础表达量的近12倍,诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达亦显著高于正常对照组。核内活性核因子κB与诱导型一氧化氮合酶的mRNA和蛋白升高表达呈正相关。③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞培养上清中一氧化氮和丙二醛的表达升高,24h内细胞上清中的一氧化氮呈缓慢升高变化。结论:在呼吸道合胞病毒感染A549细胞的炎性反应中核内活性核因子κB升高,与诱导型一氧化氮合酶基因和蛋白的上升表达呈正相关。
- 刘伟云云黄升海
- 关键词：诱导型一氧化氮合酶一氧化氮
- Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞的炎性反应及其信号转导通路被引量：8
- 2007年
- 目的:观察呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞A549后Toll样受体3表达的变化,探讨Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞的炎性反应及其介导的信号转导通路。方法:实验于2006-05/12在安徽医科大学基础医学院分子生物学实验室完成。用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,于感染后4,8,16,24h收集细胞和细胞培养上清。用Trizol提取细胞总RNA,RT-PCR法检测TOLL样受体3mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA表达的变化;提取细胞总蛋白和核蛋白,免疫印迹法分别检测TOLL样受体3蛋白、核内活性核因子κB的变化;用ELISA检测细胞培养上清肿瘤坏死因子α的表达。以未感染病毒的细胞为正常对照组。结果:①呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,Toll样受体3和肿瘤坏死因子α的mRNA和蛋白的表达量均升高且有时间依赖性,Toll样受体3mRNA24h表达量是基础表达量的5倍多,肿瘤坏死因子αmRNA24h表达量是基础表达量的3倍多。②A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染,核内活性核因子κB随感染时间的延长升高;同时呼吸道合胞病毒感染能促进Toll样受体3蛋白的表达,高于正常对照组(P<0.01)。③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞分泌肿瘤坏死因子α,感染24h分泌达到高峰。结论:呼吸道合胞病毒感染A549细胞后上调Toll样受体3表达,其诱导的炎性反应与Toll样受体3介导的信号转导途径有关。
- 云云黄升海
- 关键词：TOLL样受体呼吸道合胞病毒核因子ΚB
