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国家自然科学基金(30371036)

作品数：3 被引量：8H指数：1
相关作者：杨宁连正兴潘求真李佳李海更多>>
相关机构：中国农业大学北京锦绣大地农业股份有限公司东北农业大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇荧光
  • 3篇荧光蛋白
  • 3篇绿色荧光
  • 3篇绿色荧光蛋白
  • 2篇基因
  • 2篇干细胞
  • 1篇同源
  • 1篇同源重组
  • 1篇转基因
  • 1篇转基因克隆
  • 1篇转染
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链式反...
  • 1篇基因克隆
  • 1篇基因转染
  • 1篇基质干细胞
  • 1篇间充质干细胞
  • 1篇供体
  • 1篇骨髓基质

机构

  • 4篇中国农业大学
  • 2篇北京锦绣大地...
  • 1篇东北农业大学
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 4篇潘求真
  • 4篇连正兴
  • 4篇杨宁
  • 3篇韩红兵
  • 3篇张宝路
  • 3篇李海
  • 3篇李佳
  • 2篇徐曙光
  • 2篇王海
  • 2篇田亮
  • 2篇孙书锋
  • 1篇谭景和
  • 1篇潘登科
  • 1篇陆泉枝
  • 1篇吴常信
  • 1篇李宁

传媒

  • 2篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇广西农业生物...
  • 1篇第十次全国畜...

年份

  • 1篇2007
  • 3篇2006
共 3 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
猪Myostatin同源重组载体的构建被引量：1
2006年
根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了猪Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1.4 kb、4.4 kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%;对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建了猪的Myostatin表达Neor、Tk基因的双标记转基因载体。
潘求真陆泉枝孙书锋王海连正兴杨宁谭景和吴常信
关键词：TK基因聚合酶链式反应
绿色荧光蛋白基因转染猪骨髓基质干细胞
目的采用电穿孔法将带有GFP的质粒(pGFP-NEO)转染MSCs,经过G418筛选阳性克隆,用荧光显微镜检测GFP的表达情况。结果以电压150V,20ms一次脉冲进行转染。转染 GFP质粒的MSCs能在含有6418的培...
潘求真孙书锋韩红兵张宝路李海田亮李佳徐曙光连正兴杨宁
关键词：绿色荧光蛋白基因转染骨髓基质干细胞
文献传递
用猪骨髓间充质干细胞为供体生产猪的转基因胚胎被引量：1
2006年
以pEGFP-N 1质粒,通过电转染的方法转染了猪骨髓间充质干细胞,经过G 418筛选,获得了阳性细胞克隆。以转染的猪骨髓间充质干细胞与体外成熟(in v itro m aturation,IVM)的卵母细胞构建克隆胚。结果表明:通过体细胞核移植技术,猪骨髓间充质干细胞可以有效地生产转基因囊胚,并且绿色荧光蛋白可用于转基因胚胎的筛选。
潘求真潘登科王海张宝路李海韩红兵李佳连正兴杨宁李宁
关键词：转基因克隆绿色荧光蛋白骨髓间充质
绿色荧光蛋白表达载体的改造和表达被引量：6
2007年
为获得增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的真核表达载体pEG-FP-N1-MSC,并观察其在猪成纤维细胞中的表达情况,用NheⅠ和AgeⅠ消除pEGFP-N1质粒上的多克隆位点(MSC),然后补平连接,获得增强型绿色荧光蛋白编码基因的真核表达载体pEGFP-N1-MSC质粒,将pEGFP-N1-MSC质粒转化DH5α感受态细胞,于Kanr+LB平板上筛选阳性克隆。重组子经NheⅠ和AgeⅠ双酶切鉴定,将该载体转染猪成纤维细胞,24 h后观察EGFP表达情况,48 h后添加G418进行筛选。结果表明:改造的pEGFP-N1-MSC真核表达载体,成功转染猪成纤维细胞,在倒置荧光显微镜下呈现绿色光,获得可产生绿色荧光的pEGFP-N1-MSC载体,为构建猪双正选择同源重组载体奠定了基础。
潘求真徐曙光李佳张宝路田亮李海韩红兵连正兴杨宁
关键词：绿色荧光蛋白
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