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Effects of C-reactive protein on the expression of OX40 ligand in mouse aorta endothelial cells被引量：1: 2009年; Objective： To investigate the expression of OX40 ligand（OX40L） on C-reactive protein（CRP）-triggered mouse aorta endothelial cells （MAECs） in vitro. Methods： MAECs from aorta were isolated by digestion with collagenase type II. The cell growth was confirmed by morphological characteristics and the immunological marker, factor Ⅷ（or Willebrand factor, vWF）. The expression of OX40L by MAECs was detected by RT-PCR and western blot after incubating with 100μg/ml CRP for 48 hours. Results： Twenty-day cultures of MAECs formed confluent monolayer of a cobblestone pattern. RT-PCR and western blot assay showed that the level of OX40L expression in MAECs receiving CRP treatment was higher than control. Conclusion： A reliable method is described to isolate and propagate MAECs. CRP upregulates OX40L expression in MAECs.; Fei Wang Shushu Zhu Xuefu Han Jindan Xu Jinnan Zhang Di Yang; 关键词：OX40L

C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响被引量：2: 2011年; 目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。将内皮细胞用1μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响。结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高。结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用。; 刘强张丹丹徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛; 关键词：C反应蛋白内皮细胞动脉粥样硬化

颈动脉斑块破裂动物模型的建立: 2014年; 目的建立颈动脉斑块破裂的动物模型。方法 36只载脂蛋白E(Apo E)缺陷小鼠,随机分为未结扎组、单纯结扎组、结扎套管2天组、结扎套管4天组、结扎套管7天组和假手术组各6只,除未结扎组外各组结扎其左侧颈总动脉并饲以普通饮食。假手术组小鼠套管后即刻取下套管。结扎套管2天组、结扎套管4天组、结扎套管7天组于结扎处近段放置套管,分别于套管后第2、4和7天剪取结扎侧颈总动脉。血管切片,行HE、Masson胶原染色,计算病变血管管腔狭窄率、管壁厚度、单位中膜面积细胞数和单位内膜面积胶原含量;应用免疫组化法检测平滑肌α肌动蛋白(αSMC-actin)、血管假性血友病因子(v WF)表达。结果单纯结扎组结扎动脉管腔内膜增生明显,管腔狭窄,斑块内散在分布大量泡沫细胞,斑块表面可看到明显纤维帽形成。未结扎组、单纯结扎组管腔狭窄率分别为0.10%±0.018%、0.88%±0.033%,中膜厚度分别为(0.44±0.02)、(0.70±0.04)mm,单位中膜面积细胞数分别为(16.5±1.03)、(12.7±1.07)个,两组比较,P均<0.05。单纯结扎组、结扎套管2天组、结扎套管4天组、结扎套管7天组和假手术组斑块破裂分别为0、5、4、6、0只;单位斑块面积内胶原含量分别为0.47±0.04、0.09±0.03、0.12±0.04、0.16±0.08、0.41±0.07,单纯结扎组与套管各组比较,P均<0.05。单纯结扎组动脉斑块内部和纤维帽处均可检测到αSMC-actin表达,但纤维帽处表达更明显;斑块破裂后局部仍有表达,但纤维帽处表达减弱。v WF在部分斑块内表达,在斑块破裂处无表达。结论通过结扎并套管成功制作了小鼠颈动脉斑块破裂模型。; 韩学府王丽丽王健陈茜杨笛; 关键词：动脉粥样硬化斑块破裂免疫组织化学载脂蛋白E

OX40/OX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究被引量：3: 2012年; 目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高。分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降。结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一。; 张丹丹夏文龙刘强张大伟徐晋妉吴恒芳陈相健杨笛; 关键词：OX40配体基质金属蛋白酶-9 内皮细胞

OX40L在C57BL/6与BALB/c小鼠组织的差异性表达及分析: 2010年; 背景:有研究发现C57BL/6小鼠对动脉粥样硬化易感,而BALB/c小鼠却对动脉粥样硬化不易感。OX40L的表达情况与动脉粥样硬化的狭窄程度和心肌梗死的严重度相关,其在两种品系小鼠中是否存在表达差异?目的:分析OX40L在BALB/c和C57BL/6小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织的表达差异。方法:取C57BL/6和BALB/c小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织,以Trizol提取总RNA,RIPABuffer提取组织总蛋白。采用RT-PCR和WesternBlot方法检测两种品系小鼠心脏、脑、肾脏、脾脏和骨骼肌的OX40LmRNA和蛋白的表达。OX40L在两种品系小鼠不同器官间的表达差异。结果与结论:RT-PCR结果显示,C57BL/6小鼠心脏OX40LmRNA表达显著高于BALB/c小鼠(P<0.05),脾脏OX40LmRNA表达明显低于BALB/c小鼠(P<0.05),两种品系小鼠大脑、肾脏及骨骼肌OX40LmRNA表达差异无显著性意义;WesternBlot结果显示,两种品系小鼠OX40L的蛋白表达均在心脏最高;C57BL/6小鼠心、脑及肾OX40L蛋白表达均显著高于BALB/c小鼠(P<0.05),两种品系小鼠骨骼肌和脾脏OX40L蛋白表达差异无显著性意义。两个品系小鼠OX40LmRNA的表达水平与蛋白表达水平不完全一致。C57BL/6小鼠心脏中OX40LmRNA转录水平较BALB/c高,但在脾脏中表达量较后者低;C57BL/6小鼠心脏、大脑和肾脏OX40L蛋白水平均较BALB/c小鼠高;两种品系小鼠之间的表达差异提示OX40L可能与C57BL/6小鼠易感动脉粥样硬化有关。; 韩学府王飞朱舒舒徐晋妉张寄南杨笛; 关键词：OX40L MRNA 蛋白表达

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国家自然科学基金(30770894)

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