安徽省自然科学基金(01043716)
- 作品数：26 被引量：117H指数：7
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- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学第一附属医院蚌埠医学院更多>>
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- 原核细胞阳性克隆的筛选
- 2003年
- 汪渊陈厚早储兵张素梅卜丽佳王杰王雪朱华庆周青桂淑玉
- 关键词：克隆遗传学基因重组
- 骨桥蛋白与肿瘤发生及转移的关系研究进展被引量：3
- 2004年
- 骨桥蛋白 (OPN)是一种具有分泌性、粘附性、糖基化磷酸化蛋白 ,包含精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 (RGD)的细胞结合序列 ,在许多细胞外基质蛋白能发现此序列。自 1979以来OPN被认为是恶性转化的分泌性蛋白 ,与许多肿瘤的发生、转移、预后相关。对OPN结构和功能以及参与细胞信号转导机制的进一步认识 ,为肿瘤的诊断和治疗提供了新思路。
- 任传利桂淑玉汪渊
- 关键词：骨形态发生蛋白质类肿瘤转移信号传递
- N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响被引量：11
- 2008年
- 目的研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物[N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株体外增殖及凋亡的影响。方法3种浓度的ATRA衍生物和ATRA(1、5、10mg/L)分别处理A549细胞1、2、3、7d,应用MTT法和流式细胞技术分别观察该ATRA衍生物对A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;Western blot分析凋亡相关蛋白表达的变化。结果ATRA衍生物处理组A549细胞增殖抑制率随药物浓度的增加而提高,分别为9.1%、17.8%、47.0%;抑制率亦随药物作用时间的延长而提高,分别为18.1%、20.6%、40.4%、83.4%。10mg/LATRA衍生物可明显诱导A549细胞凋亡,凋亡率达到40.9%,G0～G1期细胞比例明显下降,细胞凋亡峰较对照组明显提前,凋亡过程伴随Bcl-2表达下降,而Bax、Bak、酶原形式的Caspase-3、p53、NF-κB的表达无明显变化。结论ATRA衍生物对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;并诱导细胞凋亡,可能与Bcl-2蛋白的表达下调有关。
- 姚梦醒桂淑玉何苇李庆周青陈飞虎汪渊
- 关键词：腺癌细胞系
- 感受态细胞的制备被引量：10
- 2003年
- 熊江霞陈厚早朱华庆王雪张素梅储兵卜丽佳周青桂淑玉汪渊
- 关键词：感受态细胞生物转化基因重组
- 多聚酶链反应-单链构象多态性分析基因点突变
- 2004年
- 汪渊朱光能左莉储兵卜丽佳周青桂淑玉
- 关键词：多聚酶链反应单链构象多态性分析基因点突变P53突变
- 人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨人内皮细胞特异性分子 1(hESM 1)表达载体的构建、体外表达及表达产物的初步纯化。方法 从人脐静脉内皮细胞中提取总RNA ,用反转录 PCR扩增出hESM 1的cDNA。插入质粒 pET 2 8b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL 2 1,经IPTG诱导表达 ,表达产物用电洗脱的方法初步纯化。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为含hESM 1的重组质粒 ,经SDS PAGE分析证实获得产物为分子量 2 3 80 8u的融合蛋白 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 4%。结论 成功构建了重组hESM 1表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为进一步研究及临床应用奠定了良好基础。
- 张素梅王雪胡若磊朱华庆熊江霞周青桂淑玉汪渊
- 关键词：聚合酶链反应体外表达
- 人骨桥蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 构建人骨桥蛋白 (hOPN)表达载体 ,体外表达及表达产物的纯化。方法 培养人脐静脉内皮细胞 ,提取总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,以此cDNA为模板经PCR合成插入片段 ,连接至载体 pGEX 6P 1,转化到XL1 blue中进行诱导表达。表达产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳后 ,切下目的蛋白进行洗脱纯化。结果 构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA测序 ,证明所构建的质粒是 pGEX 6P OPN。SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳发现该重组质粒经IPTG诱导后表达一种新的蛋白 (表达量为 16 7% ) ,这种蛋白不存在于诱导后的pGEX 6P 1表达产物中 ,纯化后蛋白纯度为 99%。结论 成功构建了hOPN表达载体 ,并进行体外表达。
- 王雪桂淑玉张素梅胡若磊朱华庆熊江霞周青汪渊
- 关键词：大肠杆菌聚合酶链反应基因表达骨桥蛋白
- 重组质粒在原核细胞中的转化被引量：4
- 2003年
- 汪渊王雪张素梅陈厚早朱华庆熊江霞储兵卜丽佳周青桂淑玉
- 关键词：重组质粒原核细胞生物转化转化率基因重组技术
- 真核细胞基因组DNA的制备被引量：3
- 2004年
- 汪渊胡若磊朱光能张素梅左莉卜丽佳朱华庆周青桂淑玉
- 关键词：真核细胞基因组DNA提纯
- 骨桥蛋白和P21在原发性肝癌中的表达及其临床意义被引量：7
- 2005年
- 目的 探讨骨桥蛋白(OPN)和P2 1在原发性肝癌组织中的表达及它们在肝癌转移中的作用。方法 采用免疫组化S P法检测69例原发性肝癌组织中OPN和P2 1的表达情况。结果 ①OPN和P2 1的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞浆;OPN、P2 1在69例肝癌组织中阳性表达率分别为72 .5 % (5 0 / 69)和62 .3 % (4 3 / 69)。②在发生转移的肝癌组织中OPN和P2 1阳性表达率分别为84.2 % (3 2 / 3 8)和76.3 % (2 9/ 3 8) ,高于无转移的肝癌组织中OPN(5 8.1% ,18/ 3 1)和P2 1(4 5 .2 % ,14 / 3 1)阳性表达率,差异具有显著性,P <0 .0 5。③两者均阳性表达的3 5例肝癌中有2 4例(74.3 % )已发生转移,与两者均阴性表达的11例肝癌中仅有1例(9.1% )发生转移比较差异有显著性,P <0 .0 5 ,提示OPN和P2 1均阳性表达与肿瘤转移的发生密切相关。④OPN和P2 1的表达与肿瘤的大小、AFP水平、有无HBV感染、肿瘤分化、性别、年龄等因素无关,但与肿瘤侵袭转移的发生有关,P <0 .0 5。⑤OPN和P2 1的表达呈显著正相关(r =0 .2 5 7,P <0 .0 5 )。结论 OPN和P2 1的表达与肝癌侵袭转移的发生有密切关系,两者均阳性表达时对预测肝癌已发生转移具有指导意义。
- 魏少峰郜玉峰李旭桂淑玉汪渊江晓平李家斌
- 关键词：P21骨桥蛋白原发性肝癌免疫组化S-P法肝癌侵袭转移阴性表达
