上海市科学技术委员会资助项目(11ZR1426800)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：任天瑞汪小芬张博周艳芬曹振龙更多>>
- 相关机构：上海师范大学河北大学中国科学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程理学生物学农业科学更多>>
- 鲫鱼γ-氨基丁酸受体β_3亚基基因克隆及其分析
- 2014年
- γ-氨基丁酸受体(GABAR)主要存在于脊椎动物和非脊椎动物的中枢神经系统(CNS),是氟虫腈、阿维菌素、硫丹和林丹等杀虫剂的作用靶标。为了阐明GABAR拮抗剂类农药影响鱼类安全性的分子作用机理,并研究其与农药分子的亲和作用,运用生物信息学方法,在NCBI基因组数据库中找到已经公布的同源的GABAARβ3亚基基因序列,通过多序列同源比对寻找高度保守区,再根据高度保守区设计特异性引物,通过RT PCR和RACE PCR技术,成功地克隆了鲫鱼GABAR A型β3亚基基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:KC964110),该基因长2 767 bp,开放阅读框(ORF)为1 506 bp,编码502个氨基酸,与已知的其他物种β3亚基具有高度的保守性。应用qRT-PCR扩增,检测到该基因在鲫鱼不同组织器官的差异性表达。
- 秦菠张博周艳芬汪小芬曹振龙任天瑞王振山
- 关键词：鲫鱼Γ-氨基丁酸基因克隆
- 鲫鱼GABAARβ_3亚基生物信息学分析与同源建模被引量：1
- 2014年
- A型γ-氨基丁酸（aminobutyric acid，GABA）是一类配体门控离子通道型受体，亦为脊椎动物和非脊椎动物的中枢神经系统内最主要的抑制性神经递质GABA的受体，其离子通道上存在氟虫腈等杀虫剂的作用靶点，是医药和农药工作者研究的重点。通过RACE—PCR技术成功获取新基因鲫鱼GABAARβ3的全长（GenBank登录号：KC964110）。序列分析显示该基因核苷酸序列共2767bp，含有1个由502个氨基酸残基组成的开放阅读框，编码蛋白分子量约为56KD。报道了该基因的生物信息学分析和三维结构模拟及其与氟虫腈作用情况，BLAST结果表明，氨基酸序列与其他已知GABAAR岛基因家族成员间序列相似性介于76％～89％之间，并与其他亚族蛋白基因存在很高的同源性。以线虫体内对阿维菌素敏感的谷氨酸门控氯离子通道受体蛋白的a亚基（PDBID：3RHW）作为模板，用DS（Discovery Studio）模拟鲫鱼GABAA鼠亚基的同源五聚体结构，优化结构模型，与农药配体分子做分子对接，计算作用模式和结合能力。研究鱼类GABAAR亚基与农药分子的作用。
- 秦菠张博周艳芬汪小芬曹振龙任天瑞王振山
- 关键词：鲫鱼污染克隆
- 氟虫腈与斑马鱼GABAA及果蝇RDL受体作用的差异性研究被引量：2
- 2014年
- 采用同源建模的方法构建了斑马鱼γ-氨基丁酸A型（GABAA）受体和果蝇RDL（resistance to dieldrin）受体跨膜区的三维结构，研究了氟虫腈在两个受体中作用位点的差异；采用分子对接和分子动力学方法，探讨了氟虫腈与斑马鱼GABAA受体和果蝇RDL受体的结合模式，并比较了氟虫腈与两个受体作用的差异性。结果表明：斑马鱼 GABAA受体和氟虫腈作用位点的结构与果蝇RDL受体和氟虫腈作用位点的结构存在一定的差异，果蝇 RDL 受体中的 Ala301对应斑马鱼GABAA受体α1亚基中的Val284和γ2亚基中的Ser306，氨基酸构象的差异较大；氟虫腈与斑马鱼GABAA受体的结合位点靠近胞内区一端，而与果蝇RDL受体的结合位点则位于受体第二跨膜区的Ala301～Leu308区域内。复合物分子动力学模拟结果表明，在模拟过程中，两个受体与氟虫腈复合物体系的势能可很快达到平衡状态。斑马鱼GABAA受体与氟虫腈之间形成4个氢键，其中概率大于60％的氢键有2个；而尽管果蝇RDL受体与氟虫腈形成了6个氢键，但只有1个氢键的概率大于50％，其复合物结合的稳定性比前者低。
- 汪小芬任天瑞姚建华
- 关键词：氟虫腈
- 丙烯酸系高分子分散剂的合成及在水分散粒剂中的应用被引量：1
- 2014年
- 以丙烯酸、马来酸酐和甲基丙烯酸酯(甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯和甲基丙烯酸正丁酯)为单体合成了三元共聚物分散剂,经红外与核磁确定其结构,用表面张力法测定临界胶束浓度(cmc)。以烯酰吗啉80%水分散粒剂(Water dispersible granule,WG)为应用实例,研究了不同结构的分散剂添加量对烯酰吗啉80%水分散粒剂悬浮率的影响,并通过测定崩解分散后悬浮液的Zeta电势和SEM图探究了不同单体类型分散剂性能差异的原因。随着分散剂用量增加,悬浮液的悬浮率和Zeta数值增大,悬浮体系中原药粒子粒径越小,当分散剂用量为4%时,悬浮率即可达到95.1%。
- 卢翼君任天瑞
- 关键词：水分散粒剂悬浮率
- 氟虫腈为配基的亲和介质制备及鱼类GABA受体纯化
- 2014年
- 以琼脂糖凝胶(Sepharose)CL-6B为载体,衍生化的氟虫腈为亲和配基,制备亲和层析介质,对其进行FT-IR和XPS表征。用制备的亲和层析介质分离鱼类脑组织中的GABA(γ-氨基丁酸)受体,研究分离蛋白质的效率。结果表明,成功将氟虫腈作为配体偶联到亲和介质上,偶联量为36.68μmol/g胶;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示两条蛋白质条带,其相对分子质量约为44 kD和55 kD。
- 于广金张博杨姗张元任天瑞
- 关键词：GABA受体氟虫腈
