黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11531084)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：林平于靖于晓光赵雪飞裴天仙更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学天津市胸科医院天津药物研究院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 程序性细胞死亡蛋白5在米非司酮诱导前列腺癌细胞凋亡中的协同作用被引量：4
- 2010年
- 目的:观察程序性细胞死亡蛋白5(programmed cell death 5,PDCD5)在米非司酮(mifepristone,MIF)诱导的前列腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测不同浓度(5、10、20、50、100μmol/L)的MIF作用前列腺癌PC-3M细胞24～96 h后的吸光度(D)值,找到最佳作用时间及浓度。将真核表达载体PCI-neo-PDCD5用脂质体介导的方法转染入PC-3M细胞后,采用细胞免疫荧光法检测PDCD5蛋白的表达水平。在转染PDCD5基因的细胞中加入最佳作用浓度的MIF,继续培养24、48 h后,采用TUNEL和吖啶橙(acrine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)法检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3的表达变化。结果:MTT检测结果显示,与对照组相比,5、10μmol/L MIF组的D值没有显著变化(P>0.05),20、50和100μmol/L MIF组的D值显著降低(P<0.05),说明MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性。PDCD5基因真核表达载体成功转染入PC-3M细胞,并得到高表达。TUNEL和AO/EB检测结果显示,与对照组及单独应用MIF组相比,转染PDCD5基因并加入MIF后的细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Western印迹结果显示,caspase-3蛋白在PDCD5与MIF联合作用时的表达明显增加(P<0.01)。结论:外源性PDCD5在MIF诱导的前列腺癌细胞凋亡中有明显的正协同作用,推测其有望成为前列腺癌临床治疗的一个辅助药物。
- 于靖邹海峰裴天仙林平王爽姜雪于晓光
- 关键词：前列腺肿瘤细胞凋亡凋亡调节蛋白质类米非司酮
- TFAR19蛋白协同米非司酮对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的初步探讨TFARl9协同米非司酮（MIF）对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响。方法构建TFARl9真核表达载体，用脂质体介导的方法转染PC-3M细胞。MTT法检测5、10、20、50和100μmol·L^-1 MIF作用于前列腺癌PC-3M细胞24～96h的吸光度（A）值。在转染TFARl9的细胞中加入20mol·L^-1 MIF培养24、48h，MTT比色法检测细胞增殖，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率，透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变。结果构建了PCI-neo-TFARl9真核表达载体并在转染的PC-3M细胞中得到了瞬时表达。MTT实验表明，与对照组相比，5、10μmol·L^-1 MIF组的A值差异无统计学意义（P〉0．05），20、50和100μmol·L^-1MIF组的A值差异有统计学意义（P〈0．01），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间、剂量依赖性；转染PCI-neo-TFARl9并加入20mol·L^-1 MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞生长明显受到抑制（P〈0．01），细胞凋亡率明显增加（P〈0．01），透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征（细胞体积缩小，核皱缩、碎裂，染色质呈块状边集等）。结论TFARl9蛋白能够协同米非司酮促进前列腺癌PC-3M细胞凋亡，有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。
- 于靖赵雪飞王继洲姜颖杜颜丹林平王淑娟于晓光
- 关键词：前列腺癌米非司酮细胞凋亡PC-3M细胞
- PDCD5蛋白联合米非司酮对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察PDCD5蛋白协同米非司酮（MIF）对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响。方法MTT法分别检测10、20、50和100μmol/L MIF作用于PC-3M细胞24-96 h的吸光度（A）值。扩增包含PDCD5序列的真核表达载体PCI-neo-PDCD5，用脂质体介导的方法转染前列腺癌PC-3M细胞。在转染PDCD5的细胞中分别加入10、20μmol/L MIF，继续培养24 h，MTT比色法检测细胞增殖，RT-PCR方法检测细胞增殖相关基因CyclinD1、Ki-67的表达。结果MTT实验表明，与对照组相比，10μmol/L MIF组的A值差异无统计学意义（P〈0.05），20、50和100μmol/L MIF组的A值显著降低（P〈0.05），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈剂量依赖性；PDCD5真核表达载体成功转染PC-3M细胞并得到了瞬时表达，转染PCI-neo-PDCD5并加入MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞增殖受到明显抑制（P〈0.05），增殖相关基因CyclinD1、Ki-67表达降低。结论PDCD5蛋白能够协同米非司酮抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖，可能是通过调节某些增殖相关基因的表达来实现的，并有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。
- 杜彦丹于靖赵雪飞林平刘紫君于晓光
- 关键词：前列腺癌PC-3M细胞PDCD5米非司酮细胞增殖
