广东省自然科学基金(9451026003003833)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 基因突变对RUNX2蛋白亚细胞定位的影响
- 2011年
- 目的拟建立包含基因突变位点的真核表达载体,通过细胞转染了解RUNX2突变体亚细胞定位的改变。方法从患者全血中提取总RNA,通过反转录酶-聚合酶链反应获得目的片段,定向克隆获得包含基因突变位点及野生型位点的pEGFP-C1-RUNX2真核表达载体,通过瞬时转染NIH3T3成纤维细胞,显微镜下观察突变蛋白的亚细胞定位变化。结果成功构建包含突变位点及野生位点的真核表达载体pEGFP-C1-RUNX2,转染细胞24 h后,在荧光显微镜下观察转染细胞内的荧光蛋白表达情况,转染野生型RUNX2基因的细胞仅在胞核内表达绿色荧光,胞浆内无绿色荧光表达;分别引入突变位点c.674 G>A及c.673 C>T的表达载体转染的两组细胞,在胞浆胞核内均表达绿色荧光。结论不同的突变位点可以造成RUNX2蛋白亚细胞定位的改变,蛋白在核内累计表达量不足可能是造成单倍体不足的原因之一。
- 梁国健谢宝仪轩东英
- 关键词：突变亚细胞定位
- 颅骨锁骨发育不良综合征患者RUNX2基因突变检测被引量：1
- 2011年
- 目的鉴定4个颅骨锁骨发育不良(cleidocranial dysplasia,CCD)家系RUNX2基因突变点。方法采用先证者查证法,对各家系成员进行全身健康状况及口腔专科检查,明确CCD诊断;抽取先证者及其父母外周静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增RUNX2基因并测序,BLAST同源分析。结果在4个CCD家系患者中均检测到RUNX2不同的突变位点,家系中健康成员同一位点均为野生型序列,进一步证实RUNX2基因是CCD患者的致病基因。其中家系4的c.475G>C错义突变是此次检测到的新突变位点;家系2的c.673C>T以及家系3的c.1171C>G突变位点在中国CCD患者中首次检出;家系1的c.674G>A,R225Q是国外文献报道突变率最高的位点。结论本研究拓展了国内外CCD基因层次的研究领域,证实RUNX2基因的单倍体不足是CCD的致病原因。
- 梁国健谢宝仪轩东英
- 关键词：突变
