国家重点基础研究发展计划(1999054204)
- 作品数：11 被引量：68H指数：5
- 相关作者：付小兵叶剑彭锡嘉袁容娣刘少章更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院解放军总医院第一附属医院第二军医大学更多>>
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- 少突胶质细胞与视神经再生
- 2002年
- 近年来的研究表明 ,中枢神经系统损伤后再生失败与少突胶质细胞有关。少突胶质细胞产生的蛋白NI 35 / 2 5 0对中枢神经再生具有强烈的抑制作用。其单克隆抗体IN 1可使这种抑制作用消失。 2 0 0 0年编码这种抑制性蛋白的基因 Nogo被发现 ,这为我们研究视神经损伤修复带来了新的希望。本文就这一方面的研究成果作一综述。
- 彭锡嘉刘少章叶剑
- 关键词：少突胶质细胞视神经
- 睫状神经营养因子对大鼠视网膜神经节细胞bcl-2表达的影响
- 2007年
- 目的 观察睫状神经营养因子（CNTF）对培养的大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）bcl-2表达的影响。方法 取出生后2～3d Wistar大鼠视网膜组织行RGCs培养，Thy-1单克隆抗体免疫细胞化学鉴定RGCs。实验分2组，对照组单纯加入DMEM，CNTF组加入浓度为20ng/ml的CNTF。RGCs培养3d后CNTF组和对照组分别行Westernblot检测RGCs内bcl-2蛋白的表达。结果 Thy-1单克隆抗体免疫细胞化学检查显示，培养3d的RGCs胞膜和轴突呈棕黄色，且90％以上为免疫阳性细胞。CNTF组RGCs内bcl-2蛋白表达高于对照组（P〈0．05）。结论 CNTF对神经节细胞的营养作用可能与bcl-2基因表达增高有关。
- 袁容娣叶剑刘少章彭锡嘉
- 关键词：视网膜神经节细胞细胞培养基因,BCL-2睫状神经营养因子
- 骨髓间充质干细胞参与皮脂腺导管构成的初步研究
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为皮肤附属器的可行性。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离、体外纯化间充质干细胞及培养扩增后,应用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记技术进行细胞标记。将已标记的细胞（1×1...
- 方利君付小兵王玉新孙同柱李建福程飚
- 文献传递
- EGF和bFGF在大鼠不同发育阶段肠道定位和表达特征的比较研究被引量：17
- 2001年
- 目的 :研究表皮细胞生长因子 (EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在胚胎、新生以及成年 3个不同发育阶段 ,大鼠肠道的表达特征及其可能的生物学意义。方法 :取胚胎、新生和成年大鼠小肠 ,经 4%多聚甲醛固定、包埋与切片后 ,用链酶卵白素免疫组织化学法研究 EGF和 b FGF两种生长因子的定位与表达特征。结果 :EGF的阳性表达可见于胚胎、新生以及成年 3个不同发育阶段大鼠小肠 ,主要位于小肠黏膜上皮细胞、固有层细胞和黏膜肌层细胞胞浆 ,其表达强度为强阳性。 b FGF在胚胎、新生与成年大鼠小肠表达的定位与EGF类似 ,但在整个发育过程中表达为弱阳性或阳性。结论 :EGF在不同发育阶段大鼠小肠呈强阳性表达 ,表明了它对肠道的发生、表型维持以及损伤后的修复十分重要。与 EGF相比 ,大鼠胚胎期、新生以及成年期b FGF低表达特征 ,表明 b FGF参与了动物不同发育阶段肠道的发育过程 ,但其作用可能较
- 付小兵孙同柱孙晓庆杨银辉顾小曼盛志勇
- 关键词：表皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子小肠
- 自体脂肪移植修复皮肤损伤的初步研究
- 目的:探讨脂肪对猪皮肤损伤的促愈作用,为临床皮肤损伤修复提供新的治疗方法。方法:6只小型香猪背部中线两侧各制备4个面积为2.5cm ×2.5cm的全层皮肤缺损创面,将创面随机分为4组,即空白对照组,脂肪治疗组,碱性成纤维...
- 方利君付小兵王玉新孙同柱程飚
- 文献传递
- 睫状神经营养因子对培养大鼠视网膜神经节细胞的影响被引量：5
- 2002年
- 目的 观察不同浓度睫状神经营养因子 (ciliary neurotrophic factor,CNTF)对培养大鼠视网膜神经节细胞 (retinal ganglion cell,RGC)生长、存活的影响。 方法 取 15只生后 2～ 3d Wistar大鼠视网膜组织进行细胞培养 ,通过 Thy- 1单克隆抗体免疫细胞化学对培养的 RGC进行鉴定。实验分对照组和10、2 0、40 ng/ ml CNTF组 ( 、 、 组 ) ,记录 RGC存活时间 ,将培养第 3、5、7天的 RGC行四甲基偶氮唑盐 (methylthio- tetrazole,MTT)法测量吸光度 (A)值 [旧称光密度 (OD) ]。 结果 Thy- 1单克隆抗体免疫组织化学检查显示培养 3d的存活细胞 90 %以上为 RGC。细胞存活期间实验组与对照组细胞均无明显突起 ,细胞体积无明显增大 ,实验组细胞存活时间比对照组长 3～ 4d。培养第 5、7d, 组 A值分别为 0 .0 75 8± 0 .0 13 9、0 .0 6 93± 0 .0 113, 组 A值分别为 0 .0 90 2± 0 .0 114、0 .0 82 5± 0 .0 12 5 , 组 A值分别为0 .0 792± 0 .0 13 3、0 .0 6 5 3± 0 .0 0 86 ,对照组 A值分别为 0 .0 6 2 0± 0 .0 0 71、0 .0 5 13± 0 .0 0 6 8。实验组与同时间对照组 A值相比差异有显著性的意义 ( 组与对照组相比 P<0 .0 1, 、 组与对照组相比 P<0 .0 5 )。 结论 一定浓度的 CNTF能促进培养大鼠 RGC的存活 ,?
- 袁容娣贺翔鸽叶剑彭锡嘉
- 关键词：视网膜神经节细胞细胞培养睫状神经营养因子CNTF免疫细胞化学
- 猪骨髓间充质干细胞的分离培养及分化潜能的鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的:建立猪骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离培养和鉴定的方法,探讨体外培养的间充质干细胞的一些生物学特点,为利用猪的实验研究提供实验基础。方法:从猪的髂嵴穿刺取骨髓,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁的成纤维样的细胞。检测细胞周期,多向诱导分化鉴定分离的细胞。结果:体外培养的原代MSCs 12～14d达到融合,传代后仍具有分化成骨的能力,细胞周期显示有80%细胞处于G_0/G_1期。结论:体外培养猪的MSCs具有分化成骨的潜能,生长稳定,传代后仍保持未分化状态,猪骨髓间充质干细胞分离培养体系的建立为基础研究和组织工程提供了一个有价值的动物模型。
- 方利君付小兵孙同柱李建福程飚王玉新
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养
- 重组人表皮生长因子在人工胃液和肠液中的稳定性被引量：11
- 2003年
- 取重组人表皮生长因子 (rh EGF)分别加入到人工胃液 (p H2 )、人工肠液 (p H6 .8)和加胃蛋白酶的人工胃液、加胰酶的人工肠液中 ,定时取样 ,采用放射免疫分析法测定不同时间内 rh EGF含量。结果发现 ,rh EGF在人工胃液和人工肠液中的含量随时间的延长而呈下降趋势 ,1h后人工胃液和人工肠液中 rh EGF浓度分别下降 4 3.4 6 %和 2 1.91% ;但在酶的存在下1h后 rh EGF浓度分别下降 89.6 2 %和 79.5 2 %。这表明 rh EGF在人工胃、肠液中均比较稳定 ,但在酶的存在下 rh
- 叶盛英王世岭高申
- 关键词：肠液人工胃液重组人表皮生长因子稳定性胃蛋白酶
- 猪骨髓间质干细胞的分离培养及分化潜能的鉴定被引量：10
- 2003年
- 目的 :建立猪骨髓间质干细胞 (MSCs)的体外分离培养和鉴定的方法 ,探讨体外培养的间充质干细胞的一些生物学特点 ,为利用猪的实验研究提供实验基础。方法 :猪的髂嵴穿刺吸取骨髓 ,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞 ,接种后形成单层贴壁的成纤维样的细胞。检测细胞周期 ,多向诱导分化鉴定分离的细胞。结果 :体外培养的原代 MSCs 12～ 14 d达到融合 ,传代后仍具有分化成骨的能力 ,细胞周期显示有 80 %的细胞处于G0 / G1期。结论 :体外培养猪的 MSCs具有分化成骨的潜能 ,生长稳定 ,传代后仍保持未分化状态 .猪骨髓间充质干细胞分离培养体系的建立为基础研究和组织工程提供了一个有价值的动物模型。
- 方利君付小兵孙同柱李建福程飚王玉新
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养
- 睫状神经营养因子对培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响被引量：3
- 2003年
- 目的 :观察睫状神经营养因子 (CNTF)对培养大鼠视网膜神经节细胞 (RGCs)凋亡的影响。方法 :15只生后 2～ 3dWistar大鼠 ,视网膜采用胰酶消化法制成细胞悬液后接种于 2 4孔培养板 (每孔 1× 10 5个细胞 ) ,取培养 72h的细胞行免疫细胞化学鉴定。将培养的细胞随机分为对照组、三种浓度CNTF组 (10ng/ml、2 0ng/ml、4 0ng/ml) ,培养 72h后采用TUNEL法和流式细胞仪检测培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡的变化。结果 :培养 72h的细胞 90 %以上为视网膜神经节细胞 ,TUNEL法检测显示培养细胞有凋亡细胞存在 ,流式细胞仪检测结果显示对照组凋亡率为 (11.95± 4 .4 0 0 ) % ,10ng/ml、2 0ng/ml、4 0ng/mlCNTF组凋亡率分别为(7.883± 2 .14 6 ) % ,(6 .4 17± 3.317) % ,(8.0 33± 2 .0 2 3) % ,CNTF组凋亡率显著降低 (P <0 .0 1～ 0 .0 5 ) ,其中2 0ng/mlCNTF组差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :CNTF能降低培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡率 ,其促视网膜神经节细胞存活可能是通过减少视网膜神经节细胞凋亡来起作用 ,而高浓度CNTF对视网膜神经节细胞有毒副作用。
- 袁容娣贺翔鸽刘少章彭锡嘉叶剑
- 关键词：睫状神经营养因子视网膜神经节细胞凋亡
