国家教育部博士点基金(200805611022) 作品数:12 被引量:101 H指数:6 相关作者: 李晓凤 吴晖 余以刚 李丽丽 朱珍 更多>> 相关机构: 华南理工大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 农业科学 化学工程 理学 更多>>
牛骨胶原蛋白肽体外清除自由基活性的研究 被引量:11 2010年 对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。 吴晖 王晨 李晓凤 余以刚关键词:胶原蛋白肽 自由基 抗氧化 非水相中固定化酶水解玉米蛋白制备多肽的研究 被引量:5 2010年 以海藻酸钠为载体制备了固定化碱性蛋白酶Alcalase,并以之为催化剂,研究了醇水体系中玉米蛋白酶促水解反应。结果表明,以海藻酸钠固定Alcalase的最佳条件为:海藻酸钠质量浓度为3%,固定化酶体积分数为2%,固定化时间4 h,CaCl2质量浓度2%。在醇水体系中固定化酶水解玉米蛋白制备多肽的最优条件为:叔丁醇-水体系(体积比1∶1),底物质量浓度5%,加酶量8%(w/v),pH值8.5,温度55℃,水解时间2.5 h,在上述条件下,水解度可达22.7%。对该固定化酶的操作稳定性考察表明,该固定化酶重复使用3批次,酶活力仍保持在50%以上。 吴晖 李丽丽 李晓凤 余以刚关键词:非水相 固定化 玉米蛋白 多肽 单酶和双酶分步酶解鸭蛋清蛋白的工艺 被引量:6 2010年 探讨了单酶及双酶分步酶解鸭蛋清蛋白制备多肽的工艺和水解效果。在7种不同来源的蛋白酶中,蛋清水解专用蛋白酶、碱性蛋白酶Alcalase AF 2.4L和胰蛋白酶均显示出了较好的酶解效果,其中以碱性蛋白酶Alcalase AF 2.4L酶解效果最佳,酶解的最佳工艺条件为:底物浓度为50g/L,反应时间4 h,加酶量8.0×104 U/g,pH值8.3、60℃,最大水解度为10.0%;而以蛋清水解专用蛋白酶和胰蛋白酶为催化剂时最大水解度分别为8.8%和7.2%。根据单酶酶解结果探讨了双酶分步酶解工艺,确定了以"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶Al-calase AF 2.4L"和"碱性蛋白酶Alcalase AF 2.4L-胰蛋白酶"的双酶组合较好,鸭蛋清蛋白在酶解8h后水解度可达到26.2%和26.6%,明显优于单酶水解效果。 吴晖 任尧 李晓凤关键词:多肽 双酶 水解度 鸭蛋清蛋白多肽体外抗氧化活性的研究 被引量:5 2011年 对经"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"和"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"双酶分步酶解鸭蛋清蛋白得到的多肽的抗氧化活性进行了研究。结果表明,当"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为21%时,多肽的抗氧化活性最高,其对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.76%、84.17%、72.73%和47.59%;当"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为15%时,多肽的抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH、O2-·的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.15%、93.84%、58%和40.51%。产物肽的分子量均分布在小于5300D的范围内。 吴晖 任尧 李晓凤关键词:活性肽 自由基 抗氧化 水解度 玉米粗肽的可控酶法制备及其体外醒酒活性的研究 被引量:8 2009年 利用不同来源的蛋白酶催化玉米蛋白粉水解制备玉米蛋白肽,比较了不同水解度下所得产物肽的体外醒酒活性。结果表明,Alcalase为催化制备玉米粗肽的较理想催化剂。以水解度为指标,对Alcalase促玉米蛋白的水解条件进行了优化,确定底物质量浓度为5 g/mL、酶体积分数为1%、水解温度为60℃,水解时间为120min。在上述条件下,反应水解度可达48.4%,且反应水解度与肽提取率之间呈正相关性。Alcalase酶解产物玉米蛋白肽具有良好的体外醒酒活性,当控制酶解反应水解度为30%(肽提取率为57.0%)时,其ADH激活率可达38.5%。 吴晖 王蓓蓓 李丽丽 李晓凤 余以刚 刘冬梅 肖性龙关键词:玉米蛋白粉 酶解 ALCALASE 蔬菜中11种有机磷农药残留的气相色谱检测及其对蔬菜基质的影响 被引量:11 2011年 建立蔬菜中11种农药多残留的气相色谱分析方法。对NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氮、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》标准的蔬菜前处理方法进行改进,并探讨蔬菜基质对检测的影响。使用DB-17毛细管柱分离,FPD检测器进行检测。结果显示:11种有机磷农药分离效果好,在黄瓜、西红柿、生姜中的3个添加水平,回收率为71.2%~117.9%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~11.2%,最低检出限为0.005~0.060mg/kg,保留时间为6.396~19.400min。在各自线性范围内线性关系好(r>0.999);使用40℃加热氮吹浓缩,可分别提高敌敌畏、甲拌磷回收率至95.00%和103.30%;在被测的13种蔬菜中,甘蓝、娃娃菜、上海青有少量杂峰影响农药检出;韭菜有大量的基质峰干扰农药检出。 吴晖 朱珍 风华亮 李晓凤关键词:有机磷农药残留 蔬菜 基质 酶解丝素蛋白制备ACE抑制肽的研究 被引量:11 2011年 本研究首次探讨利用Alcalase酶解丝素蛋白制备高活性ACE抑制肽。以水解度为主要评价指标,研究了温度、浓度、pH、加酶量以及反应时间对酶解反应的影响。分析了不同水解度下的酶解产物与ACE体外抑制活性、肽得率和蛋白回收率的关系。确定了制备ACE抑制肽的最佳酶解反应DH值为17.12%,此时所得丝素蛋白肽的肽得率为50.31%,蛋白回收率为77.37%,ACE抑制率可达74.07%。基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)分析表明,所制备的丝素蛋白肽的分子量小于2.4 kDa。 吴晖 罗美琪 唐语谦 肖性龙 袁坤 李晓凤关键词:丝素蛋白 ACE抑制活性 活性肽 非水相中固定化酶水解制备玉米肽的体外醒酒活性研究 被引量:8 2010年 对在非水相中经固定化碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的玉米蛋白肽的体外醒酒活性进行了研究。考察了在体外试验中,玉米肽对乙醇脱氢酶(ADH)及对乙醛脱氢酶(ALDH)活力的影响,分析了活性最高的酶解物的氨基酸组成和相对分子量分布及其与醒酒活性之间的关系。结果表明:当控制水解度最高为22.7%时,非水相中制备的玉米肽在体外试验中对乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)的激活作用最高,ADH激活率可达27.1%,ALDH激活率可达50.0%,此高醒酒活性肽中含有较高比例的Ala、Leu及Pro,尤其是Leu,3种氨基酸含量均高于相同水解度下水相中制备的玉米肽的氨基酸含量。在酶解产物分子量<3 548 u,其中分子量<1 295 u的肽含量最多,约占80%,以2~10肽为主。 吴晖 李丽丽 李晓凤 余以刚关键词:非水相 固定化 玉米肽 酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的研究 被引量:5 2012年 探讨利用碱性蛋白酶酶解丝素蛋白制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。以丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶的体外抑制活性和水解度(DH)为主要评价指标,通过正交试验优化了ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺条件。结果表明,在最佳工艺条件为温度60℃、反应pH8.5、底物质量浓度5%、加酶量为1200 U/g、反应时间100 min下测得丝素肽对ɑ-葡萄糖苷酶具有较高抑制率,为44.90%,此时DH为16.80%。其抑制活性与浓度有较大的依赖关系,而作用时间控制在40 min即可。此外,通过对丝素蛋白肽蔗糖和葡萄糖含量的检测,结果表明,尽管丝素肽中含有微量的葡萄糖,但抑制干扰作用甚微。 吴晖 罗美琪 赖富饶 李晓凤关键词:碱性蛋白酶 丝素蛋白 降血糖 Tween 80诱导下米曲霉3.5232产胞内脂肪酶的研究 被引量:2 2012年 米曲霉3.5232在Tween 80诱导下,相比于葡萄糖作为碳源的培养条件,米曲霉在细胞壁、细胞膜及细胞质中均可以诱导产生分子质量为27 kDa的脂肪酶,而在细胞质中又有分子质量为36 kDa的脂肪酶表达。利用硫酸铵沉淀,DEAE Sepahrose Fast Flow离子色谱交换及Sephadex G-75凝胶色谱的分离方法,从米曲霉细胞质中分离纯化了分子质量为36 kDa的脂肪酶。最终纯化倍数为42.45,产率为0.12%。 刘洪伟 许喜林 李晓凤关键词:脂肪酶 分离纯化