国家自然科学基金(81300233)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：徐志云谈梦伟龚德军袁扬韩林更多>>
- 相关机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向人BRG1基因的慢病毒载体构建及效率验证被引量：1
- 2014年
- 目的:构建靶向人BRG1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并验证其沉默效率。方法:设计3个针对人BRG1基因的特异性shRNA序列(shBRG1),构建于pLKO.1慢病毒载体中,并与psPAX2和pMD2.G质粒共同转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒。将包装好的慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞(HASMC),应用实时荧光定量PCR和western blot检测BRG1 mRNA和蛋白表达水平,判断其沉默效率。结果:3种shBRG1干扰序列均成功插入慢病毒载体中且测序正确,3种慢病毒均可有效降低BRG1 mRNA表达水平(P均<0.01)。其中shBRG1-3的沉默效率最高,其感染HASMC后BRG1蛋白表达水平较对照组显著下降(P<0.01)。结论:靶向人BRG1基因的shRNA慢病毒表达载体构建成功,shBRG1-3慢病毒能够有效降低BRG1 mRNA和蛋白表达水平。
- 王树伟王杨谈梦伟袁扬龚德军韩林徐志云
- 关键词：RNA慢病毒载体主动脉平滑肌细胞
- 氨基脲缓释给药孕鼠诱导建立新生鼠胸主动脉夹层模型被引量：1
- 2013年
- 目的建立氨基脲诱导孕大鼠使其出生幼鼠形成胸主动脉夹层模型。方法分别将不同浓度[5、10、15、20、25、30、35、40mg/(kg·d)]氨基脲、生理盐水加载植入式胶囊渗透压泵,在孕大鼠妊娠期第14天时进行腹腔埋植,取妊娠期第21天的胎鼠及新生鼠的胸主动脉血管,常规H-E染色光镜下观察,统计并分析胸主动脉夹层形成情况。结果不同浓度氨基脲给药孕大鼠孕育的幼鼠在出生后均有不同程度的胸主动脉夹层出现,其中以缓释速率为每天25mg/kg氨基脲为最适给药浓度。此种浓度给药孕大鼠生产的新生鼠全部成活并且存在胸主动脉夹层现象。结论成功建立氨基脲缓释给药孕鼠诱导的新生大鼠胸主动脉夹层模型,为后续研究奠定了基础。
- 龚德军陶婧袁扬刘晓红谈梦伟张锡武陆方林韩林徐志云黄盛东
- 关键词：胸主动脉夹层动脉瘤动物模型
- 染色质重塑酶BRG1在心血管发育和疾病中的作用被引量：1
- 2014年
- 染色质重塑复合物能够对基因表达进行重新编程,从而在哺乳动物的心血管胚胎发育和出生后病理生理过程中发挥重要作用。包含BRG1的染色质重塑复合物能够促进心血管相关转录因子与基因启动子结合以调节基因转录。进一步的研究或有助于发现更加特异性的心脏疾病相关基因及发病机制。BRG1在主动脉平滑肌和心肌细胞及细胞外基质领域的研究结果,提示其在心血管疾病的发病过程中发挥重要作用。
- 王树伟徐志云
- 关键词：染色质重塑心血管疾病
- 主动脉夹层小鼠血管壁中微管相关蛋白1轻链3、Beclin1及骨桥蛋白的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨主动脉夹层小鼠血管壁中微管相关蛋白1轻链3（Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3）、Beclin1及骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）的表达及意义.方法 （1）急性主动脉夹层模型的建立：3周龄FVB小鼠随机分为β-氨基丙腈（β-aminopropionitrilemonofumarate,BAPN）联合人血管紧张素-Ⅱ（Angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ）组,单BAPN干预组和对照组,分别予以BAPN口服4周后联合Ang-Ⅱ皮下微泵48 h,单用BAPN 4周口服和正常喂养进行干预.（2） LC3、Beclin1及OPN的检测：采用RT-PCR、免疫组织化学染色法对小鼠主动脉血管壁中自噬相关蛋白LC3、Beclin1及合成型血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）标志蛋白OPN等进行定量和半定量测定.结果 （1）BAPN联合Ang-Ⅱ干预组小鼠夹层发生比例为86.7％,单BAPN组夹层发生比例低于联合组,对照组夹层发生比例为0;（2）急性主动脉夹层小鼠主动脉壁中自噬相关蛋白LC3B、Beclin1及合成型VSMC标志蛋白OPN基因和蛋白含量明显高于正常对照组（P＜0.05）,且LC3B、Beclin1及OPN蛋白表达主要定位于血管中层VSMC.结论 BAPN联合Ang-Ⅱ能够成功诱导FVB小鼠发生急性主动脉夹层,且该模型中发生了VSMC表型转化和自噬现象,两者可能具有相关性.
- 王杨龚德军袁扬刘晓红张本张锡武闫岩谈梦伟徐志云
- 关键词：主动脉夹层主动脉BECLIN1骨桥蛋白
- 人主动脉夹层组织Myc associated factor X的表达及其生物学功能
- 2015年
- 目的观察人主动脉夹层组织中Myc associated factor X(MAX)的表达情况,并探讨其相关生物学功能。方法采用荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹检测MAX在15例主动脉夹层组织中的表达情况。通过腺病毒载体转染人主动脉平滑肌细胞使其过表达MAX,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)、流式细胞仪等技术明确过表达MAX对主动脉平滑肌细胞增殖、凋亡的影响。结果夹层主动脉组织中MAX的mRNA和蛋白表达水平均高于正常主动脉组织。过表达MAX可以抑制主动脉平滑肌细胞增殖,并促进其凋亡(P<0.05)。结论 MAX可能通过调控主动脉平滑肌细胞增殖、凋亡诱导其丢失,进而参与主动脉夹层的发生、发展。
- 谈梦伟廖威麟唐昊陆方林韩林徐志云
- 关键词：主动脉瘤夹层动脉瘤
