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国家自然科学基金(30671441)

作品数:9 被引量:73H指数:6
相关作者:韩振海王忆孔瑾李天忠刘丽丽更多>>
相关机构:中国农业大学中国农业科学院特产研究所学研究院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 6篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇小金海棠
  • 3篇海棠
  • 2篇影响因素
  • 2篇农杆菌
  • 2篇苹果
  • 2篇基因
  • 2篇AFLP
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇性别
  • 1篇性别相关
  • 1篇芽变
  • 1篇叶片
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇山定子
  • 1篇山葡萄
  • 1篇条纹
  • 1篇农杆菌介导
  • 1篇葡萄
  • 1篇克隆

机构

  • 6篇中国农业大学
  • 1篇中国农业科学...
  • 1篇学研究院

作者

  • 6篇韩振海
  • 5篇王忆
  • 4篇孔瑾
  • 4篇李天忠
  • 1篇唐美玲
  • 1篇刘丽丽
  • 1篇沈育杰
  • 1篇戚金亮
  • 1篇马志梅
  • 1篇孔谨
  • 1篇于艳丽

传媒

  • 3篇园艺学报
  • 2篇核农学报
  • 1篇中国农业大学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2009
  • 5篇2008
  • 1篇2007
9 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
发根农杆菌介导转化小金海棠的影响因素被引量:7
2008年
为了研究发根农杆菌介导的小金海棠的遗传转化体系,采用农杆菌侵染的方法,对影响Ri质粒诱导小金海棠产生发状根的各种因素进行了研究,结果发现,Ri质粒转化小金海棠形成发状根的效率,受发根农杆菌种类、浓度、生理状态及小金海棠外植体的种类、外植体在菌液中的侵染时间、共培养时间、基本培养基等多种因素的影响,加入20mg/L AS对转化效率影响不大。采用稀释5倍的处于对数生长期的8196菌株,感染小金海棠无菌苗幼嫩叶片5-10min,在MS培养基上共培养2d后转入含卡那霉素10mg/L、头孢霉素250mg/L的1/4MS诱导培养基上培养一个月,发根诱导效率最高可达93.3%.随机选择50条诱导的发根进行GUS染色,结果发现有96%发根GUS染色呈阳性。对48条GUS阳性的发根进行PCR检测,其阳性率为100%。高效的发根诱导体系为发根的进一步再生及转入外源基因奠定了基础。
于艳丽王忆韩振海李天忠孔瑾许雪峰
关键词:小金海棠发根农杆菌RI质粒发状根
山葡萄性别相关AFLP标记筛选及SCAR标记转化被引量:24
2008年
通过AFLP分子标记方法,应用64对引物组合EcoRⅠ-NNN/MseⅠ-NNN对山葡萄雌花、雄花和两性花植株基因池进行筛选,引物E-AGC/M-CTG在雄花和两性花植株基因池DNA中扩增出一条分子量为283bp的特异性条带;经组池个体和其它品系验证,该特异性条带能在雄株和完全植株中稳定出现。将该特异性条带回收、克隆、测序,设计SCAR标记引物,对已知性别的85份山葡萄种质进行盲测,准确率达到97·6%,表明标记转化成功。由于该SCAR标记在绝大多数山葡萄栽培品种和有育种价值的种质资源中得到验证,可利用该SCAR标记对山葡萄杂交后代在苗期进行性别鉴定,提高育种效率。
唐美玲孔瑾许雪峰沈育杰王忆李天忠韩振海
关键词:山葡萄性别AFLPSCAR分子标记
An MYB Transcription Factor from Malus xiaojinensis Has a Potential Role in Iron Nutrition被引量:7
2008年
Regulation of iron uptake and use is critical for plant survival and growth. We isolated an MYB gene from Malus xiaojinensis named MxMYB1, which is induced under Fe-deficient conditions. Expression of MxMYB1 was upregulated by Fe starvation in the roots but not in leaves, suggesting that MxMYB1 might play a role in iron nutrition in roots. Transgenic Arabidopsis plants expressing MxMYB1 exhibited lower iron content as compared with wild type plants under both Fe-normal (40 μM) and Fe-deficient conditions (Fe omitted and Ferrozine 300 μM). However, the contents of Cu, Zn and Mn were not changed in these transgenic plants. Gene chip and real-time polymerase chain reaction analyses indicated that the expression of two Fe-related genes encoding an iron transporter AtlRT1 and an iron storage protein ferritin AtFER1 might be negatively regulated by MxMYB1 as the expression levels of these genes were lower in MxMYB1 expressing transgenic Arabidopsis plants as compared with wild type plants under both Fe-normal and Fe-deficient conditions. These results suggest that MxMYB1 may function as a negative regulator of iron uptake and storage in plants.
Jie Shen Xuefeng Xu Tianzhong Li Dongmei Cao ZhenhaiHan
关键词:FE
苹果MxIrt1基因的克隆与原核表达被引量:6
2007年
根据植物IRT(Iron Regulated Transporter)家族的功能保守区设计引物,通过RACE法从缺铁胁迫处理的小金海棠根系cDNA文库中克隆得到了Fe2+转运蛋白基因cDNA全长,将其命名为MxIrt1(Malus xiaojinensis Iron regulated transporter 1)。将MxIrt1 cDNA片段与pET30a构建原核表达载体pEIrt,转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE电泳检测结果表明,以30℃、0.5mmol·L-1 IPTG诱导该基因表达效果最好,诱导产物为一个40kD的蛋白。为进一步纯化和鉴定目的蛋白提供了试验基础。
王忆戚金亮许雪峰李天忠孔瑾韩振海
关键词:苹果小金海棠基因克隆原核表达
小金海棠类黄色条纹蛋白基因MxYSL7的克隆与表达分析被引量:5
2008年
为了解铁高效基因型小金海棠抗缺铁的分子机制,对与铁运输相关的YSL基因进行了克隆与分析。分析苹果的EST库得到一个686 bp的YSL基因片段。经3-′RACE及后期拼接得到1 500 bp的该基因的3′端序列。其预测蛋白含10个跨膜区,与拟南芥AtYSL7基因同源性达71%,命名为MxYSL7。RT-PCR及Northern分析表明,小金海棠的该基因只在地上部分表达:在茎与成熟叶中,随着低铁处理时间的延长,该基因表达量减少;随着高铁处理时间的延长,该基因表达量增多。新叶中的表达趋势与茎和成熟叶中的趋势正好相反。讨论了MxYSL7在小金海棠体内铁营养代谢中的作用。认为MxYSL7可能参与了体内铁在木质部和韧皮部的运输过程,并参与铁在体内的解毒过程。
刘丽丽孔谨许雪峰王忆李天忠韩振海
关键词:小金海棠RT-PCR分析
根癌农杆菌介导的山定子遗传转化的研究被引量:7
2008年
以山定子叶片作为根癌农杆菌介导转化的受体,通过比较在卡那霉素筛选培养基上的抗性芽百分率,研究激素配比、乙酰丁香酮、脯氨酸、共培养时间、预培养时间、侵染时间对转化的影响。结果表明:预培养不利于山定子转化;菌液中添加乙酰丁香酮和脯氨酸对转化无明显影响;侵染10min,共培养3d抗性芽百分率最高;转化后叶片再生培养基的最佳激素配比为NAA1.0mg/L+BA2mg/L+TDZ4mg/L。抗性植株经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到山定子基因组中。
马志梅王忆许雪峰孔瑾韩振海
关键词:山定子叶片影响因素
富士苹果AFLP体系的优化及其在鉴定早熟芽变中的应用被引量:11
2009年
以‘长富2号’苹果为材料,采用优化的AFLP技术对其早熟芽变与母株进行初步研究,筛选了64对引物,其中43对引物扩增结果理想,共产生了2700条带。有4对引物在芽变与母株之间产生了7条差异片段,主要集中在350~800bp之间。研究表明早熟芽变是由于遗传物质改变造成的,同时也说明利用该体系对苹果芽变进行分析和鉴定获得成功。
李元军唐美玲于青刘美英宋来庆韩振海
关键词:苹果AFLP芽变
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