河南省杰出青年科学基金(0512001000)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：赵红宇赵华王春先张雪洋章锦才更多>>
- 相关机构：广东省口腔医院郑州大学第一附属医院郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省杰出青年科学基金广东省名医工程研究项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 丁酸对人牙周膜细胞增殖的影响
- 2006年
- 目的探讨丁酸对牙周膜细胞增殖的影响。方法用含不同浓度丁酸(0、2、4、8 mmol/L)的培养液培养人牙周膜细胞,通过MTT法测定其生长与增殖。结果人牙周膜细胞进入指数生长期后,丁酸以剂量依赖的方式抑制人牙周膜细胞的增殖。结论龈下厌氧菌代谢生成的丁酸可能通过抑制人牙周膜细胞的增殖,进而影响牙周膜的改建和更新,促进牙周袋形成和牙周组织破坏。
- 赵红宇张旭肖燕何巍赵华彭文军
- 关键词：人牙周膜细胞龈沟液丁酸
- 人釉原蛋白基因在大肠杆菌中的融合表达被引量：1
- 2008年
- 目的建立人釉原蛋白(AMG)成熟肽基因在大肠杆菌中融合表达和纯化的技术路线。方法利用已构建并经鉴定的重组质粒pGEX-4T-1/AMG转化大肠杆菌BL21,分别对诱导时间、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)浓度和诱导温度进行优化,在最佳诱导表达条件下,分别对菌液上清、周质、胞质和包涵体中的目的蛋白表达进行分析,在可溶性蛋白中发现大量目的蛋白,随后利用GSTrapFF亲和层析柱进行人AMG融合蛋白的过柱纯化。结果pGEX-4T-1/AMG重组质粒的双酶切凝胶电泳鉴定结果和测序鉴定结果和预期一致。最佳诱导时间为14.5h、最佳诱导剂浓度为1.0mmol/L、最佳诱导温度为20℃,在此条件下目的蛋白的表达量达到峰值。在最佳诱导条件下,胞质蛋白和包涵体中都有大量的目的蛋白。提取大量胞质蛋白,经GSTrapFF亲和层析柱纯化,收集纯化液,进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,显示成功纯化了AMG融合蛋白,在提取液洗涤2次后,可获得高纯度的融合蛋白。结论利用pGEX-4T-1/AMG原核表达体系成功获得纯化的人AMG融合蛋白。
- 张雪洋赵华赵红宇王春先章锦才
- 关键词：人釉原蛋白融合蛋白纯化
