福建省科技计划重点项目(2012YZ0001-1)
- 作品数：3 被引量：84H指数：2
- 相关作者：谭建明朱凌峰林榕祝玲王水良更多>>
- 相关机构：厦门大学第二军医大学南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体稳定过表达基因工程修饰人脐带间充质干细胞亚细胞系的建立被引量：4
- 2015年
- 目的通过基因工程修饰法建立肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)稳定过表达的人脐带间充质干细胞亚系(h UC-MSC_TRAIL)。方法人TRAIL全长蛋白编码序列(CDS)由PCR法扩增而得,PCR产物经NotⅠ和MluⅠ双酶切并纯化后,亚克隆至经同样双酶切的慢病毒表达载体p LEX-MCS。重组载体经PCR法和限制性内切酶酶切法鉴定,再行DNA直接测序验证后命名为人TRAIL表达慢病毒载体pLEX-h TRAIL。p LEXh TRAIL与相应包装质粒ps PAX2和p MD2.G经聚乙烯亚胺介导共转染HEK293T细胞以包装慢病毒。P4代h UC-MSC经慢病毒感染24 h,再行嘌呤霉素筛选2周后,抽提细胞基因组DNA,行PCR法鉴定h TRAIL c DNA在h UC-MSC基因组中的整合情况;同时抽提细胞总RNA,并行RT-PCR法检测外源h TRAIL在h UC-MSC中的m RNA表达水平,以及实时定量RT-PCR法检测周期调控相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、p21^(WAF1/CIP1和p27的表达,采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果 PCR法和限制性内切酶酶切法鉴定结果表明,本研究已成功构建人TRAIL慢病毒表达载体p LEX-h TRAIL,直接DNA测序结果证实克隆得到的人TRAIL蛋白编码序列准确无误;病毒包装及细胞感染的鉴定结果说明,慢病毒感染法可成功介导外源人TRAIL在h UC-MSC的稳定整合和高表达;实时定量RT-PCR法检测结果则显示,与对照慢病毒感染后的细胞相比,h TRAIL表达慢病毒感染后其细胞周期调控相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、p21^(WAF1/CIP1)和p27的m RNA表达水平分别是对照组的1.19倍(P=0.141)、0.94倍(P=0.745)、0.95倍(P=0.047)和1.01倍(P=0.567),表明外源TRAIL高表达对体外培养的h UC-MSC生长增殖等表型无显著影响。结论本研究经基因工程修饰法成功构建了具外源TRAIL稳定高表达的h UC-MSC亚细胞系,该亚细胞系的建立为后续靶向攻击TRAIL敏感肿瘤细胞的细胞治疗的探索奠定了基础。
- 林榕左伟敏祝玲王瑾路君黄梁浒王庆华谭建明王水良
- 关键词：基因修饰间质干细胞TRAIL细胞系
- 经尿道双极等离子前列腺剜除术治疗体积>60ml前列腺增生的疗效分析被引量：79
- 2016年
- 目的探讨经尿道双极等离子前列腺剜除术（plasma kinetic enucleation of the prostate,PKEP）治疗体积〉60 ml良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）的近期疗效。方法回顾性分析2013年9月~2015年8月南京军区福州总医院泌尿外科治疗87例体积〉60 ml的BPH患者的临床资料与手术治疗效果,其中PKEP组45例,经尿道等离子前列腺切除术（plasma kinetic resection of prostate,PKRP）组42例。比较2组手术时间、切除前列腺组织量、术后第1天血红蛋白下降值、膀胱冲洗时间、导尿管留置时间,术前及术后1、3、6个月国际前列腺症状评分（IPSS）、生活质量评分（QOL）、残余尿量（PVR）、最大尿流率（Qmax）等指标。结果与PKRP组相比,PKEP组切除前列腺腺体组织多[（52.4±15.2）g vs.（40.0±14.1）g,t=3.94,P=0.00],术后第1天血红蛋白下降少[（9±4）g/L vs.（17±6）g/L,t=-7.36,P=0.00],膀胱冲洗时间短[（1.1±0.3）d vs.（1.4±0.5）d,t=-3.42,P=0.00],导尿管留置时间短[（3.3±0.5）d vs.（5.5±0.5）d,t=-20.50,P=0.00]。2组手术时间及术后血尿、尿失禁等并发症发生率差异无显著性（P〉0.05）。2组术后1、3、6个月IPSS、QOL、PVR、Qmax与术前比较均有明显改善（P〈0.05）,2组间差异无显著性（P〉0.05）。结论经尿道PKEP是一种新型的适用于BPH的微创手术,疗效确切,安全性高。
- 朱凌峰谭建明
- 关键词：良性前列腺增生症经尿道等离子前列腺剜除术经尿道等离子前列腺电切术
- 腹腔镜手术治疗不完全型重复肾畸形(附3例报告)被引量：1
- 2014年
- 目的探讨后腹腔镜重复肾切除联合经腹腹腔镜输尿管膀胱再植术治疗不完全型重复肾畸形的手术方法及临床价值。方法2012年2月～2013年8月，采用后腹腔镜重复肾切除联合经腹腹腔镜输尿管膀胱再植术治疗不完全型重复肾畸形3例。术前均经影像学确诊。结果3例手术均获得成功。手术时间141、127、97min。术中出血量82、95、52m1。术后住院时间7、8、7d。随访时间2、8、17个月，彩超及ECT提示正常半肾功能良好，原有腹痛、尿路刺激征、尿失禁等症状消失，未发生严重并发症。结论后腹腔镜重复肾切除联合经腹腹腔镜输尿管膀胱再植术治疗不完全型重复肾畸形具有创伤小、出血量少、术后恢复快、并发症少等优点，可作为一种可行的治疗选择。
- 佟智超朱凌峰赵兴旺邓震谭建明
- 关键词：腹腔镜重复肾输尿管膀胱再植术
