黑龙江省卫生厅科研项目(2011-212)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：杨慧科赵玉娇张雅芳李晓冬吴梦楠更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学黑龙江护理高等专科学校西藏藏医学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省卫生厅科研项目国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 藏红花素通过KCa3.1及ERK调节HUVECs增殖、迁移过程被引量：3
- 2021年
- 目的观察藏红花素对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的影响以及中电导钙激活钾通道(KCa3.1)可能的调节作用。方法用藏红花素及ERK激酶(MEK)抑制剂PD98059、KCa3.1抑制剂TRAM-34处理HUVECs,MTT和EdU细胞增殖法检测细胞体外增殖活力,Transwell评估细胞迁移能力,Western blot法检测KCa3.1的表达。结果藏红花素促进HUVECs的增殖、迁移能力,而MEK抑制剂PD98059则可降低藏红花素诱导的细胞增殖、迁移;同时,KCa3.1抑制剂TRAM-34可有效抑制细胞增殖,但不影响迁移。另外,藏红花素并不影响KCa3.1表达,但抑制剂PD98059能下调KCa3.1的表达。结论藏红花素促进HUVECs增殖、迁移能力,且与ERK信号通路和KCa3.1调节有关。
- 王罗丹李超刘欢拉巴次仁春花李雪梅杨慧科
- 关键词：藏红花素人脐静脉内皮细胞增殖
- 中电导钙激活钾通道调节表皮生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞体外增殖被引量：1
- 2016年
- 目的观察表皮生长因子(EGF)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)离子通道中电导钙激活钾通道(KCa 3.1)表达的影响,以及KCa 3.1在EGF诱导HUVECs体外增殖过程中的作用。方法 MTT法筛选EGF最佳实验浓度;免疫荧光和Western blotting技术检测EGF对HUVECs细胞KCa 3.1的表达;经KCa 3.1阻断剂TRAM-34处理,MTT法分析EGF诱导的HUVECs增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期,RT-PCR法分析细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)表达的水平。结果 EGF处理细胞48h后,MTT实验证实25μg/L浓度的EGF促细胞增殖效应最强。免疫荧光染色显示,EGF明显促进KCa 3.1蛋白表达,且Western blotting提示KCa 3.1的表达上调1.4倍。进一步研究显示,高选择性阻断剂TRAM-34阻断KCa 3.1通道48h后EGF的促细胞增殖作用显著下降,并呈时间和剂量依赖性;细胞周期G1期细胞百分比明显增加;CDK4的mRNA表达下调,而cyclin D1表达无明显变化。结论 KCa 3.1可能通过影响细胞周期进程调节EGF诱导的HUVECs增殖过程。
- 郭洪宇赵玉娇高博李晓冬张雅芳杨慧科
- 关键词：人脐静脉内皮细胞表皮生长因子免疫印迹法
- 藏红花素对人脐静脉内皮细胞增殖及细胞外调节蛋白激酶信号通路的影响被引量：6
- 2017年
- 目的观察藏红花素(crocin)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外增殖、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2表达及活性的影响。方法用藏红花素及MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂PD98059分别处理HUVECs,Ed U细胞增殖法检测细胞体外增殖活力,Western blotting法检测crocin对磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和总ERK1/2表达的影响,激光扫描共焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)浓度。结果在1μmol/L和10μmol/L浓度水平,藏红花素可明显促进细胞的增殖能力,提高磷酸化ERK1/2和总ERK1/2蛋白的表达水平,并增加细胞内Ca^(2+)浓度;给予MEK抑制剂PD98059后,细胞的增殖能力下降,磷酸化ERK1/2和总ERK1/2的表达减弱,细胞内Ca^(2+)浓度降低。结论藏红花素通过活化ERK1/2信号途径,提高细胞内Ca^(2+)浓度,促进人脐静脉内皮细胞的体外增殖能力。
- 赵玉娇春花李鑫磊吴梦楠杨慧科
- 关键词：藏红花素人脐静脉内皮细胞增殖细胞外调节蛋白激酶免疫印迹法
- 表皮生长因子诱导人脐静脉内皮细胞迁移过程中波形蛋白及基质金属蛋白酶2的表达变化被引量：1
- 2013年
- 目的观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移过程中表皮生长因子(EGF)对波形蛋白(vimentin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,分析波形蛋白与EGF促HUVECs迁移能力的关系。方法 EGF处理HUVECs细胞10h后,采用细胞划痕实验检测HUVECs细胞的迁移水平,荧光显微镜下观察细胞的形态变化情况;免疫荧光染色观察划痕诱导HUVECs迁移时波形蛋白的表达变化;Western blotting和RT-PCR法分析MMP-2及波形蛋白表达。结果 EGF刺激后HUVECs的迁移能力上升1.8倍,迁移细胞的形态发生改变,由铺路石样变为长梭形,同时波形蛋白和MMP-2的表达上调(P<0.05)。结论 EGF促进HUVECs的迁移过程中可明显上调波形蛋白和MMP-2的表达,波形蛋白与HUVECs的迁移相关。
- 卢诗军杨慧科马文平李晓冬张雅芳
- 关键词：表皮生长因子波形蛋白基质金属蛋白酶2免疫印迹法
