国家自然科学基金(30230305)
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 相关作者：曾耀英季煜华钱中清肇静娴何贤辉更多>>
- 相关机构：暨南大学蚌埠医学院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 佛波醇酯加离子霉素诱导脐血和成人外周血CD4^+CD25^+ T细胞分泌IL-2的相关机制研究被引量：3
- 2006年
- 目的:以佛波醇酯加离子霉素作为刺激剂,验证CD4+CD25+调节性T细胞本身并不存在分泌IL-2障碍;同时通过对脐血和成人外周血的比较性研究,了解脐血CD4+CD25+T细胞的成熟度。方法:以autoMACS从足月婴儿脐血(CB)和成人外周血(PB)分选CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,以PDB+ionomycin作为刺激剂,培养45h后流式细胞术检测各组细胞表达CD69和CD25水平,并以Luminex多重细胞因子检测技术检测培养上清中7种细胞因子的浓度。结果:经PDB+ionomycin刺激后,CB、PB的CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均发生增殖,但在培养45h后CD4+CD25+T细胞均出现细胞状态变差或死亡倾向。CB、PB的CD4+CD25+T细胞活化后CD25分子表达进一步上调,高于CD25-细胞活化后的CD25分子密度。经PDB+ionomycin刺激后,PB CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均分泌高水平的IFN-γ、IL-2和TNF-α,但CD25+细胞分泌IL-5、IL-4和IL-10水平远远高于CD25-细胞;CBCD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞亦分泌高水平的IL-2和TNF-α,但IFN-γ水平远远低于PB,基本不分泌IL-5、IL-4和IL-10。结论:CD4+CD25+T细胞本身并不存在合成和分泌IL-2障碍,其可能具有与传统T细胞不同的T细胞受体信息转导模式;脐血CD4+CD25+T细胞功能尚未完全成熟。
- 肇静娴曾耀英李海仙曾祥凤季煜华何贤辉
- 关键词：CD4^+CD25^+T细胞佛波醇酯类
- VEGF诱导血管内皮细胞产生H_2O_2及其促增殖作用被引量：19
- 2007年
- 目的:研究VEGF诱导血管内皮细胞产生细胞外H2O2及其在VEGF促血管内皮细胞增殖功能中的作用。方法:①以H2DCFDA为H2O2指示剂,检测500μg/LVEGF刺激下,血管内皮细胞H2O2的产生;②以MTT法检测3×106U/L过氧化氢酶(CAT),及外源性加入5-20mmol/LH2O2对VEGF促增殖功能的影响。结果:①在VEGF刺激血管内皮细胞15min后,细胞内开始出现逐渐增强的荧光,且随时间逐渐增强,至45min左右最强,随后逐渐减弱;而同时加入过氧化氢酶组的细胞则仅有微弱荧光产生,且荧光强度不随时间变化;②3×106U/L过氧化氢酶对VEGF的促增殖功能有明显的抑制作用(P<0.01);③外源性加入5-10mmol/LH2O2时对血管内皮细胞有明显促增殖作用(P<0.01),但其对VEGF的促增殖功能却有显著抑制作用(P<0.01)。结论:VEGF可刺激血管内皮细胞产生细胞外H2O2,在促细胞增殖中可能具有重要作用。而外源性H2O2对VEGF的生理功能可能具有抑制作用。
- 钱中清曾耀英王通林羿季煜华肇静娴
- 关键词：血管内皮细胞血管内皮细胞生长因子过氧化氢酶
- 子痫前期患者系统性氧化应激反应的检测被引量：3
- 2010年
- 目的研究子痫前期系统性氧化应激检测方法。方法组织化学染色检测胎盘组织缺氧表现;用胞内活性氧(ROS)探针H2DCFDA及全血染色方法检测中性粒细胞(PMN)胞内ROS水平;用H2O2检测试剂盒检测血清中H2O2水平。结果与正常妊娠胎盘组织比较,子痫前期患者胎盘组织合胞体细胞显著增多;血管破坏,结构不清,局部血管有纤维钙化特征;非孕妇女、正常妊娠妇女及子痫前期患者PMN胞内ROS水平分别为:45.61±12.20、51.02±13.60(P<0.01)、85.10±16.30(P<0.01);而血清H2O2浓度分别为:(24.57±5.17)μmol/L、(26.61±3.25)μmol/L、(39.84±9.67)μmol/L。结论对子痫前期系统性氧化应激进行定性和定量检测结果与疾病发生和发展一致。
- 钱中清曾耀英朱斌季煜华何芳
- 关键词：子痫前期氧化应激胎盘中性粒细胞
- 激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题被引量：1
- 2007年
- 目的对激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题进行探讨。方法ROS探针标记ECV- 304及RAW264．7细胞后,激光共聚焦显微镜488nm波长检测器分别进行连续和间隔观测1200s,比较两种观测方式下细胞荧光强度的变化;外源性加入H2O2,证实间隔观测时系统的灵敏性。结果在连续观测方式下,细胞荧光强度短时间内显著增强,改为间隔观测后细胞荧光强度变化缓慢,但维持在低水平且在外源性加入H2O2后细胞荧光强度迅速增强。结论激光共聚焦显微镜激发激光可引起细胞大量产生ROS,对检测系统造成干扰,采用间隔观测的方法可显著改善系统自身的这种缺陷,并能保持系统的检测灵敏性。
- 钱中清曾耀英季煜华何贤辉肇静娴狄静芳
- 关键词：激光共聚焦显微镜活性氧ECV-304RAW264.7
- 子痫前期患者血清中H2O2与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系被引量：2
- 2011年
- 大量研究证实，子痫前期孕妇存在系统性的高氧化应激状态及炎症性免疫活化。研究发现，子痫前期孕妇血清中存在高水平的氧化应激产物H2O2，其可能来源于氧化应激性胎盘组织及外周大量活化的中性粒细胞。血管内皮细胞损伤和功能紊乱被认为是子痫前期疾病进展中的关键环节，
- 钱中清曾耀英王才智汪洪涛姚春艳
- 关键词：T淋巴细胞活化中性粒细胞子痫前期孕妇血清H2O2血管内皮细胞损伤
