国家自然科学基金(30371256)
- 作品数:6 被引量:22H指数:3
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- 相关机构:军事医学科学院中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 实验感染的三带喙库蚊和来亨鸡体内西尼罗病毒的分离与鉴定被引量:6
- 2006年
- 采用C636细胞培养分离活病毒、间接免疫荧光染色检测病毒抗原、RTPCR扩增病毒基因片段和PCR产物测序等方法,对实验感染的三带喙库蚊Culextritaeniorhynchus和来亨鸡血液样本中的西尼罗病毒进行分离和鉴定。结果表明,接种实验感染蚊虫研磨液和来亨鸡血液样本的C636细胞出现细胞融合、空泡形成的病变效应;用西尼罗病毒抗血清进行间接免疫荧光染色,感染病毒的细胞呈现黄绿色荧光,为阳性反应;采用3对不同引物的RTPCR体系扩增分别出现预期的408bp、498bp和559bp的基因片段,序列测定证实扩增序列与实验所用毒株相应的基因序列基本相同。从而证实实验感染三带喙库蚊和来亨鸡体血液内的西尼罗病毒与实验感染所用的西尼罗病毒Chin01株一致。
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- 关键词:三带喙库蚊西尼罗病毒
- 实验感染蚊虫及来亨鸡体内西尼罗病毒的RT-PCR检测被引量:3
- 2006年
- 根据已发表的西尼罗病毒Chin-01株基因序列,参照文献资料选择合成一对引物,建立西尼罗病毒的RT-PCR检测方法,对反应条件进行了系列优化后,应用于感染蚊虫样本及来亨鸡血液样本中的病毒核酸检测。该方法的检测敏感性达到1·0PFU,感染蚊虫样本和来亨鸡血液样本均能够扩增出与预期值大小一致的特异性区带,经序列测定证明,与实验感染所用病毒株序列完全相同。可见RT-PCR是检测实验感染蚊虫和来亨鸡体内西尼罗病毒行之有效的方法。
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- 关键词:西尼罗病毒RT-PCR蚊虫
- 西尼罗病毒空斑形成试验方法的建立与应用被引量:3
- 2006年
- 目的建立西尼罗病毒的空斑形成试验方法,应用于病毒滴度测定和实验感染蚊虫及来亨鸡血液样本中病毒的定量检测。方法将稀释的样本接种常规制备的Vero细胞单层,用琼脂糖凝胶覆盖,孵育一定时间后,加中性红染色,计数空斑数,计算空斑形成单位。结果在琼脂糖凝胶中西尼罗病毒可形成直径大约1~3mm的圆形或类圆形空斑。20%病毒鼠脑悬液的病毒滴度为107空斑形成单位。感染蚊虫样本和来亨鸡血液样本也出现典型的空斑。结论建立了西尼罗病毒的空斑形成试验方法,该方法可应用于病毒滴度测定和实验感染蚊虫及来亨鸡血液样本中病毒的定量检测。
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- 关键词:西尼罗病毒
- 埃及伊蚊传播西尼罗病毒的媒介效能研究被引量:4
- 2011年
- 目的研究我国埃及伊蚊传播西尼罗病毒的潜在能力。方法人工配制病毒血餐感染埃及伊蚊并进行传播实验,应用反转录聚合酶链反应(RT?PCR)、病毒分离和间接免疫荧光法(IFA)检测蚊虫和来亨鸡体内病毒。结果动物实验结果表明敏感动物来亨鸡感染西尼罗病毒后,第2天其体内病毒量达到最高,说明进行传播实验后的第2天是检测传播是否成功的最佳时间。感染与传播实验结果表明埃及伊蚊对西尼罗病毒的感染率达到了63.3%,而且通过刺叮敏感动物(来亨鸡)能够传播该病毒,其传播率为30.0%。结论在未来我国可能的西尼罗热暴发中,埃及伊蚊可能成为其在海南等地的潜在传播媒介。
- 张映梅姜淑芳郭晓霞董言德赵彤言
- 关键词:埃及伊蚊西尼罗病毒易感性
- 西尼罗病毒的细胞敏感性观察
- 2006年
- 本研究选用C636、BHK21、Vero和VeroE64株传代细胞进行西尼罗病毒的细胞敏感性试验,观察西尼罗病毒在各传代细胞系上细胞病变出现的时间以及病变特征。结果表明,该病毒在4种传代细胞出现CPE的时间及特征均有所不同,其中C636细胞对西尼罗病毒的细胞病变特征最为明显,出现时间适中,更适用于西尼罗病毒的组织培养研究。
- 张映梅姜淑芳赵彤言董言德
- 关键词:西尼罗病毒细胞敏感性细胞病变
- 媒介蚊虫在西尼罗病毒传播循环中的作用被引量:7
- 2006年
- 西尼罗病毒的频繁爆发和迅速蔓延成为当今全球普遍关注的新的公共卫生问题。研究证实蚊虫为其主要的传播媒介。为了探讨蚊虫在西尼罗病毒传播中的地位和作用,本文就西尼罗病毒相关的媒介蚊虫的种类、影响蚊虫感染和传播的因素以及蚊虫对于长期保存病毒的机制进行了综述,提出西尼罗病毒传播循环中蚊媒生物学的研究方向。
- 姜淑芳张映梅赵彤言
- 关键词:西尼罗病毒蚊虫