国家高技术研究发展计划(2012AA022203C) 作品数:3 被引量:7 H指数:2 相关作者: 张桂敏 尹李峰 周玉玲 卢争辉 何家亨 更多>> 相关机构: 湖北大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
交联木聚糖制备工艺的优化和活性检测研究 2018年 交联木聚糖RBB-xylan是木聚糖酶在测定和筛选过程中常用的人工合成的色原底物,利用木聚糖和雷玛唑亮蓝制备RBB-xylan的传统方法得率较低.在传统方法的基础上采用改变单一变量对原有的实验方法逐步改进:将硫酸钠的滴加流速调整为0.8 m L/s,增加1 h陈化时间,将沉淀剂乙醇的用量提高3倍,从而使RBB-xylan得率从原来的50.5%提高到84.8%,效果显著.将RBB-xylan添加到平板可快速筛选出产木聚糖酶的菌株.结果表明,合成的RBB-xylan具有活性,可用于后续木聚糖酶的筛选及活性测定. 尹李锋 周玉玲 张桂敏关键词:木聚糖酶 单因素 一株碱性淀粉酶产生菌的分离及酶学特性分析 被引量:3 2013年 [目的]筛选出能用于生物印染的碱性淀粉酶产生菌。[方法]利用Horikoshi培养基从农田土壤中分离碱性淀粉酶产生菌,并采用DNS法和碘量法测定粗酶液中淀粉酶的酶学性质。[结果]共分离到9株碱性淀粉酶产生菌,对其中水解圈最大的菌株703进行16S rDNA序列同源性比对,结果显示其与嗜碱性芽孢杆菌Bacillus pseudofirmus OF4的16S rDNA序列一致性达100%。对该菌发酵粗酶的酶学性质研究表明该碱性淀粉酶的最适温度为50℃,最适pH为9.5,50℃下处理30 min后酶活残存74.7%。[结论]该研究筛选出了能用于生物印染的碱性淀粉酶产生菌,所产淀粉酶热稳定性较好,且具有强的碱耐受性,表明该酶具有应用于生物印染的潜在利用价值。 卢争辉 何家亨 张桂敏关键词:碱性淀粉酶 RDNA序列 BACILLUS 酶学性质 嗜碱芽孢杆菌耐热耐碱内切木聚糖酶基因的密码子优化及在毕赤酵母中的表达 被引量:4 2017年 【目的】研究极端耐热耐碱的木聚糖酶,使其能够满足造纸行业中碱性高温的苛刻环境。【方法】将一种来源于嗜碱芽孢杆菌S7的耐热耐碱内切木聚糖酶基因(xyn10A)密码子进行优化,基因合成后克隆至pHBM905BDM载体上,并转化毕赤酵母GS115菌株。【结果】木聚糖酶基因(xyn10A)优化后与原始序列比对相似性为76.70%。基因合成后克隆到pHBM905BDM载体上,并成功转化毕赤酵母GS115菌株。通过交联木聚糖底物平板水解圈法初筛及摇瓶复筛得到一株产酶量较高的菌株,且其在摇瓶发酵第10天达到最高酶活力,为495U/mL。另外,糖基化分析表明该酶在毕赤酵母中表达时被糖基化修饰。【结论】密码子优化后的极端耐热耐碱木聚糖酶基因在毕赤酵母中成功表达。 严闯 尹李峰 周玉玲 张桂敏关键词:毕赤酵母