国家肉鸡产业技术体系建设专项(nycyts-42-G3-01)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：高玉龙祁小乐王笑梅高宏雷高立更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡传染性法氏囊病毒基因组A节段编码前体多聚蛋白的遗传踪迹分析被引量：2
- 2012年
- 为研究鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)毒力变异的分子机理,本实验采用进化踪迹分析方法对GenBank中登录的28个毒力不同的IBDV参考病毒株的基因组A节段编码的前体多聚蛋白(NH2-pVP2-VP4-VP3-COOH)推导的氨基酸序列进行分析。结果表明超强IBDV与标准IBDV的差异位点集中在第299位、451位、680位、715位和751位氨基酸上;致弱IBDV与标准IBDV的差异位点在第242位、253位、330位和981位氨基酸。该结果为进一步研究IBDV的毒力变异奠定基础。
- 侯仲杰王靖飞付朝阳高宏雷高玉龙祁小乐郭莹莹王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病毒毒力变异
- 禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：1
- 2010年
- 为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中。将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清。SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;ELISA效价达到1∶105以上。该研究为REV的检测及env蛋白的深入研究奠定了基础。
- 李凯高宏雷祁小乐高玉龙高立邓小芸王笑梅
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒ENV基因原核表达纯化多克隆抗体
- J亚群禽白血病病毒gp85基因在毕赤酵母中的分泌表达
- 2012年
- 为获得J亚群禽白血病病毒gp85蛋白,将gp85基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K,构建了pPIC9K-gp85表达载体。将鉴定正确的表达载体经SalⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115,经MD及G418抗性平板筛选后挑取阳性克隆进行PCR鉴定,获得重组酵母菌株GS115/pPIC9K-gp85。对阳性重组菌进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE、Western blotting和Dot-ELISA分析,结果表明,gp85基因在毕赤酵母中获得分泌表达,表达产物与J亚群禽白血病病毒多克隆抗体有良好的反应活性,分泌表达量达40mg/L。本研究为J亚群禽白血病病毒诊断方法的建立及gp85蛋白的深入研究奠定了基础。
- 徐延伟高宏雷高玉龙李凯高立秦立廷祁小乐王永强王笑梅
- 关键词：J亚群禽白血病GP85基因毕赤酵母分泌表达
