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国家自然科学基金(30928031)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：王伟颜真崔杰王伟华杨静华更多>>
相关机构：第四军医大学美国波士顿大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇双链
  • 1篇双链RNA
  • 1篇募集
  • 1篇活性
  • 1篇纯化
  • 1篇CASPAS...

机构

  • 1篇第四军医大学
  • 1篇美国波士顿大...

作者

  • 1篇杨静华
  • 1篇王伟华
  • 1篇崔杰
  • 1篇颜真
  • 1篇王伟

传媒

  • 1篇中国生物制品...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
重组双链RNA依赖的Caspase募集蛋白的表达、纯化及其活性被引量：1
2012年
目的表表达并纯化重组双链RNA依赖的Caspase募集蛋白,并鉴定其生物学活性。方法将重组质粒pRSET-dsCARE转化大肠杆菌BL21(DE3),分别于37、28℃表达目的蛋白,Ni-NTA亲和层析纯化,纯化产物经SDS-PAGE、Western blot、HPLC鉴定目的蛋白,MTT法检测dsCARE对转染poly(I∶C)细胞的增殖抑制作用。结果dsCARE重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中呈组成性稳定表达,平均每升培养基可收获湿菌体约10 g;纯化产物的SDS-PAGE纯度达95.8%;纯化的目的蛋白能与抗-His多抗发生特异性反应;HPLC纯度达95.1%;每10 g湿菌体可纯化dsCARE重组蛋白约7.5 mg,浓度约220μg/ml;纯化的dsCARE重组蛋白与转染poly(I∶C)的HeLa细胞共同孵育,可剂量依赖性抑制HeLa细胞的增殖活性。结论成功建立了重组dsCARE蛋白的表达、纯化工艺及活性鉴定方法,为其应用和后续研究奠定了基础。
王伟王伟华崔杰杨静华颜真
关键词：双链RNACASPASE
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