天津市科技攻关项目(06YFSZSF01200)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关作者：张赛刘晓智孙洪涛刘振林张文彬更多>>
- 相关机构：武警医学院附属医院天津医科大学武警部队更多>>
- 发文基金：天津市科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 亚低温延缓脑创伤后神经元迟发性凋亡进程的研究被引量：4
- 2008年
- 目的:观察亚低温对脑创伤后神经元程序性细胞死亡进程的延缓作用,从细胞水平测试亚低温治疗的意义。方法:分离培养乳鼠脑皮质神经元,免疫荧光方法鉴定;部分神经元反复冻融,将细胞裂解液加入正常神经元细胞表面,分别置于33℃和37℃温控培养箱中培养;测定培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测原位凋亡细胞数量,以hoechst33258标记法检测亚低温对凋亡速度的影响。结果:免疫荧光检测神经元特异标记蛋白神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白(MAP-2)阳性表达率分别为(74.7±8.4)%和(80.1±6.7)%。培养于33℃的LDH水平和发生原位凋亡的细胞数量均低于37℃培养组(P<0.05),hoechst33258标记法显示亚低温可延缓神经元调亡速度(P<0.05)。结论:亚低温可明显减缓脑创伤后神经元调亡进程,为其他治疗争取救治时间。
- 孙洪涛刘晓智王志强张赛
- 关键词：颅脑损伤细胞凋亡神经元
- 血管生成因子2在胶质瘤模型中的表达与shRNAs靶向治疗被引量：5
- 2009年
- 目的检验血管生成因子2（angiopoietin-2，Ang-2）在胶质瘤模型中的表达，应用RNA干扰技术靶向Ang-2，观察胶质瘤治疗效果。方法建立荷瘤小鼠颅内U87胶质瘤模型，检测Ang-2和PCNA的表达；转染shRNAs表达质粒进入U87细胞，比较受试动物生存期，MRI观察肿瘤体积；脑组织行HE染色及免疫组化检测。结果颅内模型中Ang-2在胶质瘤边缘的表达强于肿瘤内部（P〈0．05），围绕于新生血管周围；靶向Ang-2的shRNAs基因治疗可延长受试动物生存期，降低新生血管数量，但PCNA表达无统计学意义（P〉0．05）。结论Ang-2主要表达于胶质瘤侵袭边缘，与肿瘤新生血管形成密切相关；靶向Ang-2的shRNAs技术可有效降低胶质瘤的侵袭能力。
- 刘振林刘晓智张文彬张赛
- 关键词：RNA干扰神经胶质瘤侵袭性
- 亚低温降低创伤后脑组织炎症反应的实验研究
- 2008年
- 【目的】研究亚低温在外伤致脑组织炎症反应中的治疗作用。【方法】液压冲击法建立实验动物脑创伤模型,分创伤组和亚低温治疗组两组,亚低温治疗组动物接受冰袋全身降温处理;RT-PCR及Western blotting法检测环氧化-酶2(COX-2)mRNA及蛋白水平表达,ELISA法检测前列腺素E2(PGE2)水平。【结果】创伤组脑组织COX-2 mRNA、蛋白表达水平于伤后早期明显升高,第3天达高峰,此后逐渐降低,其反应产物PGE2出现相同变化趋势。亚低温治疗组脑组织COX-2 mRNA、蛋白表达,及其产物PGE2水平与创伤组伤后同时期比较降低明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】亚低温可明显降低外伤后脑组织炎症因子的产生和释放,降低炎症反应程度。
- 孙洪涛刘晓智张赛
- 关键词：颅脑创伤炎症
- 亚低温对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 观察亚低温对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响.方法 制作SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型,分亚低温治疗组和对照组,组织原位凋亡检测法检测亚低温治疗期间第24、48、72小时,以及复温后第24、48、72、96和120小时的细胞凋亡情况,RT-PCR方法检测所有观察时间点促凋亡基因Caspase、Fas和凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA表达水平.结果 亚低温治疗组脑组织的细胞凋亡数量在亚低温治疗期间的三个检测时间点均少于对照组（P＜0.05）,复温以后逐渐增加,至复温后第72小时及以后细胞凋亡数量与对照组差异无统计学意义（P＞0.05） 促凋亡基因Caspase、Fas和凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA表达水平在亚低温治疗期间均低于对照组（P＜o.05）,复温后出现mRNA表达的同向性升高,复温72 h及以后接近对照组（P＞0.05）.结论 亚低温可明显减缓脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡进程,但在其复温后凋亡速度迅速回升.因此,应积极争取亚低温治疗时间窗,同步进行神经细胞救治.
- 李建军张赛
- 关键词：低温疗法凋亡基因表达
- hTERT介导脐带间充质干细胞实现永生化的研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过转染人端粒酶逆转录酶催化亚单位（hTERT）建立永生化脐带间充质干细胞（UCMSCs），用以获得足够多的UCMSCs满足体外研究与临床需要。方法原代分离培养人UCMSCs。取第4代UCMSCs行流式细胞术检测UCMSCs表面特异标志物表达：利用脂质体介导pLXSN—hTERT正义表达质粒转染UCMSCs，建立永生化UCMSCs; RT-PCR检测转染前后hTERTmRNA表达水平，细胞免疫荧光方法检测hTERT蛋白表达，流式细胞术观察hTERT转染后细胞周期改变。结果流式细胞术结果显示UCMSCs强表达CD29、CD44、CD105，极低表达CD31、CD34、CD45，检测结果符合人UCMSCs特征；RT-PCR检测单纯UCMSCs低表达hTERTmRNA，pLXSN-hTERT正义表达质粒转染后hTERTmRNA表达明显增高；细胞免疫荧光显示hTERT全部表达于细胞核．转染后胞核荧光强度明显增强：细胞周期检测结果显示转染后处于S期UCMSCs数目明显增多，细胞可获得长期稳定传代（〉35代）。结论以hTERT转染UCMSCs在体外可获得长期稳定传代培养细胞，可基本满足体外研究与临床需要。
- 张赛刘振林胡群亮孙洪涛孙世中刘晓智
- 关键词：脐带间充质干细胞永生化
