国家自然科学基金(20676103)
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
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- 一种新型家蝇蛹凝集素结构的初步探讨被引量：1
- 2009年
- 初步分析了分离出的一种分子量为55kDa,具有免疫活性的新型家蝇蛹D-半乳糖结合凝集素的结构,为深入研究其结构与功能之间的关系提供大量的信息。首先通过凝胶电泳染色确定此新型家蝇蛹凝集素具有糖链结构,借助蛋白质测序仪、分光光度计比色、β-消除反应、红外光谱以及原子力显微镜技术对其结构进行初步分析。此种家蝇蛹凝集素是一种蛋白和糖含量分别为97.36%和2.1%的球状单体,直径为75nm左右。肽链与糖链的连接方式为O-糖苷键型,肽链的N-末端封闭,糖环为吡喃型,为进一步分析其结构提供了可靠的依据。
- 曹小红毛德志许程剑鲁梅芳韩朝龙王晓烨霍哲王春玲
- 关键词：凝集素糖蛋白糖链
- 家蝇蛹凝集素的免疫调节作用被引量：5
- 2010年
- 本实验研究了从家蝇蛹体内分离的一种凝集素,研究了其免疫调节的性质。首先将收集的家蝇蛹在缓冲液中研磨,得到粗提物,经过亲和吸附、竞争洗脱等步骤得到了纯品。电泳结果表明家蝇蛹凝集素分子量大约为55kD。通过检测巨噬细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-12等实验,证明了家蝇蛹凝集素浓度在5μg/mL时对与巨噬细胞分泌IL-6有显著增强作用,家蝇蛹凝集素的浓度在10μg/mL时对巨噬细胞分泌IL-12有显著效果。通过小鼠脾淋巴细胞增殖试验结果可知家蝇蛹凝集素对于混合淋巴细胞增殖有促进作用。以上试验结果说明家蝇蛹凝集素免疫调节作用,为天然免疫增强剂的开发提供了一定的参考依据。
- 曹小红许程剑曾斌王春玲侯丽华毛德志
- 关键词：凝集素免疫调节细胞因子
- 家蝇蛹中多酚氧化酶的分离纯化及抑菌活性的研究
- 2008年
- 采用缓冲液浸提、超滤、亲和层析和高效液相色谱4种方法,从家蝇蛹中分离纯化一种D-半乳糖专一性的多酚氧化酶(PO),并对其抑菌活性进行了研究.在SDS-PGAGE中呈现出两个条带,其中表观分子质量为78ku的条带为目的蛋白;经过高效液相色谱分析,呈现出了分别和SDS-PAGE结果中相对应的两个峰,其中第一个峰为要纯化的目的蛋白;目的蛋白经过肽指纹图谱检测为PO,精确分子质量为79ku.1mL纯化的PO在1g/L的质量浓度下对1mL稀释后的大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌和伤寒沙门菌(106 mL-1)的抑制率分别为43.2%、38.7%和50.1%.
- 孙洋王春玲曹小红
- 关键词：多酚氧化酶抑菌
- 家蝇幼虫凝集素的分离纯化及其抑制MCF-7细胞活性的研究被引量：4
- 2009年
- 家蝇幼虫血淋巴粗提液经过亲和层析,分离出3种与D-半乳糖特异性结合的蛋白,经高效液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离出分子质量为38 ku的家蝇幼虫凝集素(MLL-2),该组分具有明显的凝血活性.圆二色谱结果表明,MLL-2的二级结构主要是以β折叠(80.3%)和无规卷曲(19.5%)的构象存在.MTT实验结果显示,MLL-2对人乳腺癌(MCF-7)细胞的生长具有明显的抑制作用,其抑制效果具有时间和浓度依赖性.形态学观察表明,MLL-2处理过的MCF-7细胞出现凋亡小体、染色质浓缩凋亡现象.经流式细胞仪分析MCF-7细胞被阻遏在G2/M期,并且凋亡率随作用时间的延长而增加.MLL-2通过诱导MCF-7细胞发生凋亡,从而起到抑制肿瘤细胞生长的作用.
- 曹小红霍哲王春玲鲁梅芳
- 关键词：家蝇幼虫凝集素MCF-7细胞
- 家蝇蛹凝集素对免疫低下小鼠免疫功能的影响被引量：1
- 2009年
- 将家蝇蛹凝集素(MPL)分别按400μg/(kg·d)、800μg/(kg·d)、1200μg/(kg·d)连续给小鼠灌胃10.d,于第8.d和第9.d给阴性对照组和3个剂量组小鼠腹腔注射环磷酰胺,造成小鼠免疫功能低下.观察家蝇蛹凝集素对免疫低下小鼠免疫器官指数、巨噬细胞的吞噬能力、脾脏淋巴细胞增殖和血清溶血值HC50的影响.结果表明,家蝇蛹凝集素能显著拮抗环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的免疫器官指数下降,提高巨噬细胞的吞噬能力,明显促进脾脏淋巴细胞增殖,且能使血清溶血素含量显著增加.说明家蝇蛹凝集素对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下有较好的预防作用.
- 曹小红许程剑曾斌王春玲
- 关键词：凝集素免疫低下
- 家蝇蛹血淋巴及其提取物的免疫调节作用被引量：2
- 2009年
- 目的:观察家蝇蛹血淋巴及其提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法:以不同浓度血淋巴及其提取物与脾淋巴细胞、T细胞和B细胞共孵育72小时,采用MTT法测定淋巴细胞的吸光度值,观察它们对淋巴细胞增殖的促进作用,采用免疫印迹法研究提取物对B淋巴细胞增殖的信号转导通路。结果:与对照组相比,血淋巴冻干粉、分子量在50kD以上的冻干粉及其提取物对混合淋巴细胞和B细胞增殖有显著促进作用,然而对于T细胞的增殖却没有明显的促进作用。MTT实验和免疫印迹结果表明血淋巴提取物激活了B淋巴细胞的ERK通路,促进了B淋巴细胞的增殖。结论:家蝇蛹血淋巴及其提取物具有免疫调节作用,为天然免疫增强剂的开发提供了一定的参考依据。
- 曹小红毛德志王春玲鲁梅芳侯丽华王爱华
- 关键词：血淋巴提取物免疫调节胞外信号调节激酶
- 家蝇蛹凝集素的纯化及对巨噬细胞免疫活性的影响被引量：2
- 2010年
- 采用缓冲液浸提、亲和层析、超滤和离子交换4种方法,从家蝇蛹中分离纯化出一种D–半乳糖特异性结合的凝集素(MPL-1),该组分具有明显的凝血活性和免疫调节活性.聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱分析结果表明,MPL-1为单一成分的蛋白,其分子质量为80 ku.中性红吞噬实验结果显示,此种凝集素能提高巨噬细胞的吞噬活性,其作用效果具有时间和浓度依赖性.扫描电镜(SEM)观察结果表明,MPL-1作用后的巨噬细胞呈现明显的活化状态,证明MPL-1对巨噬细胞具有明显的免疫调节作用.
- 周明慧王春玲赵旭荣曹小红
- 关键词：凝集素纯化巨噬细胞免疫调节
