国家科技重大专项(2014ZX10005-002)
- 作品数：12 被引量：42H指数：5
- 相关作者：杨怡姝王小利曾毅郑永唐沈思嗣更多>>
- 相关机构：北京工业大学昆明医科大学中国科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂的体外抗HIV-1活性被引量：1
- 2016年
- 本文评价了5个二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂(DY1203、DY1204、DY1119、DY1208和DY1209)的体外抗HIV-1药效学。采用MTT法检测了5个化合物对人T淋巴细胞系(C8166、MT-4、H9)和PBMC的毒性作用;p24抗原ELISA方法测定了化合物对1株HIV-1实验株、4株耐药株和3株临床株的抗病毒活性;HIV逆转录酶试剂盒检测了化合物体外对HIV-1重组逆转录酶的抑制活性。结果表明,5个化合物中,DY1203和DY1204对不同细胞的毒性均很小(CC50>200μg·m L-1)。DY1119、DY1208和DY1209具有显著的抗病毒活性,对实验株HIV-1IIIB、NRTI耐药株HIV-174V、PI耐药株HIV-1RF/V82F/184V、FI耐药株HIV-1NL4-3 gp41(36G)N42S和临床分离株(HIV-1KM018、HIV-1TC-1、HIV-1Wan)均有很强的抑制作用,而NNRTI耐药株HIV-1A17对其有不同程度耐药。5个化合物对HIV-1重组逆转录酶有不同程度的抑制效应,其中DY1208有显著的抗HIV-1活性和较高的治疗指数,安全性高,有望成为新的抗HIV-1先导化合物。
- 王萍张高红向思颖杨柳萌唐成润马晓东郑永唐
- 关键词：非核苷类逆转录酶抑制剂HIV-1耐药株抗病毒活性
- 氯喹联合用药体外抗HIV-1作用研究被引量：5
- 2018年
- 本文评价氯喹与已上市抗HIV药物联合使用的体外抗HIV-1作用和抑制TLR7激动剂引起的浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,p DC)活化及Ⅰ型干扰素分泌上调的作用。采用MTT法检测氯喹对C8166、TZM-bl、PBMC细胞的毒性。采用荧光素酶活性检测方法、ELISA检测p24抗原测定氯喹分别与雷特格韦(rategrivir,RAL)、恩夫韦肽(enfuvirtide,T-20)、茚地那韦(indinavir,IDV)和依法韦仑(efavirenz,EFV)联合用药抗HIV-1_(ⅢB)、HIV-1_(KM018)活性。流式细胞术检测氯喹分别与RAL、IDV联合使用对细胞p DC活化水平的影响。定量PCR检测氯喹分别与RAL、IDV联合使用对细胞内IFN-α、IFN-βm RNA水平上调的影响。结果表明,氯喹对C8166、TZM-bl和PBMC细胞表现出较低的细胞毒性,半数细胞毒浓度(median cytotoxic concentration,CC_(50))分别为85.02±0.28、73.67±5.10和91.84±4.10μmol·L^(-1)。氯喹分别与RAL、T-20、IDV、EFV联合用药呈中度协同、强协同、相加、中度拮抗效果。氯喹分别与RAL、IDV的联合使用相比于氯喹单药使用对p DC活化水平和IFN-α、IFN-βm RNA表达水平的下调作用无统计学差异。本研究发现氯喹与不同类型的已上市抗HIV药物联合使用呈现不同程度的协同、拮抗或相加抗HIV-1作用。氯喹分别与RAL、IDV联合使用不影响氯喹对TLR7激动剂引起的p DC活化和Ⅰ型干扰素分泌上调的抑制作用。本研究希望能够给氯喹应用于抗HIV治疗提供参考,促进氯喹更广泛地应用于临床研究和治疗中。
- 向思颖陈敏陈欢罗荣华罗荣华杨柳萌郑永唐
- 关键词：氯喹人类免疫缺陷病毒-1联合用药
- 以J-Lat 11.1为HIV-1潜伏感染模型再激活效果检测方法的初步探讨
- 2016年
- 目的：比较3种检测方法的优缺点,探索全面评价人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）潜伏感染再激活剂的检测方法。方法：以HIV-1潜伏细胞株J-Lat 11.1为潜伏感染模型、豆蔻酰佛波醇乙酯（PMA）为潜伏再激活剂,用流式细胞术检测绿色荧光蛋白（GFP）阳性细胞所占比例,酶标仪检测GFP表达强度,活细胞成像系统检测GFP的动态表达情况。结果：流式细胞术检测显示PMA再激活出GFP阳性细胞的比例随作用浓度的增加（0~10 nmol/L）而增加,但当PMA浓度高于10 nmol/L后变化不再明显;酶标仪检测显示PMA处理后24 h内,GFP荧光强度逐渐增高,之后可在高水平保持至48 h;活细胞成像系统则可以动态反映PMA处理后的再激活过程。结论：可采用流式细胞术检测GFP阳性细胞比例对HIV-1潜伏感染再激活剂进行初步筛选,再结合酶标仪或活细胞成像系统动态监测GFP的表达情况,综合评价再激活剂的作用强度和起效时间。
- 李莉莉杨怡姝王小利
- 关键词：人免疫缺陷病毒1型再激活
- 氯喹/羟氨喹在艾滋病治疗中的应用研究进展被引量：9
- 2017年
- 联合抗逆转录疗法(c ART)能有效抑制HIV复制和增加CD4+细胞数量,但对HIV引起的免疫活化则无明显抑制作用,持续免疫活化目前已经成为治疗AIDS的一大难题。氯喹/羟氯喹具有免疫调节功能,能抑制浆细胞样树突状细胞(p DC)活化进而有效降低免疫活化水平。此外,氯喹/羟氯喹还可通过干扰HIV包膜糖蛋白gp120糖基化抑制病毒复制及通过抑制记忆性T细胞自噬而诱导其凋亡,安全性高、毒性低,可作为一种辅助治疗药物用于HIV治疗。
- 向思颖张高红郑永唐
- 关键词：氯喹羟氯喹HIV免疫活化
- 虎杖靶向富集活性组分抗HIV-1活性研究被引量：2
- 2020年
- 目的探讨虎杖Polygonum cuspidatum富集活性组分体外对人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的抑制作用及作用靶点。方法运用表面等离子共振HIV-1多靶点筛选系统对虎杖不同工艺提取物进行筛选,整合酶氨基耦联柱靶向富集提取物中高活性成分,在TZM-bl细胞和PBMC细胞中对富集产物进行抗HIV-1病毒活性评价;采用荧光共振能量转移分析法测定药物对HIV-1整合酶3’加工的抑制作用;运用高通量ELISA法测定虎杖60%乙醇提取物的整合酶靶向富集产物(HZ60-IN)对整合酶链转移的影响;试剂盒检测HZ60-IN对逆转录酶和蛋白酶的影响。结果 HZ60-IN对整合酶有高亲和性。细胞水平病毒感染实验表明,在TZM-bl细胞中,HZ60-IN对HIV-1 NL4.3和1084i的半数抑制浓度(IC50)分别为(31.94±8.96)、(38.07±11.25)μg/mL;在2株PBMC细胞中,HZ60-IN对HIV-1 NL4.3病毒均显示显著的抑制活性。HZ60-IN对整合酶的3’加工和链转移均有抑制作用,其中对3’加工的IC50为(6.54±1.69)μg/mL,对链转移的IC50为(2.56±0.97)μg/mL,其不作用于HIV感染的进入阶段,对逆转录酶抑制活性较弱,对蛋白酶活性没有影响。结论 HZ60-IN有抗HIV-1病毒活性,主要通过影响HIV-1的整合酶活性发挥作用。
- 王小利胡秦胡秦艾萍刘伟马洪涛杨怡姝沈思嗣
- 关键词：虎杖HIV-1整合酶逆转录酶
- 活细胞成像系统在创新实践课程教学中的应用被引量：1
- 2019年
- 探索大型仪器设备活细胞成像系统用于生物技术专业创新实践课程的教学方式。以核转录因子κB信号通路知识点讲述为例,从专业知识、检测原理、实验设计、操作规程、实验结果等方面,系统阐述将活细胞成像系统引入创新实践课程的教学方案。课程教学与科学研究紧密联系,培养了学生的创新意识和实践能力。
- 王小利杨怡姝刘思杨郑雨晨肖向茜
- 关键词：大型仪器
- 人参皂苷抗病毒作用的研究进展被引量：8
- 2018年
- 人参皂苷作为人参主要的活性成分，药用价值较高。本文通过整理人参皂苷对肝炎病毒、呼吸道病毒、疱疹病毒、艾滋病毒、肠道病毒以及动物源病毒抑制作用的相关文献，探讨人参皂苷抗病毒作用的研究进展。
- 王宇晨王小利沈思嗣曾毅
- 关键词：人参人参皂苷类抗病毒药(中药)
- HIV-1潜伏感染体外实验模型研究进展被引量：1
- 2015年
- 潜伏感染的静息记忆CD4+T细胞是清除HIV-1病毒的一个重要障碍。处于潜伏状态的病毒多以原病毒c DNA的形式整合至宿主基因组中,但是病毒基因表达处于沉默状态,因此潜伏感染的细胞难以受到病毒的致细胞病变效应或机体特异性细胞毒性T细胞的杀伤,也不易受到抗反转录病毒治疗药物的作用。如何减少潜伏感染的细胞储存库是艾滋病治疗中亟需解决的一个问题。体内及体外HIV-1潜伏感染模型有助于深入了解HIV-1潜伏感染的建立、维持或打破机制,评价潜伏感染再激活剂的活性。在此侧重于介绍采用永生化细胞系、原代静息CD4^+T细胞或活化的CD4+T细胞建立的HIV-1潜伏感染体外实验模型。
- 康学军杨怡姝
- 关键词：人免疫缺陷病毒1型再激活体外实验模型
- HIV-1基因表达的转录调控被引量：1
- 2014年
- 高效抗逆转录病毒治疗(HAART)可以有效地抑制人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的复制及血浆病毒载量,延缓发病进程,改善、提高患者的生活质量和存活时间。但是,一旦停止治疗就会导致血浆病毒血症迅速反弹,HIV-1以原病毒的形式在静息记忆CD4+T等细胞中的持续存在是清除HIV-1的一个障碍。HIV-1基因转录的激活与阻抑决定了受感染细胞进入产毒性感染或潜伏感染。本文从原病毒整合位置与转录干扰、细胞转录因子与HIV-1启动子相互作用招募RNA聚合酶起始转录、转录的表观遗传调控和反式激活因子Tat及其相关蛋白促进转录延伸等方面探讨了HIV-1原病毒转录调控机制。
- 袁迪杨怡姝李泽琳曾毅
- 关键词：转录调控表观遗传调控
- 米碎花茎枝的化学成分研究被引量：5
- 2013年
- 为探讨山茶科(Theaceae)柃木属植物米碎花(Eurya chinensis R.Brown)茎枝的化学成分,从米碎花茎枝95%乙醇提取物中分离得到8个化合物。根据现代波谱技术和文献对照,鉴定其结构分别为:高根二醇(1)、白桦酸(2)、木栓酮(3)、羽扇豆醇(4)、β-谷甾醇(5)、豆甾醇(6)、邻羟基苯甲醛(7)、正二十九烷醇(8)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到。
- 刘新红黄日明李干龙钟艳霞徐志防邱声祥
- 关键词：山茶科茎枝化学成分
