国家高技术研究发展计划(2001AA215061)
- 作品数：9 被引量：122H指数：5
- 相关作者：王彦宏朱平樊春梅吴振彪卢宁更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院北京大学第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究被引量：68
- 2002年
- 在人类基因组完成工作框架图以后 ,人类功能基因组学成为最重要的任务之一。我们目前正在重点研究编码细胞因子和凋亡相关分子的人类功能基因。本综述介绍其中的 2个首先由我们实验室克隆的分子 ,即趋化素样因子 1(CKLF1)和程序化细胞死亡分子 5 (PDCD5 ,过去命名为TFAR19)。CKLF1是属于一个新的基因超家族的成员 ,具有体内外对不同白细胞的趋化活性、刺激骨骼肌增殖活性和刺激骨髓细胞增殖活性。在临床应用上 ,重组CKLF1蛋白质有可能用于肌萎缩的治疗 ,CKLF1抑制剂有可能用于变态反应和自身免疫病的治疗。PDCD5是凋亡的正调节分子 ,能够结合胱天蛋白酶 3,并在体外延长其半衰期。较多证据表明 ,PDCD5在肿瘤组织的表达低于正常组织。PDCD5有可能成为肿瘤。
- 马大龙
- 关键词：细胞因子细胞凋亡PDCD5TFAR19
- 肿瘤转移体外实验中细胞计数方法探讨被引量：6
- 2004年
- 目的 :探讨肿瘤转移体外实验中最佳的细胞计数方法 .方法 :采用四唑盐 (MTT)比色法和结晶紫 (CV)比色法计数不同浓度培养细胞数 ;采用CV比色法和苏木素 伊红 (HE)染色法检测体外重组基底膜侵袭实验穿膜细胞数 ;采用MTT比色法和CV比色法测定肿瘤细胞与细胞外基质黏附实验细胞数 .结果 :MTT和CV比色法计数不同浓度培养细胞可分别准确计数到 2 .75× 1 0 4/mL和 4 .3× 1 0 2 /mL ;CV比色法无法准确计数重组基底膜侵袭实验中的细胞 ,可以计数黏附实验中的细胞 ;HE染色法可以计数重组基底膜侵袭实验中的细胞 .结论 :HE染色法计数细胞适用于体外重组基底膜侵袭实验 ;CV比色法计数细胞适用于肿瘤细胞与细胞外基质的黏附实验 .
- 唐浩商澎骞爱荣楼朝阳陈志南
- 关键词：MTT比色HE染色细胞黏附
- C57BL/6小鼠胶原诱导关节炎的特异性细胞及体液免疫反应被引量：6
- 2005年
- 目的观察并比较C57BL/6小鼠初次和加强免疫Ⅱ型胶原后的特异性细胞及体液免疫应答,探讨特异性免疫应答在胶原诱导关节炎发病中的意义。方法用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)在C57BL/6小鼠尾部皮内注射,诱导胶原性关节炎(CIA)。分别取初次免疫后19d及加强免疫后7、28dCIA小鼠脾脏淋巴细胞,CⅡ体外刺激扩增后,采用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和流式细胞术分别测定其扩增情况和表型;并通过流式细胞术测定外周血中细胞内细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4的水平分析Th1和Th2亚群的变化;同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定不同时期CIA模型血清中抗CⅡ抗体的表达。结果①免疫后不同时间,CIA模型组外周血中CD4+IFN-γ+细胞百分率明显高于对照组(P<0.01),但CIA模型组内不同时间CD4+IFN-γ+细胞百分率差异无统计学意义;②特异性增生实验显示,CIA模型组CD4+T细胞中BrdU+细胞率均高于对照组,但加强免疫后BrdU+细胞率明显低于初次免疫(72±6)%,并且有逐渐降低的趋势;初次免疫后CD4+IFN-γ+细胞百分率为(13±4)%,加强免疫后阳性细胞百分率也下降;③ELISA法测定不同时间血清中CIA模型组抗CⅡ抗体水平,28d吸光度(A)值达到最高,其后逐渐减低,到35d左右(即加强免疫后14d)出现较低的抗体水平。
- 李晓燕朱平樊春梅王彦宏贾俊峰郑朝晖
- 关键词：C57BL/6小鼠特异性细胞体液免疫反应C57BL/6小鼠干扰素(IFN)-Γ细胞内细胞因子脾脏淋巴细胞
- 基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9与类风湿性关节炎关节破坏的关系被引量：23
- 2006年
- 目的:观察血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9与类风湿性关节炎患者(Rheumatoid arthritis,RA)关节破坏的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法测定90例未经治疗的早期RA患者及20例健康人血清中MMP-2、MMP-9,并分析其与RA患者X线表现积分(ΔLarsen)及健康评分(ΔHAQ)、CRP的关系。结果:血清MMP-2、MMP-9水平与C反应蛋白(CRP)、ΔLarsen、ΔHAQ显著相关,其相关系数及P值分别为r=0·40和0·46,P<0·01;r=0·28和0·31,P<0·05;r=0·30和0·34,P<0·01。18例最初CRP正常的患者,MMP-2及MMP-9水平与观察12个月后出现关节侵蚀改变相关(r=0·59和0·48,P<0·05)。回归分析发现,最初无骨侵蚀改变的患者,Larsen积分显示的骨侵蚀进展与MMP-2含量密切相关(r=0·32,P<0·01)。结论:血清MMP-2、MMP-9水平与RA患者的病情活动及早期关节的骨侵蚀显著相关,可以作为无骨破坏的早期RA患者出现骨侵蚀的有益预测指标。
- 吴振彪卢宁王彦宏史战国樊春梅贾筠刘玲冷南朱平
- 关键词：血清MMP-2MMP-9早期类风湿性关节炎骨侵蚀
- GM-CSF对类风湿性关节炎单核细胞MMP-2,MMP-9合成及CD147表达的调节作用被引量：1
- 2005年
- 目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者单核/巨噬细胞用GM-CSF刺激后,基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)合成及CD147表达的变化。方法:分离RA患者外周血及滑液单核细胞,用GM-CSF刺激,明胶酶谱法测定刺激后MMP-2,MMP-9的活性。用流式细胞术测定细胞表面CD147表达。结果:GM-CSF刺激后,RA单核细胞形态及表面标志改变,MMP-2,MMP-9合成及表面CD147增加,与GM-CSF的剂量相关;滑液单核细胞高于外周血。相关性分析证实CD147表达与MMP-2,MMP-9增加呈正相关。结论:GM-CSF可以促进单核/巨噬细胞CD147表达及MMP合成,这可能是RA发病中CD147表达及MMP合成的调控机制之一。
- 吴振彪卢宁樊春梅王彦宏朱平
- 关键词：类风湿性关节炎GM-CSF单核细胞CD147
- EMMPRIN/CD147对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞合成基质金属蛋白酶的刺激作用被引量：2
- 2005年
- 目的观察细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN/CD147)对类风湿关节炎(RA)患者滑膜成纤维细胞(FLS)合成基质金属蛋白酶(MMPs)的作用。方法手术切除的RA患者的滑膜组织,分离成FLS,传代培养。明胶酶谱法测FLS的MMPs含量。将FLS与高表达EMMPRIN/CD147的单核细胞株(THP)-1共培养,观察THP-1细胞对FLS MMPs表达量的影响,同时观察EMMPRIN/CD147拮抗肽激活蛋白(AP)-9对FLS MMPs表达的影响。结果THP-1细胞表达高水平的CD147,而MMP-2、MMP-9的表达水平很低;分离的FLS表达低水平的CD147和一定水平的MMP-2、MMP-9。二者混合培养后,FLS表达MMP-2、MMP-9水平显著升高,随着THP-1细胞数的增加,MMP-2、MMP-9的合成量也增加。THP-1对FLS合成MMP-2、MMP-9的刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制。结论CD147对RA患者FLS合成MMP-2、MMP-9有刺激作用,而这种刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制。
- 吴振彪卢宁史战国樊春梅王彦宏朱平
- 关键词：CD147类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
- GM-CSF对类风湿性关节炎患者单核细胞合成MMP的影响被引量：3
- 2005年
- 观察GM-CSF刺激前后,类风湿性关节炎(RA)患者单核/巨噬细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)合成及CD147表达的变化。从RA患者外周血及滑液分离单核细胞。RPMI1640培养液中培养,加入不同剂量的GM-CSF,用明胶酶谱法测定刺激24h、48h、72h后MMP-2、MMP-9的活性。用流式细胞术测定刺激前后细胞表面CD147表达量。GM-CSF刺激后,细胞呈多形性的巨噬细胞样改变,MMP-2,MMP-9合成增加,而且这种刺激作用与GM-CSF的剂量相关,100ng/ml时刺激作用显著高于12.5ng/ml及25ng/ml;而与作用时间无显著相关性;滑液单核细胞MMP-2、MMP-9表达水平高于外周血单核细胞。GM-CSF刺激后,单核细胞表面CD147的表达显著高于刺激前;滑液单核细胞表达量高于外周血。GM-CSF刺激后,RA患者外周血及滑液单核细胞MMP-2、MMP-9表达增加,同时伴随细胞表面CD147表达增加。
- 吴振彪卢宁王彦宏樊春梅朱平
- 关键词：GM-CSF类风湿性关节炎CD147
- GM-CSF刺激后类风湿性关节炎患者单核细胞MMP-1,3合成及CD147表达变化
- 2005年
- 目的:观察类风湿性关节炎患者单核/巨噬细胞用GM-CSF刺激活化前后,基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-3)合成及CD147表达的变化。方法:从10例类风湿性关节炎患者患者外周血及滑液分离单核细胞,同时取10例健康献血员外周血单核细胞为对照。分离的单核细胞在RPMI1640培养液中培养,用GM-CSF刺激,用ELISA法测定刺激24h,48h,72h后MMP-1,MMP-3的含量。用流式细胞术测定刺激前后细胞表面CD147表达量。结果:GM-CSF刺激后,细胞呈多形性的巨噬细胞样改变,MMP-1,MMP-3合成增加,而且这种刺激作用与GM-CSF的剂量相关,100ng/ml时刺激作用显著高于12.5ng/ml及25ng/ml,而与作用时间无显著相关性;滑液单核细胞MMP-1,MMP-3表达水平高于外周血单核细胞。GM-CSF刺激后,单核细胞表面CD147的表达显著高于刺激前;滑液单核细胞表达量高于外周血。结论:,RA患者外周血及滑液单核细胞用GM-CSF刺激活化后MMP-1,MMP-3合成增加,CD147表达亦增加,MMPs合成增加可能与CD147表达增加相关。
- 吴振彪卢宁王彦宏樊春梅朱平
- 关键词：类风湿性关节炎患者GM-CSFCD147MMP-1GM-CSF健康献血员MMP3
- CD147分子和基质金属蛋白酶在类风湿关节炎滑膜中的表达被引量：16
- 2004年
- 目的 探讨类风湿关节炎(RA)滑膜组织CD147的表达及其与基质金属蛋白酶(MMP)-1和MMP-2表达的相关性。方法 采用免疫组织化学SP(Streptavidin/peroxidase)染色方法检测11例RA患者受损关节软骨—血管翳接合部(CPJ)滑膜组织中CD147和MMP-1及MMP-2的表达,并与3例骨关节炎(OA)患者滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的检测相对照。结果 3例OA滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的表达均为阴性,而11例RA滑膜组织中均有CD147和MMP-1及MMP-2的表达。其中,表达CD147的细胞为单核—巨噬细胞、淋巴细胞和滑膜成纤维样细胞,表达MMP-1及MMP-2的细胞为滑膜成纤维样细胞。统计学分析表明RA滑膜细胞CD147的表达和MMP-1及MMP-2的表达间存在显著相关性。结论 CD147在RA滑膜组织中表达增高,可能是导致RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。
- 董惟佳朱平樊春梅王彦宏肖李冰
- 关键词：CD147分子基质金属蛋白酶类风湿关节炎滑膜免疫组织化学
