国家自然科学基金(30772818) 作品数:10 被引量:75 H指数:5 相关作者: 杜惠兰 杨宏敏 宋翠淼 段彦苍 马惠荣 更多>> 相关机构: 河北医科大学 河北中医学院 河北联合大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究 被引量:18 2014年 目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠(ASR)腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法 60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组(灌服补肾调经方混悬液)、逍遥丸组(灌服逍遥丸混悬液),每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH);HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低(均P<0.01);腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高(P<0.05,P<0.01),且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常(均P>0.05);两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。 徐丁洁 洪丽文 徐洪 杨宏敏 刘曼芳 杜惠兰关键词:补肾调经方 逍遥丸 腺垂体 卵巢 逍遥丸对雷公藤多苷致大鼠排卵障碍模型卵巢氧化损伤和颗粒细胞凋亡的影响 被引量:5 2018年 目的观察逍遥丸对雷公藤多苷致排卵障碍模型大鼠卵巢氧化损伤和颗粒细胞凋亡的影响。方法建立雷公藤多苷致排卵障碍大鼠模型,136只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、逍遥丸高剂量组和低剂量组,每组34只。比色法测定血清和卵巢组织中Tbil、Dbil和T-AOC的含量,硫代巴比妥法测定MDA水平;末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick-end labeling,TUNEL)法检测卵巢颗粒细胞的凋亡水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清及卵巢组织中Tbil、Dbil和T-AOC水平明显降低(均P<0.01),MDA明显升高(均P<0.01),卵巢颗粒细胞的凋亡率明显增加(P<0.01)。与模型组比较,逍遥丸(54、27 g·kg-1)明显提高大鼠血清和卵巢组织中Tbil、Dbil和T-AOC水平(均P<0.05),降低卵巢组织中MDA水平(均P<0.05)及颗粒细胞的凋亡(P<0.01),其中逍遥丸高剂量组药效最佳。结论逍遥丸通过改善雷公藤多苷致排卵障碍模型大鼠的卵巢氧化损伤和颗粒细胞的凋亡,从而治疗排卵障碍性相关疾病。 周楠 杨宏敏 马惠荣 回丽敏 刘振兴 杜惠兰关键词:逍遥丸 细胞凋亡 卵巢 逍遥丸含药血清对人卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响 被引量:4 2013年 目的探讨逍遥丸对卵巢颗粒细胞内分泌功能影响可能的分子机制。方法 12只Wistar大鼠随机分为逍遥丸低、中、高剂量组(每日灌服逍遥丸混悬液1ml/100g、2ml/100g、3ml/100g)和对照组(每日灌服生理盐水2ml/100g),连续4天,于末次灌胃后1h大鼠股动脉采血制备低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清及正常大鼠血清。收集行体外受精-胚胎移植患者卵泡液,提取颗粒细胞原代细胞培养24h,以低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清以及正常大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48h,分为逍遥丸低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(E2)、孕酮(P)、环磷酸腺苷(cAMP)的水平,采用蛋白印迹法和实时定量荧光PCR法分别检测促卵泡素受体(FSHR)蛋白和FSHR mRNA、P450芳香化酶mRNA、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)mRNA在卵巢颗粒细胞的表达。结果与对照组比较,逍遥丸中、高剂量组培养液中E2、cAMP水平明显升高,逍遥丸低、中、高剂量组FSHR蛋白表达明显升高,逍遥丸高剂量组FSHR、P450芳香化酶mRNA表达明显升高,逍遥丸中剂量组PPAR γmRNA表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。与逍遥丸低剂量组比较,逍遥丸高剂量组E2、cAMP、FSHR蛋白及mRNA水平明显升高(P<0.01)。结论逍遥丸可能通过增加卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA的表达,使FSH更好发挥促进卵泡发育、排卵的作用,并通过调节FSHR、cAMP、P450芳香化酶、E2水平促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能。 杨宏敏 宋翠淼 周楠 陆君 路帅 马惠荣 段彦苍 徐华洲 杜惠兰关键词:逍遥丸 颗粒细胞 内分泌 卵泡刺激素受体 卵巢功能失调 补肾法、疏肝法对促性腺激素预处理小鼠排卵过程组织蛋白酶-L蛋白影响的比较研究 2012年 目的:探讨补肾法、疏肝法对小鼠排卵关键蛋白水解酶Cat L蛋白的影响。方法:选择体重16-18g未成年小鼠随机分为正常组、对照组、疏肝组和补肾组超促排卵,采用Western blot、免疫组化方法检测注射hCG后0h、4h、8h、12h Cat L蛋白在各组小鼠卵巢的表达强度。结果:注射hCG后4h与对照组比较,疏肝组、补肾组小鼠卵巢Cat L蛋白表达均升高(P<0.01);注射hCG后8h与对照组比较,疏肝组小鼠卵巢Cat L蛋白表达升高(P<0.01),补肾组无统计学差异(P>0.05);注射hCG后12h与对照组比较,补肾组小鼠卵巢Cat L蛋白表达升高(P<0.01),疏肝组无统计学差异(P>0.05)。结论:补肾法通过使卵巢Cat L蛋白表达增强,使卵泡壁破裂而达到促排卵的作用,疏肝法通过使卵巢CatL蛋白表达迅速达高峰起到促进排卵的目的。 段彦苍 杜惠兰 宋翠淼 贺明关键词:补肾法 疏肝法 小鼠 补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的影响 被引量:8 2014年 目的通过补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞卵泡刺激素/环磷酸腺苷-蛋白激酶A(follicle stimulating hormone/cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A,FSH/cAMP-PKA)通路的影响,探讨补肾调经方改善卵巢内分泌功能可能的分子机制。方法收集行体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)患者卵泡液,提取颗粒细胞进行原代细胞培养24 h,以低、中、高剂量补肾调经方人、大鼠含药血清以及正常人、大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48 h,分为补肾调经方低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(estrogen,E2)、孕酮(progesterone,P)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的水平,采用蛋白印迹法和Real-time PCR分别检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)蛋白和FSHR、P450芳香化酶(P450 aromatase,P450arom)mRNA在颗粒细胞的表达。结果人含药血清组:与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组培养液中E2、cAMP水平均明显升高(P<0.05),补肾强经方中剂量组P明显降低(P<0.01);补肾调经方中、高剂量组卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均明显增高(P<0.01),P450芳香化酶mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。大鼠含药血清组:与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组E2均升高(P<0.01),cAMP明显升高(P<0.05,P<0.01),补肾调经方中剂量组P明显降低(P<0.01);补肾调经方中、高剂量组人卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均增高(P<0.01),P450芳香化酶mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论补肾调经方可能通过调节卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的主要效应分子FSHR、cAMP、P450arom、E2,促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能。 宋翠淼 杨宏敏 陆君 周楠 路帅 段彦苍 马惠荣 徐华洲 杜惠兰关键词:补肾调经方 颗粒细胞 卵泡刺激素 杜惠兰辨治卵巢功能障碍型不孕经验 被引量:3 2020年 卵巢功能障碍是导致女性不孕的重要因素。杜惠兰教授基于丰富的临证经验认为,卵巢功能障碍型不孕的病机以肾、肝、脾功能失调,冲任气血失养为本,气滞痰湿、瘀阻冲任气血为标,提出了辨证和辨周期治疗的诊治思路,总结了肾气虚证、肾阳虚证、肾阴虚证、肝郁证、血瘀证、痰湿证的辨证用药规律,治疗以补、调为主,以使脏腑调和,冲任气血充盈、畅达,卵巢功能得以改善而成功受孕。 孙莹 杜惠兰关键词:辨证治疗 不孕 卵巢功能障碍 逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响 被引量:12 2011年 目的:以"女子以肝为先天"的中医理论为基础,选用逍遥丸作为疏肝法的代表方,比较逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响。方法:雌性Wistar大鼠给予雷公藤多甙片,雌性SD大鼠注射丙酸睾丸酮,将2种排卵障碍成功模型大鼠随机分为模型组和治疗组(灌服逍遥丸),给药5周,择动情前期,断头取血,检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P);取子宫,进行免疫组织化学染色,观察子宫内膜ER、PR的表达。结果:2种模型组均表现为血清E2、P值异常,子宫内膜ER、PR表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);经逍遥丸治疗后,均有不同程度的改善,差异均有统计学意义(P<0.05);两治疗组血清E2及子宫内膜ER表达与正常组比较,差异无统计学意义。结论:逍遥丸可通过改善卵巢激素和子宫内膜ER、PR的表达治疗排卵障碍性疾病。 徐丁洁 杜惠兰 徐洪 杨宏敏关键词:逍遥丸 雌激素受体 孕激素受体 雄激素致无排卵大鼠血清胆红素的变化 2009年 目的通过观察雄激素致无排卵大鼠血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素的情况,研究胆红素与无排卵性疾病的关系。方法采用9d龄SD雌性大鼠颈背部皮下注射雄激素的方法制造无排卵模型,以正常大鼠为对照。观察动情前2组大鼠胆红素含量的变化。结果无排卵大鼠血清总胆红素、间接胆红素水平明显低于正常组。结论血清总胆红素、间接胆红素水平降低可能与无排卵的发生有关。 罗亚萍 马惠荣 杜惠兰 杨秀芳 李国明关键词:雄激素类 胆红素 无排卵 补肾调经法治疗多囊卵巢综合征不孕症有效性与安全性的系统评价 被引量:18 2021年 目的系统评价补肾调经法指导下补肾调经方剂联合促排卵药物治疗多囊卵巢综合征(polysystic ovary syndrome,PCOS)不孕症的有效性和安全性。方法检索主要中英文数据库(中国知网、维普、万方、PubMed、CochraneLibrary、Embase、Clinical Trials),检索时间为建库至2020年11月。根据纳入和排除标准收集补肾调经方剂联合促排卵药物治疗PCOS不孕症的随机临床对照试验(randomized controlled trial,RCT),提取数据,用"Cochrane偏倚风险评估工具"对各研究进行质量评价,采用Review Manager 5.3软件对结局指标进行Meta分析,按照GRADE标准对结局指标进行证据质量评价。结果共纳入28项RCT,总样本数为2659例,其中试验组1337例,对照组1322例。系统评价结果显示,补肾调经方剂联合促排卵药物对比单一促排卵药物在提高排卵率、妊娠率及睾酮、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平,降低不良反应发生率,减小卵巢体积,增加子宫内膜厚度等方面疗效差异有统计学意义(P<0.01),在增加雌二醇、卵泡刺激激素(follicular stimulating hormone,FSH)方面两组差异无统计学意义(P>0.05)。对排卵率和妊娠率进行漏斗图分析,发现各研究点不对称,提示可能存在发表偏倚。根据GRADE方法评价证据质量,结果显示在排卵率和妊娠率方面质量为低级,其他方面均为极低级。结论补肾调经法指导下的补肾调经方剂联合促排卵药物治疗PCOS不孕症临床疗效确切,安全性较好,但因纳入研究的质量较低,临床使用时仍需谨慎。 陈静 梁潇 管凤丽 刘孟瑞 杜惠兰关键词:补肾调经法 多囊卵巢综合征 不孕症 促排卵药物 补肾调经方、逍遥丸对促性腺激素预处理小鼠组织蛋白酶-L mRNA的影响 被引量:11 2011年 目的探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L(cathepsin-L,Cat L)mRNA的影响。方法选择未成年小鼠随机分为正常组、对照组、逍遥丸组和补肾调经方组,每组12只,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测给予5IU人绒毛促性腺激素(humanchorionic gonadotropin,HCG)0、4、8、12h后Cat L mRNA在各组小鼠卵巢的表达强度。结果注射HCG0、4、8、12h后,Cat L mRNA在促性腺激素预处理小鼠对照组卵巢的表达逐渐升高,Cat L mRNA的相对表达含量分别为:0.066±0.005、0.383±0.045、0.737±0.024、1.036±0.073,各时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。注射HCG后4h与对照组比较,Cat L mRNA逍遥丸组、补肾调经方组小鼠卵巢表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01);注射HCG8h与对照组比较,逍遥丸组Cat LmRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.01),补肾调经方组差异无统计学意义(P>0.05);注射HCG12h后与对照组比较,补肾调经方组Cat LmRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.01),逍遥丸组差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾调经方通过使Cat L mRNA表达增强而达到促排卵的作用,消遥丸通过使Cat L mRNA表达高峰提前达到促排卵的目的。 段彦苍 杜惠兰 贺明 宋翠淼关键词:补肾调经方 逍遥丸 反转录聚合酶链式反应