国家自然科学基金(31271872)
- 作品数：5 被引量：33H指数：4
- 相关作者：杨潇饶瑜李维陈祥贵杨文宇更多>>
- 相关机构：西华大学四川省食品药品检验检测院宜宾西华大学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省学术和技术带头人培养资金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 豌豆酯酶的纯化和酯酶活性表征及其对农药的敏感性被引量：8
- 2019年
- 由于食品和环境中的农药残留对人体健康构成威胁,使得发展农残快速检测方法显得十分重要,从植物中发现新的酶源有助于降低酶抑制法快速检测农药的成本。实验从豌豆中分离纯化豌豆酯酶,并进行了酶类鉴别、特性表征和农药敏感性研究。纯化后的豌豆酯酶分子质量约为26.0kDa,具有较高的酯酶活性。通过底物和抑制剂特异性试验,将豌豆酯酶分类为羧酸酯酶。豌豆酯酶在质量浓度为0.45μg/mL,缓冲液pH6.5和反应温度40℃时,表现出最好的催化活性。豌豆酯酶可以被有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制。豌豆酯酶属于B型酯酶,可用于酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留,且经过纯化的豌豆酯酶满足大多数农药最大残留限值(MRL)检测的要求。
- 黄嫒马志强王玮宋燕飞李荣陈强陈祥贵杨潇
- 关键词：植物酯酶豌豆酶抑制法
- 猪肝酯酶农药敏感性及其与胆碱酯酶的对比研究被引量：9
- 2018年
- 【目的】探讨猪肝酯酶(PLE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。【方法】以乙酸-1-萘酯为底物,考察PLE酶促反应的最适温度、p H及几种农药的最佳作用时间,同时比较了PLE对几种特异性酶抑制剂的敏感性;以电鳗乙酰胆碱酯酶(ACh E-ee)、马血清丁酰胆碱酯酶(BCh E-hs)为对照酶源,采用酶抑制法,绘制5种有机磷农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、辛硫磷、毒死蜱)和5种氨甲酸酯类农药(灭多威、克百威、丁硫克百威、残杀威、涕灭威)的抑制曲线,并计算相关半抑制率(IC50),比较各种酶的农药敏感性。【结果】猪肝酯酶酶活测定方法的最佳温度、时间、p H分别为35℃、15 min、7.0;农药最适作用时间为15min;猪肝酯酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高,毒扁豆碱次之,盐酸多奈哌齐最低;与胆碱酯酶相比,猪肝酯酶对供试的多数有机磷农药和氨甲酸酯类农药的IC50更低,,敏感性更好。【结论】猪肝酯酶具有良好的农药敏感性,可以作为酶抑制法农药残留快速检测的候选酶源。
- 杨莉王羚佳开拓黄玉坤黄瑛杨潇陈祥贵
- 关键词：胆碱酯酶酶抑制法农药敏感性
- 锦龟酯酶与树鼩酯酶对部分有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性研究被引量：2
- 2019年
- 以Ellman法测定锦龟头部酯酶酶活,以吲哚乙酸酯为底物测定树鼩肝部酯酶酶活,并用正交试验确定最佳反应体系条件,比较几种特异性酶抑制剂的抑制效果;采用酶抑制法考察锦龟酯酶和树鼩酯酶对有机磷农药和氨基甲酸酯类农药的敏感性。结果表明:锦龟酯酶酶活测定方法的最佳条件为孵育温度35℃、孵育时间15min、缓冲液pH 7.5;树鼩酶酶活测定的最佳条件为孵育温度25℃、孵育时间15min、缓冲液pH 8.0;锦龟酯酶对盐酸多奈哌齐敏感性最高;树鼩脂酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高;锦龟酯酶和树鼩酯酶对敌百虫、辛硫磷、敌敌畏、速灭磷、磷铵、速灭威、克百威、灭多威、涕灭威、甲萘威的检出限均低于国标所规定的农药最大残留量限量。锦龟酯酶与树鼩酯酶粗提物具有良好的农药敏感性,可作为新型酶源用于酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。
- 宋燕飞陈祥贵向俊丞王玮阴鹏飞杨潇无
- 关键词：树鼩农药敏感性
- 美洲蟑螂头部乙酰胆碱酯酶酶活性测定及对5种常用农药的敏感性被引量：13
- 2013年
- 目的:研究农药对美洲蟑螂头部乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用,为农药快速检测提供新的敏感酶源。方法:选取美洲蟑螂为实验对象,以Ellman法测定酶活,并用正交试验确定最佳反应体系条件;采用酶抑制法为检测方法,考察其对有机磷农药和氨基甲酸酯类农药的敏感性,计算相关半抑制浓度(IC50);并同时测定电鳗乙酰胆碱酯酶(AChE)敏感性,以保证2种AChE在同一实验条件下具有可比性。结果:美洲蟑螂AChE对敌百虫、敌敌畏、甲萘威、克百威、速灭威的IC50值分别为5.495、5.943、0.290、0.160、1.897μmol/L,对敌敌畏、甲萘威及速灭威的敏感性略高于电鳗AChE,后者对这5种农药的IC50值分别为3.990、7.656、1.002、0.007、7.568μmol/L。结论:美洲蟑螂AChE粗提物对5种农药表现较好的敏感性,可以作为新型敏感酶源的系统研究。
- 何绍志李维王雁杨潇饶瑜杨文宇陈祥贵
- 关键词：乙酰胆碱酯酶农药敏感性
- 鸡血清丁酰胆碱酯酶与马血清丁酰胆碱酯酶对农药的敏感性的对比研究被引量：9
- 2014年
- 测定鸡血清丁酰胆碱酯酶(butyrylcholinesterase,BChE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。本文以马血清丁酰胆碱酯酶为对照,以碘化硫代丁酰胆碱为底物,采用Ellman法,研究了鸡血清丁酰胆碱酯酶的酶学性质及其对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性,计算相关半抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC50)。结果表明,两种BChE在35℃、pH 8.0时达到最佳的反应活性,无底物抑制效应,对毒扁豆碱敏感,对盐酸多奈哌齐相对不敏感;鸡血清BChE对敌百虫、克百威、灭多威、速灭威、敌敌畏的IC50值分别为0.77、31.99、1.14、5.49、0.95μmol/L;马血清BChE对这五种农药的IC50值分别为3.88、1.22、22.58、24.18、5.46μmol/L。除克百威外,鸡血清BChE对供试农药的敏感性均高于马血清BChE。因此,鸡血清BChE具有较好的农药敏感性,可以作为农药残留快速检测的候选酶源。
- 李维何绍志张全杨潇饶瑜钱珊陈祥贵
- 关键词：鸡血清农药敏感性
